碘克沙醇及Ficoll400分离纯化大鼠胰岛细胞的效果对比

实验概要本实验的目的是分别使用碘克沙醇和Ficoll-400密度梯度液纯化大鼠胰岛细胞, 比较两者分离纯化大鼠胰岛细胞的收获量、纯度、活性和功能。主要方法为将20只SD大鼠随机分为碘克沙醇纯化组和Ficoll-400纯化组,以胶原酶P消化分离SD大鼠胰腺,分别采用碘克沙醇及Ficoll-400密度梯度液来纯化胰岛细胞。通过DTZ染色,计数胰岛细胞的数量和纯度,用胰岛素释放试验和胰岛移植评估胰岛细胞的功能。主要试剂胶原酶P溶液(Roche公司),碘克沙醇工作液 (EZ-SepTM,达科为公司产品),HCA液(上海长征医院产品),RMPI1640培养液(Gibco公司),新生小牛血清(杭州四季青公司)。主要设备冷冻离心机(上海安亭),电子密度计(梅特勒公司)。实验材料♂SD大鼠,体质量200-250 g。20只SD大鼠随机均分为2组:碘克沙醇组及Ficoll-400组;两组分别使用碘克沙醇-HCA或Ficoll-400-HCA作为密......阅读全文

胰岛素

制法要求本品应从检疫合格猪的冰冻胰脏中提取。生产过程应符合现行版《药品生产质量管理规范》的要求。本品为动物来源,工艺中应进行病毒的安全性控制性状本品为白色或类白色的结晶性粉末。本品在水、乙醇中几乎不溶;在无机酸或氢氧化钠溶液中易溶。鉴别(1)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与

胰岛β细胞分泌的胰岛素的基本介绍

  从胰岛β细胞分泌的胰岛素大部分在肝肾灭活,其中约40%~50%经门静脉入肝灭活,因此肝肾功能状态,尤其是肝功能情况是影响循环血中胰岛素含量的重要因素;糖尿病患者在使用胰岛素,尤其是动物胰岛素后,体内常产生胰岛素抗抗体,由于胰岛素与胰岛素抗抗体可产生高度免疫反应,故可影响血浆胰岛胰岛素的测定。另外

胰岛素抵抗

  胰岛素抵抗是指各种原因使胰岛素促进葡萄糖摄取和利用的效率下降,机体代偿性的分泌过多胰岛素产生高胰岛素血症,以维持血糖的稳定。胰岛素抵抗易导致代谢综合征和2型糖尿病。50年代Yallow等应用放射免疫分析技术测定血浆胰岛素浓度,发现血浆胰岛素水平较低的病人胰岛素敏感性较高,而血浆胰岛素较高的人对胰

什么是胰岛素?胰岛素的发展历史简介

  胰岛素是由胰脏内的胰岛β细胞受内源性或外源性物质如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸、胰高血糖素等的刺激而分泌的一种蛋白质激素。胰岛素是机体内唯一降低血糖的激素,同时促进糖原、脂肪、蛋白质合成。外源性胰岛素主要用来治疗糖尿病。  发现  胰岛素于1921年由加拿大人F.G.班廷和C.H.贝斯特首先发现。

基础胰岛素和餐时胰岛素的介绍

  基础胰岛素可以抑制肝脏生成葡萄糖,采用合适剂量刻使空腹血糖维持在接近正常的水平,而餐前胰岛素能够满足食物吸收后的额外需求,从而降低餐后血糖的升高。确诊1型糖尿病后应尽早开始基础-餐时胰岛素治疗以提供生理模式的胰岛素补充。需要胰岛素的2型糖尿病患者通常先从基础胰岛素治疗开始(除了使用口服药物),但

以色列口服胰岛素梦想:不用注射的胰岛素

  大型制药企业在胰岛素新制剂研究开发方面投入巨大预算。大部分项目都以失败告终,理想的给药途径还是口服制剂,就像维生素或阿司匹林那样每天服用。   现在,还很不起眼的一家以色列生物技术企业,正在默默地进行一系列早期阶段试验,它将成为世界首个开发胰岛素口服药丸的公司,实现不仅是数百万糖尿病

可替代胰岛素注射的智能胰岛素贴片

  来自美国北卡罗来纳大学和北卡罗来纳州立大学的研究人员最近发明了一种智能胰岛素贴片,可以监测血糖水平,当血糖水平升高时可以自动按需释放胰岛素。  这项发表在《美国国家科学院院刊》上的研究表明,给糖尿病病人带来痛苦的胰岛素注射有望成为历史。  这种不大于1便士硬币的方形薄贴片内面密布超过100个呈矩

