高效液相色谱法测定有机化合物的含量实验
实验方法原理高效液相色谱仪液体作为流动相,并采用颗粒极细的高效固定相的主色谱分离技术,在基本理论方面与气相色谱没有显著不同,它们之间的重大差别在于作为流动相的液体与气体之间的性质差别。与气相色谱相比,高效液相色谱对样品的适用性强,不受分析对象挥发性和热稳定性的限制,可以弥补气相色谱法的不足。液相色谱根据固定向的性质可分为吸附色谱、键合相色谱、离子交换色谱和大小排阻色谱。其中反相键合相色谱应用最广,键合相色谱法是将类似于气相色谱中固定液的液体通过化学反应键合到硅胶表面,从而形成固定相。若采用极性键合相、非极性流动相,则称为正相色谱;采用非极性键合相,极性流动相,则称为反相色谱。这种分离的保留值大小,主要决定于组分分子与键合固定液分子间作用力的大小。反相键合相色谱采用醇-水或腈-水体系作为流动相,纯水廉价易得,紫外吸收小,在纯水中添加各种物质可改变流动相选择性。使用最广泛的反相键合相是十八烷基键合相,即让十八烷基(C18H37―)键......阅读全文
有内标物时高效液相色谱法中如何计算含量
可以利用峰面积与内标物的峰面积进行换算,也可以做标准曲线方程,带入后换算建议楼主参看2010版药典附录高效液相色谱法或相关书籍的理论部分。
高效液相色谱法检测蔬果中维生素C含量
前面介绍的方法由于在使用中有一定的限制,操作复杂、前处理较麻烦。因此在使用中有较大的局限性,目的已逐渐被高效液相色谱法所取代。HPLC法具有检测速度快、操作简单、实验结果可靠等特点。 王艳颖,姜国斌等采用HYPERSIL-C8fz谱柱、浓度0.1%的草酸作流动相的高效液相色谱法,分析了草莓中的
单胺氧化酶活性测定_高效液相色谱法
实验材料大鼠试剂、试剂盒苯胺β-苯乙胺优降宁过氯酸苯甲醛磷酸钠缓冲液甲醇仪器、耗材HPLC紫外检测器制冰机水浴锅离心机离心管移液枪试管试管架比色皿酶标仪微量注射器单胺氧化酶(monoamine oxidase )为催化单胺氧化脱氨反应的酶。缩写MAO,也有称为含黄素胺氧化酶的。EC1.4.3.4。作
高效液相色谱法定量测定介绍外标法
外标法 测定供试品中含量按各品种项下的规定,精密称(量)取对照品和供试品,配制成溶液,分别精密取一定量,注入仪器,记录色谱图,测量对照品和供试品待测成分的峰面积(或峰高),按下式计算含量:A 含量(mx)=mr×-Ar式中各符号意义同上由于微量注射器不易精确控制进样量,当采用外标法测定供试品中某杂质
高效液相色谱法测定食品中添加剂
方案优势 南京科捷参考其它文献对国家标准进行优化,使其检测效果更佳、更实惠。 方法/原理/步骤 食品中添加剂苯甲酸、山梨酸、糖精钠检测方法 1、样品前处理 汽水类:称取适量试样,微温搅拌除去二氧化碳,用氨水溶液调pH为7,加水定容
高效液相色谱法测定饲料中维生素A
方案优势 得出的结果准确可靠,检出限好,适用于配合饲料、浓缩饲料、复合预混合饲料、维生素预混合饲料中维生素A的测定。 采用标准 参考国标(GB/T 17817-2010) 方法/原理/步骤
高效液相色谱法测定脂溶性维生素
一、实验目的1.熟悉高效液相色谱的原理及分析方法。2.掌握高效液相测定脂溶性维生素的方法。二、实验原埋样品中的维生素A 及维生素E 经皂化处理后,将其不可皂化部分提取至有机溶剂中。用高效液相色谱法C18反相柱将维生素A 和维生素E 分离,经紫外检测器检测,并用内标法定量测定。该法最小检出量分别为
高效液相色谱法测定食品中防腐剂
1)测定原理试样加温除去二氧化碳和乙醇,调节H至近中性,过滤后进高效液相色谱仪,经反相色谱分离后,根据保留时间和峰面积进行定性和定量。2)试剂①氨水 1+1。②甲醇 经0.5μm滤膜过滤。③碳酸氢钠溶液 20g/L。④乙酸铵溶液 0.02mol/L。称取1.54g乙酸铵,加水至
高效液相色谱法测定脂溶性维生素
1)原理试样中的维生素A及维生素E经皂化处理后,将其从不可皂化部分提取至有机溶剂中。用高效液相色谱反相柱(RP-C18),将维生素A和维生素E分离,经紫外检测器检测,并用内标法定量测定。2)仪器①高效液相色谱仪(带紫外检测器)。②旋转蒸发器。③高速离心机。④小离心管:具塑料盖,1.5~30mL塑料离
