方案1蛋白质的过甲酸氧化实验
实验材料冻干的纯化蛋白样品试剂、试剂盒甲酸氢溴酸过氧化氢NaOH 固体仪器、耗材旋转蒸发器小试管实验步骤1.加入 100ul 过氧化氢到 900ul 甲酸中，在室温下放置让，将反应产生过甲酸 (HCOOOH)。2.在冰上冷冻过甲酸至 0°C。3.在预冷的小试管中，将蛋白质溶解于 50ul 过甲酸中（500ug/ml)。4.盖上帽子，0°C 孵育混合物 4 h。如果蛋白质不溶，把反应延长到 20 h。5.加入 30ul 氢溴酸，去除多余的过甲酸。要特别小心，可能会释放出来少量的溴。6.用旋转蒸发器或离心冷冻干燥机彻底干燥样品。在浓缩器中加入少量的 NaOH 固体，以去掉多余的溴和甲酸。蒸发干燥约需要 10 min。由于许多氨基酸被修饰，推荐用过甲酸氧化的蛋白质用于 S—S/S—H(半胱磺酸）和甲硫氨酸基团（甲硫氨酸砜）的定量分析，而不是序列分析。展开......阅读全文
方案1－蛋白质的过甲酸氧化实验
实验材料冻干的纯化蛋白样品试剂、试剂盒甲酸氢溴酸过氧化氢NaOH 固体仪器、耗材旋转蒸发器小试管实验步骤1.加入 100ul 过氧化氢到 900ul 甲酸中，在室温下放置让，将反应产生过甲酸 (HCOOOH)。2.在冰上冷冻过甲酸至 0°C。3.在预冷的小试管中，将蛋白质溶解于 50ul 过甲酸中（
蛋白质的过甲酸氧化实验
蛋白质的过甲酸氧化实验 试剂、试剂盒 过氧化氢 甲酸
蛋白质的过甲酸氧化实验
试剂、试剂盒 过氧化氢甲酸仪器、耗材 冰 水浴锅实验步骤 材料与设备过氧化氢（新鲜）（30%)甲酸（可得的最高纯度级)冰/水浴锅操作程序此操作程序系根据 Hirs(1967) 的方法修改而成。1) 制备过甲酸试剂，将过氧化氢与甲酸以 1:19(v/v) 的比例（比如，0.5 ml 的过氧化氢和 9.
蛋白质的过甲酸氧化实验
用过甲酸氧化蛋白质是使蛋白质部分变性和稳定含硫氨基酸的一种简易而有效的方法。过甲酸氧化能定量地将半胱氨酸残基转化为胱氨酸，将甲硫氨酸残基转化为甲硫氨酸砜。这些残基对酸水解是稳定的。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。试剂、试剂盒过氧化氢甲酸仪器、耗材冰 水浴锅实验步骤材料与设备过氧化
蛋白质组实验全套流程方案1
蛋白质组实验流程双向电泳的样品的制备样品制备原则样品制备是双向电泳中最关键的一步，将直接影响2-DE结果好坏。目前并没有一个通用的样品制备方法，尽管处理方法多种多样，但都遵循几个基本的原则：1）尽可能的提高样品蛋白的溶解度，抽提最大量的总蛋白，减少蛋白质的损失；2）减少对蛋白质的人为修饰；3）破坏
酵母实验操作方案（1)
一．质粒酶切及线性化1）用维特洁日常型小量DNA纯化试剂盒抽提9KSF2，可得到较纯的质粒10μg/3ml菌液，终体积80ul。2）线性化质粒使用80μl酶切体系9KSF2质粒 70μl内切酶（SacI， SalI， BglⅡ） 2μl10 x buffer 8μl3）酶切3－16小时，一般3小时即
电泳分离的蛋白质肽谱和序列分析实验
方案1 蛋白质的过甲酸氧化实验 方案2 蛋白质还原和S-羧甲基化：大规模方法 方案3 蛋白质还原和S-羧甲基化：微量方法 方案4 用Ellman 试剂测定自由巯基和二硫键实验 方案5 蛋白质的胰酶消化实验 方案6 用溴化氰切割 M
过碘酸氧化的基本概念
中文名称过碘酸氧化英文名称periodate oxidation定 义利用过碘酸选择性地裂解具邻位羟基的C-C键的氧化过程。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），糖类（二级学科）
二喹啉甲酸（BCA）检测法测定蛋白质浓度实验
二喹啉甲酸（BCA）检测法是近来新研制的一种改进的 Lowery 测定法，反应简单而且几乎没有干扰物质的影响。实验方法原理在碱性环境下蛋白质分子中的肽键结构能与 Cu2＋络合生成络合物，同时将 Cu2＋还原成 Cu＋。而 BCA 试剂可敏感特异地与结合，形成稳定的有颜色的复合物。 在 562nm 处
二喹啉甲酸（BCA）检测法测定蛋白质浓度实验
二奎琳甲酸检测法 实验方法原理 在碱性环境下蛋白质分子中的肽键结构能与 Cu2＋络合生成络合物，同时将 Cu2＋还原成 Cu＋。而 BCA 试剂可敏感特异地与
二喹啉甲酸（BCA）检测法测定蛋白质浓度实验
实验方法原理 在碱性环境下蛋白质分子中的肽键结构能与 Cu2＋络合生成络合物，同时将 Cu2＋还原成 Cu＋。而 BCA 试剂可敏感特异地与结合，形成稳定的有颜色的复合物。 在 562nm 处有高的光吸收值。颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，可根据吸收值的大小来计算蛋白质的含童。实验材料 待测蛋
方案5－蛋白质的胰酶消化实验
实验材料冻干的目标蛋白质试剂、试剂盒CaCl2NH4HCO3苯甲基磺酰氟（PMSF)胰酶贮存液Tween-20仪器、耗材聚丙烯试管水浴箱实验步骤1.冻干的蛋白质底物溶解在 1% 的碳酸氢铵中，控制使用尽量少的溶液体积，以达到较高的底物浓度。当蛋白质底物很微量（如小于 1mg) 时，加入 Tween-
蛋白质组实验全套流程方案2
聚丙烯酰胺凝胶的配制表1 配制Tris-甘氨酸SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胶所用溶液溶液成分不同体积（ml）凝胶液中各成分所需体积（ml）5101520253040506% 水2.65.37.910.613.215.921.226.5 30%丙烯酰胺溶液123456810 1.