最新研究发现调控胰岛β细胞分泌胰岛素的关键分子

  虽然现在新的降糖药物层出不穷,但都只是通过加速身体器官组织对葡萄糖的摄取和利用来达到降糖目的,治标不治本。造成糖尿病最核心的胰岛β细胞功能缺陷问题,仍是目前难以解决的世界性难题。  近期,德国慕尼黑亥姆霍兹中心糖尿病与再生研究所的研究人员发现:抑制小鼠胰岛β细胞上一种名为Inceptor的分子,

胰岛素制剂胰岛素类似物的基本介绍

  胰岛素类似物是利用重组DNA技术制造的胰岛素类似物旨在产生更接近生理的胰岛素模式,尤其是针对1型糖尿病,且可降低发生低血糖的风险。速效胰岛素类似物(赖脯胰岛素、赖脯胰岛素-aabc、门冬胰岛素、超速效门冬胰岛素和谷赖胰岛素)用作餐前胰岛素时比普通胰岛素起效更快,药效更短;长效胰岛素类似物用作基础

通过猪胰岛移植后,他完全摆脱了外源性胰岛素

1月9日,全球首例2型糖尿病肾移植术后猪胰岛移植患者来中南大学湘雅三医院复查,结果显示,糖化血红蛋白正常,餐后血糖正常,肾功能正常,更重要的是他实现了外源性胰岛素完全脱离。 小李有23年的糖尿病史,即使每日用到了50IU的外源性胰岛素,仍出现血糖代谢失控,发展为肾功能不全尿毒症,需要频繁的血液透

胰岛细胞瘤的诊断

  胰岛素瘤分泌过量的胰岛素释放入血,引起以低血糖为主的一系列症状,患者可呈发作性低血糖昏迷,久之将损害脑组织,发生意识障碍、精神异常等。临床主要表现为低血糖综合征,血浆胰岛素水平升高。低血糖发作常随病程延长而频繁,发作时间延长, 程度加重, 多伴有身体逐渐肥胖,记忆力、反应力下降。由于胰岛素瘤的临

什么是胰岛细胞抗体?

  胰岛细胞抗体(Islet cell autoantibodies,ICA)在1974年用O型血患者的胰腺组织冷冻切片,经间接免疫荧光法(11F)检测胰岛依赖性糖尿病及其他器官特异性自身免疫性疾病患者血清时发现抗胰岛细胞抗体。

胰岛素有哪些作用?

胰岛素的作用:①促进细胞摄取葡萄糖;②促进甘油三酯的合成和储存;③促进糖原合成,减少糖原分解;④促进糖氧化和分解,加速糖的利用;⑤阻止糖异生作用。高血糖、高氨基酸、胰泌素、胰升糖素和迷走神经兴奋等都可促进胰岛素的释放。

小鼠胰岛分离与纯化

实验概要小鼠胰岛分离与纯化实验步骤一、准备工作:1、小鼠:小鼠应该毛色光滑,并根据实验需要选择合适的性别及年龄。2、准备试剂:Hanks液 、P型酶(Roche) 、FBS 、1640培养基(含7mM glucose 10%FBS)3、准备器具:眼科剪1把 ,眼科镊(直)2把,动脉止血夹(75px)

胰岛细胞瘤的简介

  胰岛细胞瘤(tumors of pancreatic islet cell tumor) 又称胰岛细胞腺瘤(islet cell adenoma)。  发生在胰岛细胞的肿瘤。  胰腺胰岛细胞瘤分为功能性和非功能性两大类。功能性胰岛细胞瘤主要是胰岛素瘤,由β细胞形成,临床上很少见,据国外统计发病率

胰岛细胞瘤的治疗

  治疗主要是手术切除肿瘤,若手术探查未发现肿瘤或肿瘤已转移,则可行药物治疗,如甲氰咪胍治疗胃泌素瘤,氯苯甲噻二嗪治疗胰岛素瘤,生长抑素(SMS-201 995)治疗胰高血糖素瘤,阿霉素治疗生长抑素瘤等。5-氟尿嘧啶,氮烯唑胺或链脲霉素也可以用于胰岛细胞瘤的药物治疗。

胰岛素抗体什么

  抗体本身属于人体产生的一种免疫物质,是人体防御机能的一部分。不过胰岛素抗体的产生则属于病理状态,是免疫功能紊乱的一种表现。这种抗体可以和胰岛素结合,影响到胰岛素的功能导致血糖升高。胰岛素抗体可以分为外源性和内源性两大类,外源性抗体出现在长期注射胰岛素的人群,多和胰岛素中含有一定的杂质刺激机体发生

胰岛素测定实验

实验材料 胰岛素标准品125 I-胰岛素试剂、试剂盒 抗血清第二抗体PBS正常兔血清仪器、耗材 计数仪试管加样器离心机实验步骤 一、材料及试剂 1.  胰岛素标准品(不同浓度的) 2、125 I-胰岛素 3、抗血清 4、第二抗体 5、分析试剂  为0.05 mol/L pH7.4 PBS液+1%正常

