蛋白质组实验全套流程方案1
蛋白质组实验流程双向电泳的样品的制备样品制备原则样品制备是双向电泳中最关键的一步,将直接影响2-DE结果好坏。目前并没有一个通用的样品制备方法,尽管处理方法多种多样,但都遵循几个基本的原则:1)尽可能的提高样品蛋白的溶解度,抽提最大量的总蛋白,减少蛋白质的损失;2)减少对蛋白质的人为修饰;3)破坏蛋白质与其他生物大分子的相互作用,并使蛋白质处于完全变性状态。根据这一原则,样品制备需要四种主要的试剂:离液剂(chaotropes),主要包括尿素(Urea)和硫脲(thiourea);表面活性剂(sufactants),也称去垢剂,如CHAPS与Zwittergent系列等双性离子去垢剂;还原剂(reducing agents),最常用的是二硫苏糖醇(DTT)和磷酸三丁酯(TBP)等。当然,也可以选择性的加入Tris-base,蛋白酶抑制剂以及核酸酶。样品的来源不同,其裂解的缓冲液也各不相同。通过不同试剂的合理组合,以达......阅读全文
蛋白质组实验全套流程方案1
蛋白质组实验流程双向电泳的样品的制备样品制备原则样品制备是双向电泳中最关键的一步,将直接影响2-DE结果好坏。目前并没有一个通用的样品制备方法,尽管处理方法多种多样,但都遵循几个基本的原则:1)尽可能的提高样品蛋白的溶解度,抽提最大量的总蛋白,减少蛋白质的损失;2)减少对蛋白质的人为修饰;3)破坏
蛋白质组实验全套流程方案2
聚丙烯酰胺凝胶的配制表1 配制Tris-甘氨酸SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胶所用溶液溶液成分不同体积(ml)凝胶液中各成分所需体积(ml)5101520253040506% 水2.65.37.910.613.215.921.226.5 30%丙烯酰胺溶液123456810 1.
北京胃癌蛋白质组全套检测时间缩短至1天
胃癌是我国高发的恶性肿瘤之一,晚期胃癌患者五年生存率不足5%。临床上治疗胃癌的一线用药多为广谱抗癌药,造成化疗毒副作用大、疗效不明显。2013年,北京市科委在“生命科学领域前沿技术培育”专项中设立“基于蛋白质组学的胃癌个体化治疗技术研究”课题,日前取得了重要进展,胃癌蛋白质组全套检测时间缩短至1
从实验室需求到产业落地构建蛋白质组学全流程解决方案
——专访易算生物创始人和总经理沈诚频在蛋白质组学研究中,“技术碎片化”曾长期困扰科研团队。前处理依赖手工导致重复性差,进口设备与耗材价格昂贵,数据分析工具操作门槛高。而易算生物(Omicsolution)以“全流程适配”为核心,从试剂、设备到软件构建完整解决方案,成为国内蛋白质组学领域的重要支撑力量
cDNA文库组标准流程1
一.Total RNA的提取 (一) 试剂配制 准备工作: 1.研钵、5ml/10ml/ 25ml移液管、100ml/250ml量筒、250ml /100ml容量瓶、药匙、 试剂瓶等玻璃制品均用锡纸包裹口部,置于烤箱内,180℃,烤6小时。 2.50ml/1.5ml离心管、枪头等塑料
年末机床全套保养方案
1.切断电源 保养时,必须切断电源,然后进行工作,以确保操作安全。 2.清理工作位置 清理工作区域,确保清洁过程中有整洁和足够的空间 3.拆下并清洗机床各罩壳 保持内外清洁,无锈蚀,无油污。【金属加工微信,内容不错,值得关注】 4.刀架和滑板部分的保养
方案1-蛋白质的过甲酸氧化实验
实验材料冻干的纯化蛋白样品试剂、试剂盒甲酸氢溴酸过氧化氢NaOH 固体仪器、耗材旋转蒸发器小试管实验步骤1.加入 100ul 过氧化氢到 900ul 甲酸中,在室温下放置让,将反应产生过甲酸 (HCOOOH)。2.在冰上冷冻过甲酸至 0°C。3.在预冷的小试管中,将蛋白质溶解于 50ul 过甲酸中(
酶联免疫吸附实验(ELISA)-全套解决方案
基本原理 1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量测定的文章,使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是:①使抗原或抗
全套抗体标记工具全套抗体和蛋白质标记试剂盒的使用1
