原代肾上皮细胞培养实验
实验方法原理 将自皮质切除的组织快切成碎块,冲洗后放入胶原蛋白酶和胰蛋白酶混合液,摇晃消化。定时用吸管研磨组织块,然后收集分离的细胞。用一定孔径大小的滤网过滤细胞悬液,除去未消化的组织块。然后,洗细胞,清除消化酶。用添加血清的培养液混悬细胞,将细胞接种于塑料培养器皿。 实验材料 肾组织片 试剂、试剂盒 DMEM FBS 胶原蛋白酶 胰蛋白酶 仪器、耗材 手术刀 ......阅读全文
原代肾上皮细胞培养实验
实验方法原理将自皮质切除的组织快切成碎块,冲洗后放入胶原蛋白酶和胰蛋白酶混合液,摇晃消化。定时用吸管研磨组织块,然后收集分离的细胞。用一定孔径大小的滤网过滤细胞悬液,除去未消化的组织块。然后,洗细胞,清除消化酶。用添加血清的培养液混悬细胞,将细胞接种于塑料培养器皿。实验材料肾组织片试剂、试剂盒DME
原代肾上皮细胞培养实验
实验方法原理 将自皮质切除的组织快切成碎块,冲洗后放入胶原蛋白酶和胰蛋白酶混合液,摇晃消化。定时用吸管研磨组织块,然后收集分离的细胞。用一定孔径大小的滤网过滤细胞悬液,除去未消化的组织块。然后,洗细胞,清除消化酶。用添加血清的培养液混悬细胞,
原代肾上皮细胞培养实验
原代肾上皮细胞培养实验 实验方法原理 将自皮质切除的组织快切成碎块,冲洗后放入胶原蛋白酶和胰蛋白酶混合液,摇晃消化。定时用吸管研磨组织块,然后收集分离的细胞。
原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化
PriCells-原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长,既有上皮样细胞又有纤维样细胞,纤维样细胞又包括成纤维细胞、肌细胞、骨细胞、滑膜细胞等。混杂的细胞会直接影响实验结果。在体外培养原代细胞时,为了保证实验结果的可靠性、一致性、稳定性、和可重复性,要求采用
原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化
原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化 PriCells-原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化 原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长,既有上皮样细胞又有纤维样细胞,纤维样细胞又包括成纤维细胞、肌细胞、骨细胞、滑膜细胞等。混杂的细胞会直接影响实验结果。 在体外培养原代细胞时,为了保
上皮细胞培养
1、取材:外科植皮或手术残余皮肤小块,早产流产儿皮肤更好,取角化层薄者,切成0.5-1平方厘米小块。2、置0.02%EDTA中,室温,5分钟。3、换入0.25%胰蛋白酶中,4℃过夜。4、分离:取出皮块,用血管钳或镊子将表皮与真皮层分开。5、取出表皮,剪成更小的块后,置0.25%胰酶中,37℃,30—
上皮细胞培养
1)表皮细胞培养 1.取材:取外科植皮或手术残余皮肤小块,以角化层薄者为佳,早产流产儿皮肤更好,切成0.5~1平方厘米小块。 2.EDTA处理:先置入0.02%EDTA中室温置5分钟。 3.冷消化:换入0.25%胰蛋白酶中,置4℃过夜。 4.分离:取出皮肤,用血管钳或镊子把表皮与真皮层分
乳腺上皮细胞培养
实验方法原理 在内源性巨噬细胞存在的条件下,将经离心得到的哺乳早期的乳汁上皮细胞放入营养丰富的培养液中培养,并可用混合性蛋白酶螯合液传代。试剂、试剂盒 RPMI 1640胎牛血清人血清胰岛素氢化可的松霍乱毒素胰蛋白酶液仪器、耗材 培养瓶 离心管实验步骤 材料无菌1. 生长培养液:RPMI 16402
