基本方案1尾静脉注射传递重组腺病毒到小鼠肝脏
实验材料成年小鼠试剂、试剂盒乙醇重组腺病毒悬液仪器、耗材带铁丝盖的鼠笼加热灯小鼠限制器棉纱店注射器实验步骤1.一个鼠笼装 6 只小鼠,加热灯置铁丝盖上方 6~10in(15~25 cm) 给小鼠取暖。观察小鼠,约 5 min 后,它们会在角落里缩做一团,准备注射。不要在角落的位置照射小鼠。2.取一只小鼠到限制器中,向其尾部喷 70% 乙醇,多余的乙醇用棉花垫拭干。3.取一支 Iml 注射器(27 G 针头),吸取至少0.2 ml 腺病毒悬液,小心去除针筒中的空气。4.抓住尾巴的一端,使其伸展开并略微弯向一侧暴露静脉。以较小的角度插人针头 (因为尾静脉相对接近表皮),注射 0.1 ml 稀释的腺病毒悬液。静脉会瞬时的膨胀变透亮。如果没有产生胀大的包,停止注射,此时病毒被注射到尾部组织中而不是静脉中。5.抽出针头,迅速用手指压住出血点,直到出血停止。将小鼠放回原来的笼子。展开......阅读全文
基本方案1-cDNA-合成与印迹
实验材料母板试剂、试剂盒细菌细胞中的标记LB 培养基氨苄青霉素乙醇Super 肉汤培养基甘油96孔碱裂液T low E 缓冲液10 X PCR 缓冲液20 X SSC琥拍酸酐仪器、耗材96深孔板和V 形塑料细胞培养皿水平微量培养板离心96孔多位点复制针1 加仑储存袋多微孔的带层带孔的振荡器用于深孔板
基本方案1-分离人气管表皮细胞
实验材料人肺试剂、试剂盒FBSHamF-12 培养基膜酶 EDTA胰酶抑制缓冲液仪器、耗材解剖器具组织培养皿离心管平台振动器桌面离心机镇铬合金或铜金属丝网冷冻管实验步骤展开
基本方案1-脆性-X-重复片段的-PCR-扩增
试剂、试剂盒10 X PCR 扩增缓冲液dNTP 混合物DMSO (Sigma)Taq 酶pH7. 5 TE 缓冲液0.67 X 和 2. 8X TBE 缓冲液载样液2 X SSC快速轻便杂交试剂仪器、耗材快速轻便基因组作图探针试剂盒循环热反应仪水浴锅垂直凝胶电泳设备无粉手套正电荷尼龙膜电转染设备真
基本方案1-从淋巴细胞中扩增-RNA
实验材料用 EB 病毒侵袭诱导转化的B细胞非转化淋巴细胞试剂、试剂盒PBSDEPC4dNTP 混合物10 X PCR 扩增缓冲液逆转录酶Taq DNA 聚合酶矿物油筛琼脂糖DNA 分子大小标准参照物仪器、耗材聚丙烯微量离心管循环变温加热器水浴锅实验步骤展
酵母实验操作方案(1)
一.质粒酶切及线性化1)用维特洁日常型小量DNA纯化试剂盒抽提9KSF2,可得到较纯的质粒10μg/3ml菌液,终体积80ul。2)线性化质粒使用80μl酶切体系9KSF2质粒 70μl内切酶(SacI, SalI, BglⅡ) 2μl10 x buffer 8μl3)酶切3-16小时,一般3小时即
基本方案1-应用直接标记-DNA-比较基因组杂交
实验方法原理实验材料荧光素标记的待测探针 DNA德克萨斯红标记的参照 DNA试剂、试剂盒乙酸钠乙醇主要的杂交溶液正常人染色体铺片变性液蛋白酶 K 溶液杂交片洗液2 X SSCPN 缓冲液DAPI 的抗淬灭溶液仪器、耗材玻璃刀水浴箱玻片加热器橡皮胶带湿盒实验步骤展开
基本方案1-线粒体-DNA-的筛查用-Southern-blot-研究基因重排
实验材料骨骼或白细胞的基因组 DNA试剂、试剂盒10 X restriction 缓冲液BamHI 和 EcoRV 限制性内切核酸酶NaCl 溶液乙醇6 X 胶聚蔗糖 oading 缓冲液琼脂糖胶DNA 分子质量标记1 X TBE 缓冲液乙碘氯苯丁酯溶液杂交液2 X SSC(现配)精液 DNA仪器、
基本方案1-在成年小鼠脑内植入遗传修饰过的细胞
实验材料遗传修饰细胞的培养成年宿主小鼠聚烯吡酮磺溶液试剂、试剂盒麻醉剂仪器、耗材小鼠大脑图片集耳打孔器带有电极操作的脑定位支架以及汉密尔顿注射夹外科用具bulldog 磁夹海绵中号镊子伤口夹26G针汉密尔顿注射器实验步骤1.为移植开始培养基因修正的细胞,收获 80%~90% 的汇合度的细胞。手术时,
基本方案1-尾静脉注射传递重组腺病毒到小鼠肝脏