用特定标签标记抗体已成为生物科学和医学研究中的重要且常规程序,标签的范围从视觉标记(例如荧光染料)到半抗原分子(例如生物素),标签的作用有增强免疫复合物和蛋白质-蛋白质相互作用的可见性,以及用于蛋白质的分离和纯化。 在确定选择哪种标签类型时,应侧重于抗体的下游应用。荧光标
代谢组学全流程解决方案
赛默飞基于其超高分辨的静电场轨道阱(Orbitrap)质谱平台结合其功能强大的软件平台,提供代谢组学全流程解决方案。该方案不仅覆盖从极性代谢物到非极性代谢物的全面检测、峰提取与定量、统计学分析与可视化作图、代谢产物的全面鉴定、代谢通路分析等全流程的要求,而且还整合了从非靶标生物标记物发现到靶标生物标
蛋白质组学鉴定技术流程
蛋白质组(Proteome)的概念,蕞早由澳大利亚Macquarie大学的Wilkins和Williams于1994年首先提出的,是指一个基因组(Genome),或一个细胞、组织表达的所有蛋白质。蛋白质组学(Proteomics)以细胞、组织或生物体全体蛋白质为研究对象,通过高通量的色谱质谱联用技术
iTRAQ蛋白质组学研究原理、优势及实验流程(一)
大家好,我是黄博,吉凯一小兵,蛋白质组学实验狗。今天的故事是一个作文从没及格过的闷骚理科男(我一直是这么定位自己的)是如何被陈博内个大尾巴狼生生逼来写文章的故事,真的是有血、有泪、有shi!情节需要,中间可能会穿插一些技术方面的内容,请各位自动忽略。那是一个月黑风高的晚上,本人和大尾巴狼(我实在不想
iTRAQ蛋白质组学研究原理、优势及实验流程介绍
大家好,我是黄博,吉凯一小兵,蛋白质组学实验狗。今天的故事是一个作文从没及格过的闷骚理科男(我一直是这么定位自己的)是如何被陈博内个大尾巴狼生生逼来写文章的故事,真的是有血、有泪、有shi!情节需要,中间可能会穿插一些技术方面的内容,请各位自动忽略。 那是一个月黑风高的晚上,本人和大尾巴狼
iTRAQ蛋白质组学研究原理、优势及实验流程(二)
“那iTRAQ的原理是什么,有哪些优势?”“iTRAQ(Isobaric Tags for Relative and Absolute Quantitation)技术由美国AB SCIEX公司研发,最早于2004年美国质谱年会上被提出,是一种基于体外等重同位素标记的相对定量技术。该技术利用同
蛋白质组与蛋白质组学简介1
一、蛋白质组概念:一个细胞、一个组织或一个机体全部基因所表达的全部蛋白质。 二、蛋白质组学研究范畴 1.蛋白质和蛋白质间 2.蛋白质和核酸之间 3.蛋白质及其组成质点的分离、分析、鉴定 4.蛋白质结构分析 5.生理、病理或不同发育状态下蛋白质组表
Tankyrase-1-(PARP5A)检测试剂盒—Tankyrase-1全套研究方案
端粒是真核细胞染色体末端的一个特殊结构,由一段具有特定重复序列的DNA和端粒结合蛋白组成,是维持染色体结构稳定的重要因素。当细胞发生癌变时,由于端粒酶的重新激活,这种端粒DNA随分裂活动发生渐进性缩短的趋势受到阻遏,使正常细胞转化成具有无限分裂能力的永生化恶性细胞。端锚聚合酶1((TRF1-inte
Thermo-Fisher收购蛋白质组学工作流程解决方案供应商Proxeon
服务科学、世界领先的赛默飞世尔科技,今天宣布收购了Proxeon A/S—一家总部位于丹麦欧登塞的创新蛋型白质组学分析产品的供应商。该公司被公认可提供简化蛋白质组学工作流程,包括纳升液相色谱系统、色谱柱、离子源和生物信息学软件等,以满足复杂的蛋白质组学应用中对耐用型高灵敏液相色谱/
酵母实验操作方案(1)
一.质粒酶切及线性化1)用维特洁日常型小量DNA纯化试剂盒抽提9KSF2,可得到较纯的质粒10μg/3ml菌液,终体积80ul。2)线性化质粒使用80μl酶切体系9KSF2质粒 70μl内切酶(SacI, SalI, BglⅡ) 2μl10 x buffer 8μl3)酶切3-16小时,一般3小时即
植物蛋白质组学和糖基化实验1
实验材料链霉亲和素-过氧化物酶牛胰核糖核酸酶 B甲基比喃甘露糖苷卵清白蛋白试剂、试剂盒DIG 糖链检测试剂TTBS 缓冲液Lectin- biotinTBS 缓冲液实验步骤3.1 这个蛋白质是糖蛋白吗只有一种方法能全面的回答“这个蛋白质是糖蛋白吗?”这个问题。这需要使用能检测并定量印记上糖蛋白的总糖
