基本方案2转染原代气管上皮细胞
试剂、试剂盒聚凝胺HamF-12培养基仪器、耗材原代气管上皮细胞培养皿针筒过滤器MWCO 分析膜实验步骤展......阅读全文
基本方案2－转染原代气管上皮细胞
试剂、试剂盒聚凝胺HamF-12培养基仪器、耗材原代气管上皮细胞培养皿针筒过滤器MWCO 分析膜实验步骤展
基本方案4－基因转移极化气管上皮细胞
试剂、试剂盒HBSS蔗糖溶液乳糖保存缓冲液Ussing chamber 培养基MilliceU-HA 培养板嵌入物HamF-12培养基PBS仪器、耗材过滤器离心机Filtron 100K 浓缩器水浴箱MWCO 透析膜实验步骤展开
基本方案3－生成极化的单层气管上皮细胞
实验方法原理1试剂、试剂盒冰乙酸胶原ⅥPBS血清气管培养基Ussing chamber 培养基仪器、耗材过滤器培养板嵌入物组织培养皿桌面离心机24孔培养板实验步骤展开
学会这些，轻松完成小鼠气管上皮细胞的原代培养
小鼠气管上皮细胞分离自小鼠气管组织，分布于小鼠气管内表面，细胞贴壁生长，呈铺路鹅卵石状镶嵌排列，胞体肥厚、透明，呈菱形或多角形，形成多个小岛样克隆。 气管上皮是气道与外界环境接触的防线，不仅是各种病原体、炎症介质作用的靶细胞，还作为效应细胞合成、释放多种炎性介质和细胞因子从而参与气道炎症及免
原代细胞可转染哪些
原代细胞可用来转染 siRNA、antisense RNA、microRNA 等 200bp 以内的小分子 RNA 和 DNA，可转染绝大多数原代细胞。目前，无论国外还是国内，原代细胞的核酸转染都是个热点难题，市场还缺乏真正有效的商品化的原代细胞核酸转染试剂。效转染绝大多数原代细胞，获得比较理想
原代肾上皮细胞培养实验
实验方法原理 将自皮质切除的组织快切成碎块，冲洗后放入胶原蛋白酶和胰蛋白酶混合液，摇晃消化。定时用吸管研磨组织块，然后收集分离的细胞。用一定孔径大小的滤网过滤细胞悬液，除去未消化的组织块。然后，洗细胞，清除消化酶。用添加血清的培养液混悬细胞，
原代肾上皮细胞培养实验
原代肾上皮细胞培养实验 实验方法原理 将自皮质切除的组织快切成碎块，冲洗后放入胶原蛋白酶和胰蛋白酶混合液，摇晃消化。定时用吸管研磨组织块，然后收集分离的细胞。
原代肾上皮细胞培养实验
实验方法原理将自皮质切除的组织快切成碎块，冲洗后放入胶原蛋白酶和胰蛋白酶混合液，摇晃消化。定时用吸管研磨组织块，然后收集分离的细胞。用一定孔径大小的滤网过滤细胞悬液，除去未消化的组织块。然后，洗细胞，清除消化酶。用添加血清的培养液混悬细胞，将细胞接种于塑料培养器皿。实验材料肾组织片试剂、试剂盒DME
原代神经元的磁辅助转染
实验概要本实验的目的是高效地将各类核酸如DNA、RNA或寡核苷酸转染进初级神经元和永生化神经细胞中。实验原理磁转染TM是一种新颖、简单而高效的细胞体外或体内转染方法。这项技术利用磁力来驱动结合了磁性粒子的核酸进入靶细胞，从而使细胞能在几分钟之内获得完全剂量的RNA或DNA，且各细胞获得量基本一致。N
基本方案6－对人类支气管移植物的转基因
实验材料原初增生人类支气管细胞试剂、试剂盒反转录病毒上清液HamF-12 培养基实验步骤用反转录病毒体外转导1a.用重组反转录病毒转导原初增生人类支气管细胞（基本方案 2)。转染细胞三次为最好的转导。2a.胰蛋白酶处理原初支气管上皮细胞（一般接种后 5 山基本方案 1，第 12 步）并接种到异种移植
基本方案1－分离人气管表皮细胞
实验材料人肺试剂、试剂盒FBSHamF-12 培养基膜酶 EDTA胰酶抑制缓冲液仪器、耗材解剖器具组织培养皿离心管平台振动器桌面离心机镇铬合金或铜金属丝网冷冻管实验步骤展开
原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化
原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化 PriCells-原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化 原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长，既有上皮样细胞又有纤维样细胞，纤维样细胞又包括成纤维细胞、肌细胞、骨细胞、滑膜细胞等。混杂的细胞会直接影响实验结果。 在体外培养原代细胞时，为了保
原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化
PriCells-原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长，既有上皮样细胞又有纤维样细胞，纤维样细胞又包括成纤维细胞、肌细胞、骨细胞、滑膜细胞等。混杂的细胞会直接影响实验结果。在体外培养原代细胞时，为了保证实验结果的可靠性、一致性、稳定性、和可重复性，要求采用
RFect原代细胞小核酸siRNA转染试剂/miRNA转染试剂使用说明
RFectPM原代细胞小核酸转染试剂（RFect原代细胞小核酸siRNA转染试剂/miRNA转染试剂） 货 号：BIOG-11014: 0.5ml BIOG-11015
原代肺泡上皮细胞的体外分离培养