胰岛细胞瘤的概述

  胰岛细胞瘤(tumors of pancreatic islet cell tumor) 又称胰岛细胞腺瘤(islet cell adenoma)。  发生在胰岛细胞的肿瘤。  胰腺胰岛细胞瘤分为功能性和非功能性两大类。功能性胰岛细胞瘤主要是胰岛素瘤,由β细胞形成,临床上很少见,据国外统计发病率

胰岛细胞的功能分类

  一、B细胞(β细胞),约占胰岛细胞的60%~80%,分泌胰岛素,胰岛素可以降低血糖。缺乏胰岛B细胞将导致糖尿病的发生。  二、A细胞(α细胞),约占胰岛细胞的24%~40%,分泌胰高血糖素,胰高血糖素作用同胰岛素相反,可增高血糖。  三、D细胞(δ细胞-),约占胰岛细胞总数的6%~15%,分泌生

常用胰岛素剂型

一、(一)普通胰岛素1、适应症:1、2型糖尿病2、用法:一般2-4g葡萄糖需要1u胰岛素,餐前30min皮下注射3、制品:注射剂 400u/ml】    (二)基因工程胰岛素1、适应症:对动物胰岛素过敏、出现脂质萎缩、对动物胰岛素耐药;2、用法:(1)常规型可一天内多次使用;(2)中效可一天1-2次

胰岛素受体对胰岛素亲和性的测定实验

试剂、试剂盒 牛血淸白蛋白猪胰岛素[125I]胰岛素(受体级)结合缓冲液实验步骤 材料[125I]胰岛素(受体级)(DuPontNENNEX196)猪胰岛素(如,Sigma Chemical Co,I3505)牛血淸白蛋白(BSA;1%)试剂结合缓冲液(冷配体置换实验用)(配方,见“试剂的配制”,P

胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验

胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验             实验方法原理 试剂、试剂盒 纯化的鼠肝

高胰岛素血症和胰岛素抵抗的相关介绍

  高胰岛素血症常伴有高血压、高甘油三酯、高密度脂蛋白降低、低密度脂蛋白增加、T2DM。高胰岛素血症也可伴其他多代谢紊乱,如尿酸增高、肥胖等,因此又称多代谢综合征(X综合征),这些代谢紊乱可在糖尿病发生前出现。  高胰岛素血症促进动脉壁脂质的合成与摄取,阻止胆固醇的清除以及促进动脉壁平滑肌细胞的增殖

胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验

胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验标签: 胰岛素受体 [125I]胰岛素 蛋白质纯化与鉴定实验指南 第四单元 实验 5本实验介绍关于胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联过程。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验实验方法原理 试剂、试剂盒

糖尿病患者通过猪胰岛移植摆脱外源性胰岛素

中南大学湘雅三医院12日对外透露,经该院复查,全球首例2型糖尿病肾移植术后猪胰岛移植患者的糖化血红蛋白、餐后血糖、肾功能正常,实现了外源性胰岛素完全脱离。这是全球首例猪胰岛异种移植治疗糖尿病实现完全摆脱胰岛素,异种胰岛移植取得重要突破。 该患者有23年糖尿病史,即使每日使用大量外源性胰岛素,仍出

胰岛素剌激的胰岛素受体自磷酸化实验

胰岛素剌激的胰岛素受体自磷酸化实验             试剂、试剂盒 纯化的鼠肝细胞质膜 部分纯化的胰岛素受体

胰岛素制剂人胰岛素的相关内容介绍

  (1)普通胰岛素 — 普通胰岛素(短效)是一种可溶性胰岛素-锌复合物,与内源性人胰岛素有相同的氨基酸序列。其可用于控制餐后的血糖升高。皮下注射普通胰岛素后,已形成的六聚体将分解成二聚体和单体从而被吸收。此过程会使血流中胰岛素浓度的升高延迟,因此需要在餐前至少30分钟注射胰岛素,以实现对餐后血糖上

胰岛素受体对胰岛素亲和性的测定实验

本实验介绍胰岛素受体对胰岛素亲和性的测定方法。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒牛血淸白蛋白猪胰岛素[125I]胰岛素(受体级)结合缓冲液实验步骤材料[125I]胰岛素(受体级)(DuPontNENNEX196)猪胰岛素(如,Sigma Chemical Co,I350

胰岛素剌激的胰岛素受体自磷酸化实验

本实验中,我们将考察胰岛素受体的胰岛素刺激酪氨酸激酶活性。用抗磷酸酪氨酸抗体(antiphosphotyrosine antiboty) 来检测磷酸化的受体,后者可用 SDS-PAGE 来分离。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒纯化的鼠肝细胞质膜部分纯化的胰岛素受体純化