免疫组织化学（HRPDAB系统）
1. 溶液准备：PBS （ pH7.4 ） :10mM Na2HPO4 ，1.8mM KH2PO4 ， 50mM NaCl ， 2.7mM KCl封闭缓冲液：3%BSA-PBS2. 程序：1 ） 对石蜡切片进行脱蜡和水化：3×10min 二甲苯，5min 100%乙醇，5min 95%乙醇，5min 80%乙醇， 5min 70%乙醇，3×5min PBS。2 ） 修复抗原，PBS洗涤三次，每次5min。3 ） 室温下，将玻片在3%H2O2-甲醇溶液中浸泡15min封闭内源性过氧化物酶，然后用PBS洗涤三次，每次 5min。4 ） 加入一抗（用3%BSA-PBS封闭液1:50稀释一抗），37℃湿盒孵育1h。5 ） 加入Post-blocking室温湿盒孵育30min,然后用PBS洗涤三次，每次5min。6 ） 加入稀释好的辣根过氧化物酶（HRP）标二抗，室温下湿盒孵育30min。7 ） 用PBS洗涤玻片5次，每次5min。8 ）......阅读全文
免疫组织化学
实验概要免疫组化流程实验步骤 第一天：1、组织切片置于60℃烘烤1hr2、二甲苯1、2 分别浸泡15min，脱蜡3、水化：100% Etoh 10min X 295% Etoh 5min X 185% Etoh 5min X 170% Etoh 5min X 1注：以下步骤切勿让组织处于干燥状态！4
免疫组织/细胞化学染色2
四 结果分析 编号 阳性片 待检片 阴性对照 结论 1 - -
免疫组织/细胞化学染色1
一 基本原理免疫组织/细胞化学是利用抗原抗体具有高度特异性结合反应的原理，采用已知抗体检测组织或细胞的抗原物质，然后以适当的方式显示其结合信号以证明组织或细胞是否存在未知抗原，并进行定性、定位或定量的研究。二 基本步骤 1 三步法：以SP（链霉卵白素-过氧化物酶）试剂盒为例： 石蜡切片脱蜡至
免疫组织化学
· Double Peroxidase (HRP) Immunohistochemical Labeling of Trypsin-Sensitive Antigens (KPL)· Immunohistochemistry (Tyner lab)This is a
免疫组织化学简介
免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应炕原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来，借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用，在细胞、亚细胞水平检测各种抗原
免疫酶组织化学技术
免疫酶组织化学技术 1．酶标直接法和间接法 Nakane(1966)将辣根过氧化物酶(HRP) 标记在抗体免疫球蛋白分子上，创建了酶标记免疫组化的直接法、间接法和桥法。 2．PAP法 Stemberger(1969)在酶桥法的基础上，建立了非标记抗体法，先将HRP免
免疫组织化学染色
实验概要本说明适用于没有全自动染色机或 capillary gap system（如 Shandon Sequenza）等的实验室。可用移液器人工加试剂，也适用于全自动或半自动系统。培养箱应配备有加湿器避免组织变干。变干发生在任何阶段最后都会导致非特异性染色及高背景染色。带密封盖的浅塑料盒，底部铺上
免疫组织化学简介
免疫组织化学（immunohistochemistry）又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。 它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来，借助显微镜（包括荧光显微镜、电子显微
免疫组织化学染色
实验概要本说明适用于没有全自动染色机或 capillary gap system（如 Shandon Sequenza）等的实验室。可用移液器人工加试剂，也适用于全自动或半自动系统。培养箱应配备有加湿器避免组织变干。变干发生在任何阶段最后都会导致非特异性染色及高背景染色。带密封盖的浅塑料盒，底部铺上
免疫组织化学法概述
免疫组织化学是应用抗原和抗体结合的原理，检测细胞内多肽、蛋白质等大分子物质的分布。这种方法的特异性强、敏感度高、发展迅速、应用广泛，成为生物学和医学众多学科的重要研究手段。免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性
免疫组织化学技术简介
免疫组织化学技术（immunohistochemistry）或免疫细胞化学技术（immunocytochemistry）是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(（多肽和蛋白质）
免疫组织化学法实验
实验方法原理 实验材料 在3〜5 cm培养皿上生长的单层细胞（培养皿越小所需的抗体就越少 但培养皿应适合显微镜下观察）试剂、试剂盒 VPBS 40℃2% (m V)高聚甲醛（PFA)固定液 4℃ 用于细胞表面抗原固定100%甲醇 -10〜-20℃ (置于冰箱的结冻室冷却较为理想）；或含0.1
免疫组织化学染色方法
实验原理免疫细胞化学（immunocytochemistry）是根据免疫学原理，利用抗体同特定抗原专一结合，对抗原进行定位测定的技术。抗原主要为大分子或与大分子相结合的小分子；抗体则是由浆细胞针对特定的抗原分泌的γ球蛋白。如果将抗体结合上标记物，再与组织中的抗原发生反应，即可在光镜或电镜下显示出该抗
免疫组织化学的概念
免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来，借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用，在细胞、亚细胞水平检测各种抗原
