hESCs的分离及建系

实验概要hESCs的分离及建系主要试剂hESCs培养液、DPBS、0.25%Trypsin、1 mg/mL胶原酶Ⅳ、丝裂霉素C、0.1%明胶、囊胚培养液G2、胚胎冻存液、细胞基础培养液主要设备35 mm培养皿、4孔培养板、滤器、注射器针头;2 mL、5 mL、10 mL、15 mL、25 mL、50 mL离心管、计数器、巴斯德管、倒置显微镜、生物安全柜、体视镜实验材料人5-7 天的植入前胚胎【胚胎干细胞的建系通常是使用做试管婴儿之后剩余的胚胎,解冻之前要征求捐赠者的同意或之前签订相关知情同意书等协议】实验步骤(1)胚胎复苏和培养①装有胚胎的冻存管从液氮取出之后在室温中静置30 s,然后转入30℃的水浴锅中30~40 s。②将胚胎在0.5、0.2和0.1 M蔗糖的冻存液中孵育10 min。③之后在室温和37℃的冻存缓冲液中分别孵育10 min。④在囊胚培养液G2中进行培养。!注意:复苏冻存的胚胎是一个繁琐的过程,只有严格按照上述步......阅读全文

上海生科院等揭示心血管前体细胞移植对心脏保护作用

  中科院上海生科院杨黄恬研究组与浙江大学医学院王建安、胡新央团队合作,研究揭示了人胚胎干细胞(hESCs)衍生的心血管前体细胞(CVPCs)移植非人灵长类心梗模型后对心脏的保护作用。相关研究成果日前在线发表于《循环研究》。  我国心血管疾病高居致死病因首位。新近严重缺血性心衰病人的临床试验显示其衍

干细胞培养制造技术新进展!

  干细胞培养制造技术新进展!   干细胞是一种能够长期存活,且具有不断自我繁殖能力和多向化潜能,几乎存在于所有组织中的原始细胞。近年来随着科学家们研究的深入,干细胞在血液系统疾病、神经系统疾病、心血管疾病、自身免疫系统疾病以及内分泌疾病等各种疾病的治疗上让人们看到了希望。   干细胞技术是

干细胞培养制造技术新进展

  干细胞是一种能够长期存活,且具有不断自我繁殖能力和多向化潜能,几乎存在于所有组织中的原始细胞。近年来随着科学家们研究的深入,干细胞在血液系统疾病、神经系统疾病、心血管疾病、自身免疫系统疾病以及内分泌疾病等各种疾病的治疗上让人们看到了希望。  干细胞技术是当今医学研究最前沿也是最热门的方向之一,近

研究揭示核纤层蛋白塑造三维基因组空间秩序机制

核纤层是紧贴内核膜内侧的蛋白网状结构,主要由核纤层蛋白(lamins)及其结合蛋白构成。人类的lamins在发育、衰老及疾病过程中扮演关键角色,分为由LMNA基因编码的A型和分别由LMNB1和LMNB2编码的B型。目前,在LMNA基因中已鉴定出超600种致病突变,这些突变可导致儿童早衰症、扩张型心肌

爱尔兰为人类胚胎干细胞研究开绿灯

爱尔兰将不再保护实验室中的人类胚胎。   对于那些试图开展人类胚胎干细胞(hESCs)研究的爱尔兰科学家来说,12月16日绝对是一个值得纪念的日子——爱尔兰最高法院在这一天宣布,所有子宫外的人类胚胎都不是“未出生的”,因此不受国家宪法的保护。该国最高法院之所以作出此项宣判,是因为之前一名妇女曾

DNA复制时序对表观遗传信息及染色质高维结构的影响

  Science |  在细胞周期的S期,基因组DNA按照时间先后顺序发生复制,DNA复制的时序被称为replication timing(RT)。RT是真核生物基因组的保守特征,与组蛋白翻译后修饰及染色质高维区室结构等表观遗传特征高度相关。RT是否能在细胞周期中维持染色质的某些结构及表观遗传特征

细胞免疫荧光染色

实验概要细胞免疫荧光染色实验原理利用抗原抗体反应,鉴定细胞是否表达某种蛋白。细胞经固定后,用特异性抗体(一抗)识别目的蛋白,再用一抗的抗体(二抗)识别一抗,二抗一般耦联荧光基团或化学反应基团,通过荧光或化学发光显示目的蛋白。主要试剂防淬灭剂、DPBS、指甲油、4% PFA、10 μg/mL PI、1

细胞免疫荧光染色实验

实验原理利用抗原抗体反应,鉴定细胞是否表达某种蛋白。细胞经固定后,用特异性抗体(一抗)识别目的蛋白,再用一抗的抗体(二抗)识别一抗,二抗一般耦联荧光基团或化学反应基团,通过荧光或化学发光显示目的蛋白。主要试剂防淬灭剂、DPBS、指甲油、4% PFA、10 μg/mL PI、10 μg/mL Hoec