角膜上皮细胞培养
实验方法原理 将角膜组织置于胶原蛋白上,使其附着。然后,在涂有纤连蛋白和胶原蛋白的培养皿扩增培养。试剂、试剂盒 D-PBSA无血清角质形成细胞培养液 胰蛋白酶 EDTA Biocoat6孔培养板实验步骤 一、材料 灭菌无血清角质形成细胞培养液(keratinocyteserum-freemedium
原代细胞培养简介
原代细胞(primary culture cell)是指从机体取出后立即培养的细胞。有人把培养的第1代细胞与传10代以内的细胞统称为原代细胞培养。原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等,还可应用于当今热门的
乳腺上皮细胞培养实验
实验方法原理在内源性巨噬细胞存在的条件下,将经离心得到的哺乳早期的乳汁上皮细胞放入营养丰富的培养液中培养,并可用混合性蛋白酶螯合液传代。试剂、试剂盒RPMI 1640胎牛血清人血清胰岛素氢化可的松霍乱毒素胰蛋白酶液仪器、耗材培养瓶离心管实验步骤材料无菌1. 生长培养液:RPMI 16402. 胎牛血
乳腺上皮细胞培养实验
实验方法原理在内源性巨噬细胞存在的条件下,将经离心得到的哺乳早期的乳汁上皮细胞放入营养丰富的培养液中培养,并可用混合性蛋白酶螯合液传代。试剂、试剂盒RPMI 1640 胎
各类上皮细胞培养2
6)毛细血管内皮细胞培养 肿瘤条件培养基制备: 1.取C3H 小鼠的S-180 实体肉瘤组织。 2.胰蛋白酶消化,Dulbecco 改良Eagle 氏培养液15ml(含10%小牛血清),接种到T-75 Falcon 产培养瓶中培养。 3.在细胞生长接近完全汇合时,收集培养液制成条件培养基;再用含10
角膜上皮细胞培养实验
实验方法原理将角膜组织置于胶原蛋白上,使其附着。然后,在涂有纤连蛋白和胶原蛋白的培养皿扩增培养。试剂、试剂盒D-PBSA无血清角质形成细胞培养液胰蛋白酶EDTABiocoat6孔培养板实验步骤一、材料 灭菌无血清角质形成细胞培养液(keratinocyteserum-freemedium,KGM;C
各类上皮细胞培养1
上皮细胞培养 1)表皮细胞培养 1.取材:取外科植皮或手术残余皮肤小块,以角化层薄者为佳,早产流产儿皮肤更好,切成0.5~1 平方厘米小块。 2.EDTA 处理:先置入0.02%EDTA 中室温置5 分钟。 3.冷消化:换入0.25%胰蛋白酶中,置4℃过夜。 4.分离:取出皮肤,用血管钳或镊子把表皮
原代细胞培养技术分类
一、组织块直接培养法1、取材,用Hank's液洗涤三次,并剔除脂肪,结缔组织,血液等杂物。2、用手术剪将组织剪切成1mm3左右的小块,再用Hank's液洗三次。3、将组织块转移至培养瓶,并贴附于瓶底面。4、轻轻将培养瓶翻转,瓶底朝上,向瓶内注入适量的培养液,将培养瓶放置在37℃恒温箱
原代细胞培养的应用
1、为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段; 2、为传代培养创造条件; 3、服务于临床实践,用于药物筛选等。
原代细胞培养之取材
取材作为原代细胞培养过程中的第一部至关重要,以下几种取材技术,你都用过哪些方法呢? 各类组织取材,操作及注意事项: 1.皮肤和粘膜 主要取皮片,面积一般2~4平方厘米。 2.内脏和实体瘤 1)无菌环境; 2)熟悉所需组织的类型和部位; 3)要避开破溃、坏死液化部分,以防污染,尽量去
上皮细胞类培养实验_胃上皮细胞培养实验
实验方法原理胃癌为我国高发癌症之一,培养正常人胃上皮细胞对研究胃癌癌变机理有很大应用价值。近年来培养人的肾脏上皮、气管上皮、前列腺上皮等都有报道,但培养人胃上皮细胞少见成功。近年我研究室通过培养90例正常胃上皮细胞初代培养获得成功,并建成转化细胞系(Ges-1)。培养人正常胃上皮细胞获得成功主要在于