高效液相色谱法测定糠酸和糠醇
以糠醛为原料制备糠醛酸,在强碱介质和催化剂的存在下,糠醛可被空气氧化、硫酸酸化。然而,反应中产生了大量副产物糠醇。因此,准确测定反应液及产品中糠酸、糠醇、糠醛的含量,对于优化反应条件,监控生产过程,保证产品质量具有重要意义。采用反相高效液相色谱法同时分离测定糠醛、糠醇和糠醛。该方法简单、快速、灵敏、
高效液相色谱法
高效液相色谱是在气相色谱和经典色谱的基础上发展起来的。现代液相色谱和经典液相色谱没有本质的区别。不同点仅仅是现代液相色谱比经典液相色谱有较高的效率 和实现了自动化 操作。经典的液相色谱法,流动相在常压下输送,所用的固定相柱效低,分析周期长。而现代液相色谱法引用了气相色谱的理论,流动相改为高压输送。
高效液相色谱法
高效液相色谱是在气相色谱和经典色谱的基础上发展起来的。现代液相色谱和经典液相色谱没有本质的区别。不同点仅仅是现代液相色谱比经典液相色谱有较高的效率 和实现了自动化 操作。经典的液相色谱法,流动相在常压下输送,所用的固定相柱效低,分析周期长。而现代液相色谱法引用了气相色谱的理论,流动相改为高压
高效液相色谱法
高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,经进样阀注入供试品,由流动相带入柱内,在柱内各成分被分离后,依次进入检测器,色谱信号由记录仪或积分仪记录。1.对仪器的一般要求 所用的仪器为高效液相色谱仪。色谱柱的填料和流动相的组分应按各
高效液相色谱法
高效液相色谱法概述HPLC是在经典的液相色谱法基础上发展起来的,其以液体作为流动相,并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。其分离机制与常规柱色谱相同,但填料更加精细,需高压泵推动,柱效高,分析速度快。与气相色谱不同的是液相色谱中流动相亦参与组分的分离过程,其组成、比例和pH值可灵活调节,分离模
高效液相色谱法
首先保留时间与标准峰要完全一致,你可以通过加标的方式来确认,加标浓度大致与目标响应相当,若加的标准峰与目标物完全重叠,则可认为是单个组分,若出现肩峰,则表明有杂峰。如果是DAD检测器,可以通过光谱图来识别,一般的HPLC-DAD就自带峰纯度检测功能,绿区越大表明峰越纯。当然你自己也可以看,因为峰是短
高效液相色谱法对环境中有机氯农药残留量分析
固定相:薄壳型硅胶(37 ~50mm)流动相:正己烷流速:1.5 mL/min色谱柱:50cm´;2.5mm(内径)检测器:差示折光检测器可对水果、蔬菜中的农药残留量进行分析。
实验员常见基础问题:高效液相色谱法
1.与气相色谱相比液相色谱的优点:与气相色谱法相比,液相色谱法不受样品挥发性和热稳定性及相对分子质量的限制,只要求把样品制成溶液即可,非常适合于分离生物大分子、离子型化合物,不稳定的天然产物以及其他各种高分子化合物等。此外,液相色谱的流动相不仅起到使样品沿色谱柱移动的作用,而且与固定相一样,与样品分
高效液相色谱法测维生素c含量的注意事项
建立一种高效液相色谱测定草莓中维生素C含量的新方法.方法:采用HYPERSIL-C18色谱柱,0.1%低浓度的草酸作流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为254 nm.结果:维生素C在浓度为20~100 mg/L范围内有良好的线性关系,线性回归方程为y=9 361.6x-11192,相关系数
高效液相色谱法测定环境水样中的痕量苯脲
高效液相色谱法测定环境水样中的痕量苯脲
食品模拟物中双酚A的测定高效液相色谱法
食品接触材料高分子材料 食品模拟物中双酚A的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了食品模拟物中双酚A的测定方法本标准适用于食品模拟物水、3%乙酸溶液、10%乙醇溶液、橄榄油中双酚A的测定 2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包