细胞免疫荧光染色实验

实验原理利用抗原抗体反应,鉴定细胞是否表达某种蛋白。细胞经固定后,用特异性抗体(一抗)识别目的蛋白,再用一抗的抗体(二抗)识别一抗,二抗一般耦联荧光基团或化学反应基团,通过荧光或化学发光显示目的蛋白。主要试剂防淬灭剂、DPBS、指甲油、4% PFA、10 μg/mL PI、10 μg/mL Hoec

当“魔剪”CRISPR遇上干细胞,会撞出什么火花?

  自发现以来,基于CRISPR的基因编辑系统已经从根本上改变了研究者们操纵基因组的能力。近日,Cell杂志推出CRISPR特辑——Gene Editing in Stem Cells,用2个SnapShots、2篇综述以及7篇论文,回顾了近阶段基因编辑技术与干细胞之间“擦出的火花”。  Cell

Xenofree-Culture-of-Neural-Stem-Cells

实验概要Neural  stem cells (NSCs) derived from human embryonic stem cells (hESCs) have  the potential to help provide understanding for human neurogenesis

研究发现调控人神经细胞命运特化的重要机制

在国家重点研发计划、国家自然科学基金等项目资助下,中国科学院广州生物医药与健康研究院研究员潘光锦团队系统揭示了N6腺苷甲基化(m6A)甲基转移酶复合物METTL3/METTL14调控人神经细胞命运特化的关键作用。近日,相关成果发表于《核酸研究》(Nucleic Acids Research)。论文共

Cell:科学家首次利用核移植生成人类胚胎干细胞

  体细胞核转移(Somatic cell nuclear transfer,SCNT)是一种将供体细胞的细胞核移植到已去除细胞核的卵细胞中去的重要技术,利用这种技术,科学家们能获得与供体细胞遗传相匹配的胚胎。   5月来自美国俄勒冈健康与科学大学的研究人员第一次利用核移植技术生成了人类胚胎干

北京大学Nature子刊单细胞RNA测序新成果

  来自北京大学第三医院、教育部辅助生殖重点实验室的研究人员,采用先进的单细胞RNA测序技术绘制出了人类植入前胚胎和胚胎干细胞的转录组全景图,这一重要的研究成果发表在8月11日的《自然结构与分子生物学》(Nature Structural & Molecular Biology)杂志上。   

Cell子刊:干细胞的分子通讯网络

  来自新加坡A*STAR基因组研究所(GIS)和德国马克斯普朗克分子遗传学研究所(MPIMG)的科学家们,在人类胚胎干细胞(hESCs)中发现了一个负责整合细胞通讯信号,维持其干细胞状态的分子网络。这项研究报道在6月的《分子细胞》(Molecular Cell)杂志上。   人类胚胎细胞具有

Stem-Cells:干细胞缺乏是女性反复性流产的元凶

  在一项新的研究中,来自英国华威大学等机构的研究人员发现人子宫内膜(womb lining)中的干细胞缺乏导致上千名女性反复性流产。相关研究结果发表在2016年2月那期Stem Cells期刊上,论文标题为“Loss of Endometrial Plasticity in Recurrent P

NIH打赢“干细胞”官司-人类胚胎干细胞研究禁令被推翻

美法院允许联邦政府继续资助人类胚胎干细胞研究  美国国立卫生研究院(NIH)和其他生物医学研究组织终于可以松一口气了——4月29日,一家联邦上诉法院推翻了于去年颁布的一项暂时停止用人类胚胎干细胞(hESCs)进行研究的临时禁令,同时允许美国联邦政府继续资助人类胚胎干细胞研究。  这是

monESCs传代、冻存及复苏

实验概要monESCs传代、冻存及复苏主要试剂DMEM/F12培养液、monESCs培养液、冻存液C、1 mg/mL胶原酶Ⅳ主要设备15 mL离心管,5 mL、10 mL移液管,冻存管、6孔培养板、倒置显微镜实验步骤传代前一天首先准备好MEF饲养层细胞,饲养层细胞要求密度为1.2×104~1.5×1

Cell:两项研究解析胚胎干细胞的表观遗传机制

  在干细胞研究领域中,表观遗传调控,尤其是细胞核内染色体高级组织形式一直是当前的前沿和热点领域。近日,两个研究小组在《细胞》(Cell)杂志上发表文章,分别报道了人类胚胎干细胞的转录和表观遗传动态机制 以及 多向分化胚胎干细胞的表观遗传作用机制。   在第一项研究中,来自哈佛麻省Broad研