实验材料成年小鼠试剂、试剂盒乙醇重组腺病毒悬液仪器、耗材带铁丝盖的鼠笼加热灯小鼠限制器棉纱店注射器实验步骤1.一个鼠笼装 6 只小鼠,加热灯置铁丝盖上方 6~10in(15~25 cm) 给小鼠取暖。观察小鼠,约 5 min 后,它们会在角落里缩做一团,准备注射。不要在角落的位置照射小鼠。2.取一只
基本方案1-用-DNA-印迹杂交检测克隆抗原受体基因重排
实验材料DNA 样品试剂、试剂盒适当的限制性内切核酸酶正常和重排控制 DNA6 X gel 加样缓冲液3 X 和 2 X SSC预杂交液探针DNA杂交液高盐洗液低盐洗液仪器、耗材洁净的海绵跑胶缓冲液的循环泵Whatman 3MM 过滤纸UV 交联剂平台摇床培养器G50葡聚糖凝胶柱水浴离心导管有合适的
蛋白质组实验全套流程方案1
蛋白质组实验流程双向电泳的样品的制备样品制备原则样品制备是双向电泳中最关键的一步,将直接影响2-DE结果好坏。目前并没有一个通用的样品制备方法,尽管处理方法多种多样,但都遵循几个基本的原则:1)尽可能的提高样品蛋白的溶解度,抽提最大量的总蛋白,减少蛋白质的损失;2)减少对蛋白质的人为修饰;3)破坏
膜蛋白研究的整体解决方案1
提起膜蛋白,浮现在广大从事蛋白研究的科研工作者脑海中的是两点:1.膜蛋白功能的重要性。2.膜蛋白研究的困难性。众所周知,膜蛋白在细胞间接触、表面识别、信号转导、酶活性和运输方面都扮演着重要的角色。由于它们功能多样,也就成为理想的药物靶点。然而,膜蛋白的生化和结构研究一直都很缓慢。Protein Da
详述熔点仪基本故障维修方案
熔点仪基本故障维修方法:1.插入毛细管后电流表不归零该设备插入毛细管后电流表应为零,因为毛细管中的药品挡住了光路。药品熔解后,光透过玻璃毛细管到达光电池,光电池感光输出电流实现终熔显示。同时光电池输出电流使电流表从零打到满度。如一开始插入毛细管时仪器的电流表就不归零,则该设备无法使用。现将可能造成插
免疫沉淀实验——基本方案
经典的免疫沉淀是可溶性抗原与其抗体产生可见沉淀反应的血清学试验。后来发展为抗原抗体结合后,用固相化的蛋白A或蛋白G小珠等来吸附分离抗原抗体复合体,达到检测微量抗原或抗体的目的。实验材料蛋白质试剂、试剂盒裂解缓冲液稀释缓冲液SDSTrisTSA仪器、耗材转子离心机实验步骤1. 表面标记或生物合成标记
肽质量检索实验_基本方案
实验材料蛋白样品仪器、耗材质谱仪实验步骤鉴定数据库中已有序列的蛋白质的算法基于以下一些理念:(1) 肽段是由切点专一的试剂水解蛋白质产生的,通常用已知切点专一的蛋白酶。(2) 这些肽段的质量由 MALDI-MS 或 ESI-MS 精确测定。(3) 计符蛋白序列数据库中的每一序列被实验中所用水解试剂水
MALDlMS实验_基本方案
实验方法原理线性 MALDI-MS:MALDI-MS质谱仪恐怕是概念上和设计上都最简单的质谱仪,分子(分析物)经 MALDI 方式离子化,离子的质荷比 (m/z)由飞行时间质分析器检测(见图 5,1) 。 测量的质量精确度与m/z有关, 25ku 以下可达到约 0.01%-0.05% 的精确度,到
定点诱变实验——基本方案
定点突变是指通过聚合酶链式反应(PCR)等方法向目的DNA片段(可以是基因组,也可以是质粒)中引入所需变化(通常是表征有利方向的变化),包括碱基的添加、删除、点突变等。定点突变能迅速、高效的提高DNA所表达的目的蛋白的性状及表征,是基因研究工作中一种非常有用的手段。实验材料DNA试剂、试剂盒TE寡核
动物实验基本技术1
第一节 实验动物的抓取和固定在进行实验时,为了不损伤动物的健康,不影响观察指标,并防止被动物咬伤,首先要限制动物的活动,使动物处于安静状态,工作人员必须掌握合理的抓取固定方法。抓取动物前,必须对各种动物的一般习性有所了解。操作时要小心仔细、大胆敏捷、熟练准确、不能粗暴,不能恐吓动物,同时,要爱惜动物
动物实验基本技术1
第一节 实验动物的抓取和固定在进行实验时,为了不损伤动物的健康,不影响观察指标,并防止被动物咬伤,首先要限制动物的活动,使动物处于安静状态,工作人员必须掌握合理的抓取固定方法。抓取动物前,必须对各种动物的一般习性有所了解。操作时要小心仔细、大胆敏捷、熟练准确、不能粗暴,不能恐吓动物,同时,要爱惜动物