1、完全无血液残留肺脏组织：2、消化肺组织：常用细胞消化酶：胰蛋白酶、弹性蛋白酶、胶原酶。经支气管将酶灌注到完整的肺中消化，或把肺组织剪碎放入消化液中消化。前者比后者更有效。3、分离纯化细胞：原代肺泡上皮细胞的分离纯化主要方法：（1）密度梯度离心法：密度梯度离心分离细胞的原理是不同细胞的沉降系数不同
正常视网膜色素上皮细胞原代培养
实验材料：1. 材料来源：人眼、兔眼或者猪眼等；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 特殊取材器械：眼球托与7-0尼龙线。以灭菌的白色橡胶反口胶塞作为眼球托；4. 消毒液：200IU/ml的庆大
正常晶状体上皮细胞原代培养
实验材料：1. 材料来源：人眼、兔眼或者猪眼等；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 器械：无齿显微小镊子2把、培养板和培养皿若干；4. 培养液：为含15%胎牛血清的DMEM培养液；实验方法：1. 取材1）摘取动物或人的供体
细胞转染方法、转染效率低的原因及其解决方案
细胞转染常用方法概述 转染是将外源性基因导入细胞内的一种技术。随着基因与蛋白功能研究的深入，转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。电穿孔法、显微注射和基因枪属于通过物理方法将基因导入细胞的范例；化学介导方法很多，如经典的磷酸钙共沉淀法、脂
各类上皮细胞培养2
6）毛细血管内皮细胞培养 肿瘤条件培养基制备： 1．取C3H 小鼠的S-180 实体肉瘤组织。 2．胰蛋白酶消化，Dulbecco 改良Eagle 氏培养液15ml（含10％小牛血清），接种到T-75 Falcon 产培养瓶中培养。 3．在细胞生长接近完全汇合时，收集培养液制成条件培养基；再用含10
基本方案5－人类支气管异种嫁接的繁殖
实验材料Fisher 344 大鼠无胸腺小鼠试剂、试剂盒乙醇MEM初级支气管上皮氯胺酮甲苯噻嗪PBS聚乙烯酮碘HamF-12 培养基仪器、耗材硅橡胶管聚四氣乙燦树脂管转换器铬镍合金A钢线组织培养皿气体灭菌囊螺帽管2-0编织缝线止血钳实验步骤展开
概述原发气管支气管肿瘤的治疗方案
气管肿瘤一旦明确诊断，应首先考虑手术治疗。气管支气管外科手术的主要目的是彻底切除病变，消除梗阻，解除通气障碍，重建呼吸道。外科手术应根据瘤体的大小、部位选择不同的术式进行病变气管段切除和气管重建术。 1.手术适应证 气管肿瘤一旦诊断明确，均应首先考虑手术切除，病变切除虽力求彻底，但气管可切除的
方案－23.2－角膜上皮细胞培养实验
实验方法原理 将角膜组织置于胶原蛋白上，使其附着。然后，在涂有纤连蛋白和胶原蛋白的培养皿扩增培养。 试剂、试剂盒 D-PBSA
方案23.3－乳腺上皮细胞培养实验
乳腺上皮细胞培养 实验方法原理 在内源性巨噬细胞存在的条件下，将经离心得到的哺乳早期的乳汁上皮细胞放入营养丰富的培养液中培养，并可用混合性蛋白酶螯合液传代。
方案27.12－脂质体介导的瞬时转染
方案27.12 脂质体介导的瞬时转染 实验材料 靶细胞 DNA
基本方案2－RNA－抽提和标记
试剂、试剂盒TRIzol 试剂PBS氣仿乙醇乙酸钠引物Superscript Ⅱ RNase H反转录酶10 X low-T dNTP 混合物EDTATE 缓冲液仪器、耗材RNeasy Maxi 试剂盒组织匀浆机圆底离心管圆锥底离心管水平离心机薄壁 PCR 管热循环仪荧光扫描仪实验步骤展
原代细胞传代基本技术
1. 选用原代细胞生长状态好（90－95％），生长数量大于5×10⁵进行传代。2. 吸除原代细胞培养液。用含双抗的1×PBS（pH7.4）清洗细胞培养瓶2次。3. 3ml细胞消化液加入细胞培养瓶，轻轻摇动，使细胞消化液覆细胞培养瓶底。（建议使用赛奥斯的原代细胞消化液。）4. 细胞培养瓶置于5%CO2
hepg2细胞siRNA转染条件
之前我们用过Lipo，说明书上要求细胞的密度在70%左右，同时在转染后的4-6小时注意要换培养液，后来我们实验室换了RFect sRNA Transfection Reagent，细胞密度在45%左右 ,设置siRNA终浓度10nM,30nM,50nM,100nM四个梯度，每个梯度最好做2个复孔，一
原代细胞转染小核酸siRNA等操作步骤和注意事项
原代细胞相对普通传代细胞要难转染，但用对了试剂一样可以拥有很高的转染效率和实验结果，下面以RFect为例，简单介绍下原代细胞转染的操作步骤和注意事项。原代细胞转染操作步骤（以24孔培养板为例）：A. 细胞接种：转染前一天接种细胞，每孔500 μl培养基（不可加抗生素），使细胞在转染时密度在30-50
气管内肿瘤切除气管重建术麻醉处理2
2.麻醉及手术 2.1麻醉前准备通气预案： （1）病例1，选择在适宜镇静镇痛的情况下，局麻下气管切开建立外科气道，再诱导；病例2－4，每位患者诱导时均行通气试验，若通气困难可唤醒患者；（2）准备硬质气管镜扩张气管，纤维支气管镜确定气管导管位置；（3）准备全套各型号气管导管，环甲膜穿刺包和喉罩（3、4
方案23.7－胰腺上皮细胞分离及培养实验
实验方法原理 从豚鼠胰腺组织分离细胞，用纱布或尼龙网过滤细胞悬液，将过滤的细胞悬液轻轻加于 BSA 液上面。通过 3 次连续离心和混悬细胞，使呈团状的细胞分散。然后，将细胞接种于涂有胶原蛋白的培养器皿。