金鹏教授Nature子刊解析iPSC与表观遗传

  来自埃默里大学的研究人员在新研究中绘制出了体细胞重编程过程中,5-羟甲基胞嘧啶(5-hydroxymethylcytosine,5-hmC)在细胞中的动态变化,揭示出在iPS细胞的亚端粒区域存在大量5-hmC介导的异常表观遗传修饰热点。这一研究成果发表在5月19日的《自然细胞生物学》(Natur

科学家有望成功将人类皮肤细胞重编程为人类胎盘组织

  人类滋养细胞干细胞(hTSCs,Human trophoblast stem cells)源自胚胎干细胞(hESCs),或是由OCT4, SOX2, KLF4和MYC (OSKM)(GOKM)因子诱导体细胞而成。近日,一篇发表在国际杂志Nature Communications上题为“Pluri

北大汤富酬等人揭示人类胚胎发育机制

基因表达图   近日,北京大学研究团队采用先进的单细胞 RNA-Seq 转录组测序技术绘制出了完整的人类植入前胚胎和胚胎干细胞的转录组图谱,这一重要的研究成果发表在9月的《自然结构与分子生物学》(Nature Structural & Molecular Biology)杂志上。   由

Science-Immunology:首次发现为何移植10年后会出现免疫排斥

  人体器官移植中有一半的比例会在10到12年内出现受体免疫系统排斥,这一直以来都是一个谜题,科学家们不清楚为何会在移植这么多年后再出现免疫排斥。近期来自匹兹堡大学的一组研究人员发现了这一过程中的一种关键关键细胞受体。  这一研究成果公布在6月23日的Science Immunology杂志上。  

PNAS公布干细胞研究重要突破:两条新路径

  来自华盛顿大学的研究人员发表了题为“Derivation of naïve human embryonic stem cells”的文章,报道了非转基因,初始原态人类多能干细胞的产生,并详细介绍了两种实验方法路径,这将有助于干细胞多能状态的基础研究和临床研究。这一研究成果公布在《美国国家科学

迎难而上,类器官的血管化研究的破茧之路

类器官(Organoids)是将具有干性潜能的细胞在体外进行3D培养,形成多种特异性细胞类型集合的微器官团,能够体外再现真实器官的三维构造及生理功能。然而体外培养的类器官往往缺乏有效的血管,随着类器官体积的增加,缺氧及代谢废物累积导致细胞凋亡,最终致使组织坏死,因此目前培养的类器官无论是形态大小还是

细胞内的流式细胞术方式转录因子和相关蛋白的

细胞内的流式细胞术方式于异质性的细胞群的转录因子和相关蛋白的检测。同时分析多个标记允许沿着一个特定的分化途径的细胞的关键时间点,标记,和频率的确定。转录因子是DNA和其他蛋白质结合,调节基因表达的蛋白质。他们发挥关键作用,在细胞发育和分化。例子包括FOXP3 Treg细胞分化为明确的内胚层和Sox1

Cell子刊综述:多能干细胞的基因组编辑

  具有敲除或突变等位基因的人类多能干细胞(hPSCs),可以通过定制设计的核酸酶产生。转录激活因子样效应物核酸酶(TALENs)和成簇规律间隔短回文重复序列(CRISPR)-Cas9核酸酶,是编辑hPSC基因组最常用的技术。 1月6日,Cell子刊《Cell Stem Cell》在线发表了来自哈佛

专访徐洋:四年历程解决胚胎干细胞免疫排斥

  人类胚胎干细胞(hESCs)临床应用是一种备受关注,前景广阔的治疗手段,这种细胞能自我更新,并且能分化成任何细胞类型。然而之前有研究表明,即使人类胚胎干细胞是来自于人类细胞,但它们仍然具有与受体不同的基因组成,因此在移植后不久,新宿主免疫系统通常会攻击并抗拒这些细胞。   如果要缓解这种抗拒作

甜蜜武汉-共襄盛举——2023年全国糖生物学会议召开

分析测试百科网讯 2023年5月22日-24日,由中国生物化学与分子生物学会糖复合物专业分会、安特百科(北京)技术发展有限公司联合主办,武汉大学承办的 2023年全国糖生物学会议在武汉东湖国际会议中心举行。本次会议邀请了国内糖生物学及糖化学等相关研究领域知名专家和学者齐聚一堂,探讨包括糖生物学、糖化

简化人类细胞基因编辑的新方法

  用RNA指导的CRISPR-Cas9系统的动物和植物基因组工程,正在改变着生物学。与其他基因工程工具相比,这种技术更容易使用,并且更有效,因此,在其发现后的短短几年内,就已经被广泛应用于世界各地的实验室,也成为编辑人类多能干细胞、人类胚胎干细胞基因组最常用的技术。1月6日,Cell子刊《Cell