HRP标记抗体戊二醛二步法
实验概要本实验利用戊二醛二步法进行了HRP标记抗体。为一种双功能试剂，通过其醛基分别与酶和免疫球蛋白上的氨基共价结合，形成酶-戊二醛-免疫球蛋白结合物。主要试剂1. 0.1M PH6.8磷酸缓冲盐水(PBS)：取0.2M Na2HPO4 49ml, 0.2M NaH2PO4 51ml，NaCl1.8克，加蒸馏水至200ml。2. 1.25%戊二醛液：取25%戊二醛50ml与PH6.8的PBS 1ml混合。3. 1M PH9.5碳酸盐缓冲液：取1M碳酸钠3ml与1M碳酸氢钠7ml混合。4. 0.2M赖氨酸溶液：称赖氨酸29.2mg溶于0.01M PH9.5碳酸缓冲液1ml中。5. 0.15M PH7.4 PBS及生理盐水。6. PH7.8饱和硫酸铵溶液及半饱和硫酸铵溶液。7. 萘氏试剂及聚乙二醇(PEG，MW2000)。8. 纯化的特异性抗体或抗Ig抗体。9. HRP(RZ>3.0)。主要设备1. Sephadex G-25......阅读全文
HRP标记抗体的方法
酶与抗体交联的方法有许多种,根据酶的结构不同可采用不同的方法。对于制备HRP结合物，可用戊二醛二步法和过碘酸钠法。尤以简易过碘酸钠法更为常用。 戊二醛二步法 1. 原理：戊二醛为一种双功能试剂，通过其醛基分别与酶和免疫球蛋白上的氨基共价结合，形成酶-戊二醛-免疫球蛋白结合物。 2. 标记
HRP底物归类以及操作流程
二氨基联苯胺／金属盐 DAB是辣根过氧化物酶最比较敏感、常见的底物。它造成明显的深棕色物质，在水和醇中不融解。大部分状况下，强烈推荐在DAB中添加不一样的金属正离子。当添加金属盐如钴、镍至底物液中，辣根过氧化物酶能够更为比较敏感。该类反映物质呈暗灰蓝色至灰黑色，且在水及醇中平稳。DAB／金
HRP底物分类及其操作步骤
底物范围较广，包括二氨基联苯胺(DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。二氨基联苯胺／金属盐 DAB是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物，在水和醇中不溶解。多数情况下，推荐在DAB中加入不同的金属离子。当加入金属盐如钴、镍至底物液中，辣根过氧化物酶可以更加敏感。此类反应产物呈暗蓝灰色至黑
HRP标记抗体简易过碘酸钠法
实验概要本实验用简易过碘酸钠法进行HRP标记抗体。本法是以NaIO4先将HRP表面的糖分子氧化成醛基，然后再与Ig上的氨基相结合，所获酶标记抗体的产率高，将近70%的HRP和Ig结合，99%的Ig与酶结合，酶与Ig的活性无重大损失，是目前最常用的方法。实验原理经典的过碘酸钠法中需采用二硝基氟苯封闭H
HRP标记抗体简易过碘酸钠法
实验概要本实验用简易过碘酸钠法进行HRP标记抗体。本法是以NaIO4先将HRP表面的糖分子氧化成醛基，然后再与Ig上的氨基相结合，所获酶标记抗体的产率高，将近70%的HRP和Ig结合，99%的Ig与酶结合，酶与Ig的活性无重大损失，是目前最常用的方法。实验原理经典的过碘酸钠法中需采用二硝基氟苯封闭H
免疫组织化学（HRPDAB系统）
1. 溶液准备：PBS （ pH7.4 ） :10mM Na2HPO4 ，1.8mM KH2PO4 ， 50mM NaCl ， 2.7mM KCl封闭缓冲液：3%BSA-PBS2. 程序：1 ） 对石蜡切片进行脱蜡和水化：3×10min 二甲苯，5min 100%乙醇，5min 95%乙醇，5min
来自噬菌体的惊喜——－M13－Antibody－(HRP)
前言2018年10月诺贝尔化学奖的一半颁发给了美国科学家George P. Smith和英国科学家Gregory P. Winter, 两人获奖的原因是多肽和抗体的噬菌体展示技术。噬菌体展示技术在生物医药研发中有着十分广泛的应用，是生物新药研发的源头技术，M13噬菌体则被广泛地应用于噬菌体展示技
HRP标记抗体戊二醛二步法
实验概要本实验利用戊二醛二步法进行了HRP标记抗体。为一种双功能试剂，通过其醛基分别与酶和免疫球蛋白上的氨基共价结合，形成酶-戊二醛-免疫球蛋白结合物。主要试剂1. 0.1M PH6.8磷酸缓冲盐水(PBS)：取0.2M Na2HPO4 49ml, 0.2M NaH2PO4 51ml，NaCl1.8
HRP标记抗体戊二醛二步法