蛋白质组样品制备程序1
一、样品制备试剂的准备二、细菌细胞样品的裂解处理步骤三、人培养细胞样品的裂解处理步骤四、膜蛋白裂解方法步骤一、样品制备试剂的准备1、裂解缓冲液储备液的准备下述本样品制备方法已经过优化, 并被证明配合使用PF-2D 试剂盒可获得最佳的结果。您若选择其他的样品处理和细胞裂解方法,请务必避免使用离子型的表
免疫组化双染实验流程
一、脱蜡和水化方法同SP法。二、第一抗体的染色1、将切片浸在3%H2O2甲醇溶液(新鲜配制)中10 min,PBS冲洗3 min×3次;2、加100 ul(2滴)血清封闭溶液(试剂1)到切片上,室温孵育10 min,倒掉(不能冲洗);3、加入一抗(按照说明书推荐浓度和孵育条件);4、使用含有0.05
百灵威海面溢油检测全套方案
随着海洋经济的不断发展,海洋溢油事件也频频发生。海洋溢油具有突发性、偶然性和瞬时性,且危害极大,因此被称为海洋生态环境的超级杀手。我国为应对溢油事故频发,建立了海面溢油鉴别系统规范,HY 043-1997。 该标准首先进行可疑溢油源样品的筛选,采用荧光光谱法或红外光谱法作为可选方法进行初步筛选
方案10-定量蛋白质组学的体内蛋白质同位素标记实验
实验材料酿酒酵母试剂、试剂盒丙酮乙腈NH4HCO3细胞生长培养基干冰冰水2-巯基乙醇甲醇铁氰化钾蛋白提取试剂组合蛋白酶抑制剂硫代硫酸钠仪器、耗材离心蒸发仪离心管血细胞计数器孵育器MALDI- TOF 质谱仪和 LC-MS MS 系统超声波破碎仪分光光度计实验步骤一、培养细胞二、提取蛋白的细胞准备三、
1000平米组培室全套组培仪器设备
1000平米组培室全套组培仪器设备 文章链接:仪器设备网 https://www.instrumentsinfo.com/technology/show-1265.html
Southern-Blot-实验流程(包括原理/细节)1
一、DNA 的提取人和哺乳动物细胞基因组DNA的分离通常是在有EDTA、Sarkosye等一类去污剂存在下,用蛋白酶K消化细胞,随后用酚、氯仿抽提,经RNase 处理和纯化来提取DNA。(1)取单层细胞,经无钙、镁PBS洗一次,用0.25%胰蛋白酶消化,细胞悬液经PBS洗2次,弃上清,取细胞沉淀。(
蛋白质组学研究的完整解决方案
人体内真正发挥作用的是蛋白质,蛋白质扮演着构筑生命大厦的“砖块”角色,随着破译生命密码的人类基因组计划进入尾声,一个以蛋白质和药物基因学为研究重点的后基因组时代已经拉开序幕,蛋白质将是今后的重点研究方向之一。然而,蛋白质的分离和鉴定非常费时,目前测定蛋白质的技术远远落后于破译基因组的工具,最好的实验
全套抗体标记工具全套抗体和蛋白质标记试剂盒的使用3
表2. ReadiLink™xtra快速抗体标记试剂盒 名称 Ex(nm) Em(nm) 规格 货号 ReadiLink™xtra Rapid iFluor™350抗体标记试剂盒 344 4
全套抗体标记工具全套抗体和蛋白质标记试剂盒的使用2
方便的设计以取得最大的效果: ReadiLink™快速抗体标记试剂盒利用胺反应性标记来制备共价标记的结合物。这些反应性标记选择性地靶向并结合至目标抗体上的伯胺(例如赖氨酸残基)。要标记您的抗体,只需将您的抗体溶液(浓度约1 mg / mL)与ReadiLink™
蛋白质组学实验技术大全
每一个领域的发展都是基于技术的进步和革新,蛋白质组学亦然。蛋白质的可变性和多样性等特殊性质导致了蛋白质研究技术远远比核酸技术要复杂和困难得多,但正是这些特性参与和影响着整个生命过程。在开始实验之前,先看看这篇技术简介吧。一 蛋白质与DNA相互作用在许多的细胞生命活动中,例如DNA复制、mRNA转录与
石蜡切片免疫组化染色实验操作流程
1.石蜡切片脱蜡至水:(石蜡切片染色前应置 60℃ 1 小时) 。① 二甲苯 、II,各 10 分钟。② 梯度酒精:100%,2 分钟 95%,2 分钟 80%,2 分钟 70% 2 分钟。③ 蒸馏水洗:5 分钟,2 次(置于摇床)。2.过氧化氢封闭内源性过氧化物酶:3%H2 O2 ,室温 10 分