饲料中盐酸氨丙琳的测定高效液相色谱法
范围本标准规定了以高效液相色谱法测定饲料中盐酸氨丙琳的方法,适用于配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料和精料补充料中盐酸氨丙琳的测定,最低检测浓度为1.0 m g/kg. 原理饲料样品中的盐酸氨丙琳以含有离子对试剂的甲醇溶液超声提取,离心后过滤,用离子对反相液相色谱法测定。 试剂和材料除特殊注明外,
饲料中磺胺喹恶啉的测定(高效液相色谱法)
1 本标准规定了以GE-200高效液相色谱(HPLC)仪测定饲料中磺胺喳唔琳的方法。本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和添加剂预混合饲料中磺胺喳唔琳的测定,最小检测浓度为5.0 mg/kg.2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不
液相色谱法地榆中金丝桃苷含量测定
一、实验背景 1、目的:建立地榆中金丝桃苷的高效液相色谱含量测定方法。 2、方法:采用RP-HPLC测定,C18柱,流动相为甲醇-0.2%磷酸溶液(46∶54),用三乙胺调pH至3.0,流速1.0ml·min-1,检测波长370nm;供试品溶液的制备采用甲醇超声提取。
液相色谱法地榆中金丝桃苷含量测定
一、实验背景 1、目的:建立地榆中金丝桃苷的高效液相色谱含量测定方法。 2、方法:采用RP-HPLC测定,C18柱,流动相为甲醇-0.2%磷酸溶液(46∶54),用三乙胺调pH至3.0,流速1.0ml·min-1,检测波长370nm;供试品溶液的制备采用甲醇超声提取。 3、结果:测定了不同产地不同批
高效液相色谱法的应用
高效液相色谱法只要求样品能制成溶液,不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。与试样预处理技术相配合,HPLC 所达到的高分辨率和高灵敏度,使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能,能够分离复杂相体中
高效液相色谱法的原理
高效液相色谱法的原理是以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测。高效液相色谱法有“四高一广”的特点:①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载
高效液相色谱法的出现
1960年代,为了分离蛋白质、核酸等不易汽化的大分子物质,气相色谱的理论和方法被重新引入经典液相色谱。1960年代末科克兰、哈伯、荷瓦斯、莆黑斯、里普斯克等人开发了世界上第一台高效液相色谱仪,开启了高效液相色谱的时代。高效液相色谱使用粒径更细的固定相填充色谱柱,提高色谱柱的塔板数,以高压驱动流动相,
高效液相色谱法的原理
高效液相色谱法的原理是以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测。高效液相色谱法有“四高一广”的特点:①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载
高效液相色谱法的原理
高效液相色谱法的原理是以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测。高效液相色谱法有“四高一广”的特点:①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载
高效液相色谱法的原理
高效液相色谱法的原理是以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测。高效液相色谱法有“四高一广”的特点:①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载