实验概要本实验利用戊二醛二步法进行了HRP标记抗体。为一种双功能试剂，通过其醛基分别与酶和免疫球蛋白上的氨基共价结合，形成酶-戊二醛-免疫球蛋白结合物。主要试剂1. 0.1M PH6.8磷酸缓冲盐水(PBS)：取0.2M Na2HPO4 49ml, 0.2M NaH2PO4 51ml，NaCl1.8
哈威HRP型液控单向阀的主要应用
我公司具有良好的市场信誉，专业的销售和技术服务团队，凭着多年经营经验，熟悉并了解市场行情，赢得了国内外厂商的支持。本公司已成为众大中小企业的固定供应商及国内贸易商合作伙伴,至力于成为行业中之一的公司。 下面，小编为大家介绍一下哈威HRP型液控单向阀的主要应用，详情如下： (1)保持压
山羊抗兔二抗（HRP标记）在诸多文献中的应用
在免疫学实验中，比如WB，IHC，IF等，大家都知道选着好正确的一抗，往往实验就成功了一大半，因此，往往很多研究者便会忽视对二抗，以及其它试剂盒品质的追求。二抗是一种相对而言比较稳定的产品，包装大，因此很多实验室都会公用一个二抗。但如果二抗没有选择好的话，影响的可能就是一整个实验室或者课题组了。艾美
通用型HRPAEC底物显色试剂盒使用说明
通用型HRP-AEC底物显色试剂盒产品说明书（中文版） 主要用途 通用型HRP-AEC底物显色试剂是一种旨在通过过氧化物酶的催化，底物3-氨基-9-乙基咔唑氧化形成红色不溶性产物，以此鉴定过氧化物酶活性，进而确定目标分子表达的权威而经典的技术方法。其适用于辣根过氧化酶标记蛋白的免
酶标记抗体HRP标记抗体戊二醛二步法
实验概要本实验介绍了酶标记抗体-HRP标记抗体中的戊二醛二步法的操作流程。实验原理戊二醛为一种双功能试剂，通过其醛基分别与酶和免疫球蛋白上的氨基共价结合，形成酶-戊二醛-免疫球蛋白结合物。主要试剂1. 0.1M PH6.8磷酸缓冲盐水(PBS)：取0.2M Na2HPO4 49ml, 0.2M Na
通用型HRPAEC底物显色试剂盒使用说明
主要用途通用型HRP-AEC底物显色试剂是一种旨在通过过氧化物酶的催化，底物3-氨基-9-乙基咔唑氧化形成红色不溶性产物，以此鉴定过氧化物酶活性，进而确定目标分子表达的权威而经典的技术方法。其适用于辣根过氧化酶标记蛋白的免疫学检测包括蛋白质西方杂交和免疫化学，以及原位杂交染色等。产品即到即用，性能稳
被认为是HRP最为敏感的色原底物是TMD还是OPD？
HRP最为敏感的色原底物是OPD。四甲基联苯胺（TMB）：TMB是一种优于OPD的新型HRP色原底物。TMB经HRP作用后变为蓝色，加入硫酸终止反应后变为黄色，最大吸收峰波长为450nm。TMB具有稳定性好，成色无需避光，无致突变作用等优点，已成为目前ELISA中应用最广泛的底物。缺点是水溶性差。邻
辣根过氧化物酶实验的HRP的活力测定
1、活力测定：测定k4值的方法操作如下： 取2个比色池（带盖，光程1厘米），按下表加入反应物 *酶液：将1毫克蛋白/毫升的酶液用磷酸盐缓冲液稀释10倍后应用。 加好反应物，摇匀，在470nm 读出OD值，为t=0 的读数。立即加0.01毫升40mM过氧化氢溶液于2个比色池中，即刻摇匀并记时
辣根过氧化物酶实验的HRP的制备的简介
⒈水提取： 称取 10斤用水冲刷干净的鲜辣根（辣根皮中亦含有丰富的HRP），用菜刀切成小碎块，在搅肉机中搅碎1~2次。碎渣浆用1倍体积的水在低温下搅拌提取过夜（亦可采用高速抽提法）。次日用甩干机（或离心机）甩干，收集滤液，碎渣再用1/4倍体积水浸泡提取一次，合并两次滤液，量总体积和度，0。
辣根过氧化物酶(HRP)标记试剂盒的应用
活化的过氧化物酶是辣根过氧化物酶（HRP），其天然碳水化合物（糖）已被高碘酸盐轻度氧化以产生胺反应性醛基。 活性过氧化物酶的这些羰基自发地、有效地与抗体或其它蛋白质上的伯胺交联。该方法比其它胺反应性化学试剂，如戊二醛偶联更有效，戊二醛偶联常常导致聚合反应和更高程度的偶联失活。 预活化的酶消除
关于辣根过氧化物酶的HRP的活力测定的介绍
1、活力测定：测定k4值的方法操作如下： 取2个比色池（带盖，光程1厘米），按下表加入反应物 *酶液：将1毫克蛋白/毫升的酶液用磷酸盐缓冲液稀释10倍后应用。 加好反应物，摇匀，在470nm 读出OD值，为t=0 的读数。立即加0.01毫升40mM过氧化氢溶液于2个比色池中，即刻摇匀并记时
为什么辣根过氧化酶（HRP）可以作为ELISA实验中常见的酶