卫生部公布新甲型H1N1流感诊疗方案
卫生部公布新的甲型H1N1流感诊疗方案 原诊疗方案废止 新华网北京5月9日电 中国卫生部9日公布《甲型H1N1流感诊疗方案(2009年试行版第一版)》,今年4月29日印发的《人感染猪流感诊疗方案(2009版)》同时废止。 卫生部新闻发言人毛群安此前表示,随着对病毒、疫情的情况分析、研
方案1-蛋白质的过甲酸氧化实验
实验材料冻干的纯化蛋白样品试剂、试剂盒甲酸氢溴酸过氧化氢NaOH 固体仪器、耗材旋转蒸发器小试管实验步骤1.加入 100ul 过氧化氢到 900ul 甲酸中,在室温下放置让,将反应产生过甲酸 (HCOOOH)。2.在冰上冷冻过甲酸至 0°C。3.在预冷的小试管中,将蛋白质溶解于 50ul 过甲酸中(
基本方案3-杂交和数据提取
实验材料玻璃芯片试剂、试剂盒酵母 tRNA20 X SSC50 X Denhardt 溶液10% SDS0.06X SSC 洗脱缓冲液仪器、耗材薄壁 PCR 管热循环仪芯片杂交板水浴锅临床离心机芯片扫描仪图像分析软件实验步骤展
荧光原位杂交实验——基本方案
实验材料样品试剂、试剂盒DNA探针非同位素甲酰胺杂交混合液甲酰胺Triton X-100SSC仪器、耗材相差显微镜盖玻片水浴锅加湿盒滤光片荧光显微镜实验步骤1a. 石蜡切片或细胞的杂交:按石蜡切片或细胞的原位杂交实验的基本方案步骤1~7,对载玻片进行脱蜡、水化、 封闭和脱水处理。将标本晾干(或在干
YAC克隆的分析实验——基本方案
YAC带有天然染色体所有的功能元件,包括一个着丝粒,一个DNA复制起点,两个端粒。YAC能够容纳长达几百kb的外源DNA,这是质粒和黏粒办不到的。大片段的插入更有可能包含完整的基因,在染色体步移中每次允许更大的步移距离,同时能够减少完整基因组文库所需的克隆数目。实验材料酵母菌试剂、试剂盒AHCYPD
离子交换层析实验——基本方案
离子交换层析(Ion Exchange Chromatography简称为IEC)是以离子交换剂为固定相,依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。实验材料蛋白质试剂、试剂盒离子交换缓冲液仪器、耗材离子交换层析柱梯度混合器电导表实验步骤1.
关于白介素1的基本介绍
白细胞介素是由多种细胞产生并作用于多种细胞的一类细胞因子。由于最初是由白细胞产生又在白细胞间发挥作用,所以由此得名,现仍一直沿用。最初是指由白细胞产生又在白细胞间起调节作用的细胞因子。是指一类分子结构和生物学功能已基本明确,具有重要调节作用而统一命名的细胞因子,它和血细胞生长因子同属细胞因子。两
Tankyrase-1-(PARP5A)检测试剂盒—Tankyrase-1全套研究方案
端粒是真核细胞染色体末端的一个特殊结构,由一段具有特定重复序列的DNA和端粒结合蛋白组成,是维持染色体结构稳定的重要因素。当细胞发生癌变时,由于端粒酶的重新激活,这种端粒DNA随分裂活动发生渐进性缩短的趋势受到阻遏,使正常细胞转化成具有无限分裂能力的永生化恶性细胞。端锚聚合酶1((TRF1-inte
博纳艾杰尔黄曲霉毒素M1B1检测方案
天津博纳艾杰尔科技有限公司,基于自身技术优势,及对乳品、饲料行业检测多年来的认知,整合出一套黄曲霉毒素检测的综合解决方案,可以提供黄曲霉检测几乎全部所需关键产品。 目前,关于乳品中黄曲霉毒素、食品中黄曲霉毒素的检测,有很多标准,GB、SN,归纳起来,多数采用免疫亲和柱净化-HPLC法检测,
甲型H1N1流感起居饮食等预防方案发布
中广网北京5月7日消息 为指导甲型H1N1流感的中医药预防工作,充分发挥中医药的特色与优势,卫生部、国家中医药管理局组织专家,在总结古今文献的基础上,根据今年甲型H1N1流感疫情的特点制定了《甲型H1N1流感中医药预防方案(2009版)》。 甲型H1N1流感中医药预防方案(2009版)
酵母遗传学方法实验指南——技术和方案1
技术和方案1 酵母的高效转化实验步骤展开