蛋白质的微量测序分析实验1
验材料蛋白质试剂、试剂盒凝胶缓冲液谷胱甘肽疏基乙酸考马斯亮蓝仪器、耗材电泳仪微量注射器实验步骤1. 制备分离胶和积层胶溶液灌制变性微型凝胶。 2. 组装垂直凝胶电泳装置。 3. 将80 ml 4×凝胶缓冲液稀释至320 ml。将200 ml 1×凝胶缓冲 液倒入下层缓冲液槽。4. 剩余的1×
蛋白质提取分离纯化鉴定的实验方案
一.血清ǐ-球蛋白的初步提取1. 血细胞与血清分离：取人血液 1000ml,放置10min, 1000rpm离心20min .弃沉淀,留上清备用(沉淀为血细胞，上部为血清).2. 乳糜粒分离：4000rpm 10°C离心10分钟,采用密度梯度离心梯度液配置：离心管下部3/4容积加血浆，上部1/4容积
蛋白质提取分离纯化鉴定的实验方案
一.血清ǐ-球蛋白的初步提取1. 血细胞与血清分离：取人血液 1000ml,放置10min, 1000rpm离心20min .弃沉淀,留上清备用(沉淀为血细胞，上部为血清).2. 乳糜粒分离：4000rpm 10°C离心10分钟,采用密度梯度离心梯度液配置：离心管下部3/4容积加血浆，上部1/4容积
方案8－邻亚碘酰苯甲酸在色氨酸处切割实验
实验材料冻干的蛋白质试剂、试剂盒对甲酚冰醋酸盐酸胍邻亚碘酰苯甲酸仪器、耗材体积排阻层析柱浓缩器氮气实验步骤1.将邻亚碘酰苯甲酸 10 mg 溶解于 1.Oml 的 80% (体积分数）乙酸，瘠液中含有 4mol/L 盐酸胍和 20ul 对甲酚。2.混合物在室温下孵育 2 h。3.加入蛋白质，使终浓度
方案9－蛋白质的同位素亲和标签实验
实验材料透析或沉淀处理蛋白样品试剂、试剂盒DTTEDTAICAT 试剂三丁基膦Tris胰酶实验步骤第一阶段 ICAT 标记蛋白第二阶段 阳离子交换清洗 ICAT 样品第四阶段 ICAT 标记多肽的质谱分析展开
方案14－电印迹膜上的蛋白质消化实验
实验材料含有电泳分离的目标蛋白质的凝胶试剂、试剂盒乙酸胺黑（Amido Black)10B染料（0.1%)的水溶液 乙酸 甲醇消化缓冲液NaOH丽春红S染料PVP-40仪器、耗材电印记装置小离心管硝酸纤维膜或 PVDF 膜RP-HPLC 层析柱实验步骤一、电印迹和染蛋白1.将蛋白质电印迹到硝酸纤维膜
方案1－用－FLAG抗原表位标记蛋白质进行蛋白质免疫共沉淀
实验材料抗 FLAGM2 单克隆抗体293 T 细胞试剂、试剂盒抗 FLAGM2 琼脂糖亲和凝胶甘氨酸辣根过氧化物酶IEF缓冲液裂解缓冲液NaCl磷酸盐缓冲液聚乙烯亚胺RF10培养基RPMI 1640 培养基4 X SDS-PAGE 加样缓冲液叠氮化钠胰岛素仪器、耗材大型离心机配有检测 GFP 滤片
蛋白质的性质实验原理和操作步骤1
【目的和要求】1. 学习几种常用的鉴定蛋白质和氨基酸的方法及其原理。2. 了解蛋白质的两性解离性质。初步学会测定蛋白质等电点的方法。3. 加深对蛋白质胶体分子稳定因素的认识，了解蛋白质的沉淀反应、变性作用的原理及其相互关系。【实验原理】（一） 蛋白质及氨基酸的呈色反应蛋白质所含有的某些氨基酸具有特殊
重组蛋白质的大规模生产实验——基本方案
蛋白质（protein）是生命的物质基础，没有蛋白质就没有生命。因此，它是与生命及与各种形式的生命活动紧密联系在一起的物质。实验材料重组蛋白质仪器、耗材培养瓶过滤器实验步骤1. 在悬浮培养液中培养Sf9细胞，并使之适应无血清培养液。 2. 准备旋转培养瓶，用于按比例扩增Sf9细胞，将合适大小的两