ELISA实验中的每一个试剂都是试剂盒的重要组成部分，特别是对酶的要求更高，ELISA中所用的酶要求纯度高、催化反应的转化率高、专一性强、性质稳定、来源丰富、价格不贵、制备成的酶标抗体或抗原性质稳定，继续保留着它的活性部分和催化能力。在受检标本中不存在与标记酶相同的酶。另外它的相应底物应易于制备和保
HRP标记抗体的方法(戊二醛二步法和简易过碘酸钠法)2
（6）PH7.8饱和硫酸铵溶液及半饱和硫酸铵溶液。 （7）萘氏试剂及聚乙二醇(PEG，MW2000)。 （8）纯化的特异性抗体或抗Ig抗体。 （9）HRP(RZ>3.0)。 （10）Sephadex G-25层析柱(2cm×50cm)。 （11）搅拌器，分光光度计，离心机。 （12）透析袋，大、小烧
HRP标记抗体的方法(戊二醛二步法和简易过碘酸钠法)1
一、戊二醛二步法 1. 原理 戊二醛为一种双功能试剂，通过其醛基分别与酶和免疫球蛋白上的氨基共价结合，形成酶-戊二醛-免疫球蛋白结合物。 2. 标记步骤 （1）称取HRP25mg溶于1.25%戊二醛溶液中，于室温静置过夜。 （2）反应后的酶溶液经Sephadex G-25层析柱，用生理盐水洗脱。流速
非标记抗体酶法PAP法
PAP复合物是离体制备的HRP抗HRP复合物，它的制备方法较多，现简介其中之一。（1）制备抗HRP血清：健康雄性家兔（2．Okg以上），可先于足趾皮下注射灭活的卡介苗（共lOmg），2周后重复1次，刺激机体免疫系统功能，1周后于背部脊柱两旁皮内多点注射1．Oral乳剂[福氏完全佐剂，含HRP3。3m
过氧化物酶抗过氧化物酶复合物(PAP)的制备实验
实验概要本实验制备了过氧化物酶-抗过氧化物酶复合物(PAP)。主要试剂1. HRP和兔(或羊)抗HRP：抗HRP用HRP免疫兔(或羊)获得2. 0.075mol/L醋酸钠-0.15 mol/L醋酸铵等量混合液3. 0.1mol/LHCl4. 0.01mol/LHCl5. 饱和硫酸铵溶液6. 0.01
过氧化物酶抗过氧化物酶复合物的制备
实验概要本实验介绍了制备过氧化物酶-抗过氧化物酶复合物的操作步骤。主要试剂1. HRP和兔（或羊）抗HRP：抗HRP用HRP免疫兔（或羊）获得2. 0.075mol/L醋酸钠-0.15 mol/L醋酸铵等量混合液3. 0.1mol/LHCl和0.01mol/LHCl4. 饱和硫酸铵溶液5. 0.01
POD辣根过氧化物酶的溶解性及分类说明
POD是一种具有氧化还原酶性质的血红素蛋白。用于生化研究，是酶标记法所用的一种主要酶。也用于生物液体中葡萄糖和半乳糖的测定。HRP是一种分子量达44 000的糖蛋白，由无色的酶蛋白和深棕色的铁卟啉结合而成，中性糖和氨基糖约占18％，主要有甘露糖、木糖、阿拉伯糖和己糖胺等。每一个HRP分子中含一个
标记羊抗兔IgG保存策略
辣根过氧化物酶（HRP）标记羊抗兔IgG应用：WB（1:1000 - 1:50000）、ELISA（1:500 - 1:10000） IHC（1:50 - 1:500）。 由于具体实验中检测方法的灵敏度，温度及孵育时间等因素均可影响抗体最适工作浓度，所以实验人员进行特定实验时，需根据具体情况
POD辣根过氧化物酶的溶解性及分类说明
本篇文章由专业生化试剂供应商索莱宝为您提供。说明：POD是一种具有氧化还原酶性质的血红素蛋白。用于生化研究，是酶标记法所用的一种主要酶。也用于生物液体中葡萄糖和半乳糖的测定。别名：Donor: hydrogen-peroxide oxidoreductase；Horseradish peroxida
豆壳过氧化物酶作为标记酶
在1966年，Avrameans等把辣根过氧化物酶与人血清清蛋白交联后，制成“血清清蛋白－HRP”酶标记物和与抗人血清清蛋白抗体交联制成的“抗血清清蛋白－HRP”酶标记物，在免疫电泳和免疫扩散试验中，分别检测抗清蛋白抗体和清蛋白。1971年，Engvall等人分别以纤维素和聚苯乙烯试管作为固相载体吸
常用的酶和常用的底物有哪些？
常用的酶1.辣根过氧化物酶（HRP）：目前酶联免疫吸附试验中应用最广泛的标记用酶。由无色的糖蛋白（主酶）和亚铁血红蛋白（辅基）结合而成的复合物。辅基是酶活性基团，而主酶则与酶活性无关，HRP的纯度用RZ（HRP分别在403nm和275nm处的吸光度比值）表示，RZ值应大于3.0。RZ值仅说明血红素基