正常晶状体上皮细胞原代培养
实验材料:1. 材料来源:人眼、兔眼或者猪眼等;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 器械:无齿显微小镊子2把、培养板和培养皿若干;4. 培养液:为含15%胎牛血清的DMEM培养液;实验方法:1. 取材1)摘取动物或人的供体
原代肺泡上皮细胞的体外分离培养
1、完全无血液残留肺脏组织:2、消化肺组织:常用细胞消化酶:胰蛋白酶、弹性蛋白酶、胶原酶。经支气管将酶灌注到完整的肺中消化,或把肺组织剪碎放入消化液中消化。前者比后者更有效。3、分离纯化细胞:原代肺泡上皮细胞的分离纯化主要方法:(1)密度梯度离心法:密度梯度离心分离细胞的原理是不同细胞的沉降系数不同
正常视网膜色素上皮细胞原代培养
实验材料:1. 材料来源:人眼、兔眼或者猪眼等;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 特殊取材器械:眼球托与7-0尼龙线。以灭菌的白色橡胶反口胶塞作为眼球托;4. 消毒液:200IU/ml的庆大
原代细胞培养方法有哪些
你主要要原代培养那种细胞,不同的细胞方法肯定不同。如一般悬浮细胞,如血液细胞,就分离后,直接培养。培养组织中的细胞,就需要消化过后,进行培养。也有用组织块培养的
原代细胞培养之——培养技术
原代细胞的培养也叫初代培养 是从供体取得组织细胞在体外进行的首次培养,是建立细胞系的第一步,是一项基本技术。原代细胞因刚从组织中分离开,生物学特性未发生很大变化,仍保留原来的遗传特性,也最接近和反映体内生长特性,适宜用于药物敏感性试验、细胞分化等实验研究。 原代细胞往往有多种细胞组成,比较混杂,即使
原代细胞培养之——取材技术
细胞的来源多样,培养方法也各不相同,凡是来源于胚胎、组织器官及外周血,经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。原代细胞经分散接种之手段称为传代。凡能经传代方式进行再次培养的细胞称为传代细胞。若能稳定生长传至10~20代以上的细胞可确立为细胞系。若有条件能开展单细胞克隆、纯化,经大量扩增
原代细胞培养优点与用途?
一、优点 (1) 细胞刚离开机体,生物学性状与原体内细胞比较接近,相比之下,细胞系的一个缺点是它们往往与原始的组织有不一样的遗传和表型,而原代细胞保持了细胞在体内的许多重要标志和功能。 (2) 细胞的初代培养也是建立各种细胞株(系)的必经阶段。 二、原代细胞培养的临床应用: (1) 细胞
基本方案2-转染原代气管上皮细胞
试剂、试剂盒聚凝胺HamF-12培养基仪器、耗材原代气管上皮细胞培养皿针筒过滤器MWCO 分析膜实验步骤展
兔食管上皮细胞培养步骤
原代细胞实验材料: 1. 大兔的正常食管组织 2. 6孔培养板:用多聚赖氨酸4℃包被过夜 3. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素,pH7.4 4. 手术刀、解剖剪、解剖镊、
细胞生物基本方法:上皮细胞培养
上皮细胞培养1)表皮细胞培养1.取材:取外科植皮或手术残余皮肤小块,以角化层薄者为佳,早产流产儿皮肤更好,切成0.5~1平方厘米小块。2.EDTA处理:先置入0.02%EDTA中室温置5分钟。3.冷消化:换入0.25%胰蛋白酶中,置4℃过夜。4.分离:取出皮肤,用血管钳或镊子把表皮与真皮层分开。5.
方案-23.2-角膜上皮细胞培养实验
实验方法原理 将角膜组织置于胶原蛋白上,使其附着。然后,在涂有纤连蛋白和胶原蛋白的培养皿扩增培养。 试剂、试剂盒 D-PBSA