方案11－胶内蛋白质的硝酸银染色实验
实验材料通过电泳分离的凝胶内蛋白质试剂、试剂盒乙酸显影液固定液甲醇硫酸银水溶液终止反应液仪器、耗材塑料皿摇床实验步骤1.将凝胶放在塑料皿中（用一次性的塑料皿或者彻底洗过的塑料皿），加入足量的固定液以覆盖凝胶。固定 20 min, 并轻轻摇动。2.弃掉固定液，加人足量的 50% 甲醇覆盖胶，轻轻摇动
方案10－胶内蛋白质的锌/咪唑负染色实验
实验材料通过电泳分离的凝胶内蛋白质试剂、试剂盒固定液咪唑硫酸锌仪器、耗材摇床实验步骤方法 1: 直接用咪唑、SDS 和锌负染色1.将胶浸放在固定液中 20 min，并轻轻摇动。2.弃掉固定液，用去离子水洗胶 2 次，轻轻摇动 15 min。3.将胶与含有0.1%SDS 的 0.2mol/L 咪唑共孵
研究实现高效甘油电氧化制甲酸
近日，中国科学院大连化学物理研究所研究员吴忠帅团队与研究员肖建平团队合作，设计开发出一种铜掺杂镍钴合金高活性催化剂，并构建出节能的硝酸还原合成氨耦合甘油氧化制甲酸系统，实现了高活性、高选择性的甘油电氧化制甲酸。相关成果发表在《德国应用化学》。 生物柴油被认为是传统化石燃料的可回收替代品之一。甘
研究实现高效甘油电氧化制甲酸
近日，中国科学院大连化学物理研究所研究员吴忠帅团队与研究员肖建平团队合作，设计开发出一种铜掺杂镍钴合金高活性催化剂，并构建出节能的硝酸还原合成氨耦合甘油氧化制甲酸系统，实现了高活性、高选择性的甘油电氧化制甲酸。相关成果发表在《德国应用化学》。生物柴油被认为是传统化石燃料的可回收替代品之一。甘油是生物
苯甲酸盐鉴别实验
(1) 取供试品的中性溶液，加三氯化铁试液，即生成赭色沉淀；加稀盐酸，变为白色沉淀。(2) 取供试品，置干燥试管中，加硫酸后，加热，不炭化，但析出苯甲酸，在试管内壁凝结成白色升华物。乳酸盐 取供试品溶液5ml(约相当于乳酸5mg),置试管中,加溴试液1ml与稀硫酸0.5ml，置水浴上加热，并用玻
电泳分离的蛋白质肽谱和序列分析实验
实验材料 冻干的纯化蛋白样品试剂、试剂盒 甲酸氢溴酸过氧化氢NaOH 固体仪器、耗材 旋转蒸发器小试管实验步骤 1.加入 100ul 过氧化氢到 900ul 甲酸中，在室温下放置让，将反应产生过甲酸 (HCOOOH)。2.在冰上冷冻过甲酸至 0°C。3.在预冷的小试管中，将蛋白质溶解于 50ul 过
方案1－蛋白质和多肽－MALDIMS－分析的一般方法
实验材料冷冻干燥样品试剂、试剂盒校准标准品基质溶液甲醇仪器、耗材MALDI 质谱仪MALDI 板实验步骤1.吸取 0.5ul 的基质溶液，加到 MALDI-MS 分析所用的金属样品板上的样品孔中（为了准确起见，请使用2ul 的移液器）。2.在基质干燥之前，迅速加入 0.5ul 的标准品或样品到基质中
方案12－胶内蛋白质的S吡啶乙基化实验
实验材料通过电泳分离的凝胶内蛋白质试剂、试剂盒β-巯基乙醇还原缓冲液仪器、耗材冷冻干燥离心机去离子水温箱冷冻干燥机小离心管移液管塑料皿实验步骤方法 1: 整块凝胶的还原和 S-吡啶乙基化1.保证整块凝胶的正确染色和脱色（见方案 9)。2.在 400~500 ml 水中清洗凝胶 3 次，约 1.5 h