免疫荧光组织（细胞）化学染色方法
免疫荧光组织（细胞）化学染色方法：直接法基本原理 将荧光素标记在相应的抗体上，直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高，非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低；而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。 试剂与仪器 磷酸盐
免疫荧光组织（细胞）化学染色方法
免疫荧光组织（细胞）化学染色方法：直接法基本原理 将荧光素标记在相应的抗体上，直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高，非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低；而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。 试剂与仪器 磷酸盐
免疫组织化学染色方法
实验概要免疫组织化学染色法是指在抗体上结合荧光或可呈色的化学物质，利用免疫学原理中抗原和抗体间专一性的结合反应，检测细胞或组织中是否有目标抗原的存在，此方式不只可以用来测知抗原的表现量也可观察抗原所表现的位置。只要是能够让抗体结合的物质，也就是具有抗原性的物质包括蛋白质、核酸、多糖、病原体等都可侦测
免疫组织化学染色方法
实验原理免疫细胞化学（immunocytochemistry）是根据免疫学原理，利用抗体同特定抗原专一结合，对抗原进行定位测定的技术。抗原主要为大分子或与大分子相结合的小分子；抗体则是由浆细胞针对特定的抗原分泌的γ球蛋白。如果将抗体结合上标记物，再与组织中的抗原发生反应，即可在光镜或电镜下显示出该抗
亲和免疫组织化学实验
实验方法原理 ABC 法即亲和素-生物素-过氧化物酶复合物法，是许世明于 1981 年在 BAB 法和 LAB 法的基础上改良的，其特点是利用亲和素分别连接生物素标记的第二抗体和生物素标记的酶。ABC 法与 LAB 法、BAB 法不同的是第一抗体不为生物素所标记，生物素标记的第二抗体与
免疫金组织化学染色实验
实验方法原理 免疫金染色（immunogold staining，IGS）法是由 Geoghegan 等（1978）首次应用金标探针检测 B 淋巴细胞表面抗原，将胶体金颗粒（大于 20 nm）标记在第二抗体或 SPA 分子上，制备成金标二抗。其原理是当特异性抗体与抗原结合后，用金标二抗或金标
免疫荧光组织（细胞）化学染色方法
一、其它荧光抗体染色方法1、膜抗原荧光抗体染色法本法应用直接法或间接法的原理和步骤，可对活细胞在试管内进行染色，常用于T和B细胞、细胞培养物、瘤细胞抗原和受体等的检查和研究，阳性荧光主要在细胞膜上。FACS即采用此法原理。2、双重染色法在同一标本上有两个抗原需要同时显示（如A抗原和B抗原），A抗原的
什么是免疫组织化学
免疫组织化学(immunohistochemistry)又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。 它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来，借助显微镜（包括荧光显微镜、电子显微
免疫组织化学的定义
免疫组织化学（Immunohistochemistry，IHC）是利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学。
免疫组织化学技术原理
1. 免疫荧光细胞化学技术将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察.当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后会发出一定波长的荧光,从而可以确定组织中的抗原定位或定量.2. 免疫酶细胞化学技术是免疫组织化学研究中最常用的技术．基本原理是先以酶标记的抗体与组织或
免疫组织化学法实验——组织切片的免疫荧光标记
实验材料组织样本冰冻切片置于载玻片上试剂、试剂盒PBS第一抗体5〜10μg mL第二抗体特异性针对第一抗体的抗体突光染料结合物封片介质（如Gelvatol)仪器、耗材塑料玻片盒或加湿盒实验步骤1) 将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒。从冰冻切片机或冰箱取出载有切片的载玻片，交叉放入玻片盒（每边约6片
抚生试剂免疫组织化学组织细胞的组织切片
一、载玻片的处理 免疫组化染色时间长，特别是双PAP、免疫金银染色等方法，所需时间更长，并要反复洗涤，切片在试剂中长时间浸泡，经多次洗涤，极易造成脱片而影响实验的结果。需采用以下方法处理：载玻片先置于洗洁液(或洗衣粉溶液)中煮沸30min，清水洗干净后放人清洁液中浸泡12—24h，漂洗，用蒸馏
免疫组织化学常用染色方法
根据标记物的不同分为免疫荧光法，免疫酶标法，亲和组织化学法，后者是以一种物质对某种组织成分具有高度亲合力为基础的检测方法。这种方法敏感性更高，有利于微量抗原（抗体）在细胞或亚细胞水平的定位，其中生物素——抗生物素染色法最常用。
免疫组织化学检查的介绍
免疫组化是最近10多年来迅速发展起来的一门新兴技术。它已被广泛运用肿瘤研究和诊断，其原理是利用抗原与抗体的特异性结合反应来检测组织中的未知抗原或者抗体，主要是肿瘤相关抗原（肿瘤分化抗原和肿瘤胚胎抗原），借以判断肿瘤的来源和分化程度，协助肿瘤的病理诊断和鉴别诊断。目前常用的染色方法有过氧化物酶－抗
免疫组织化学的临床应用
⑴恶性肿瘤的诊断与鉴别诊断；⑵确定转移性恶性肿瘤的原发部位；⑶对某类肿瘤进行进一步的病理分型；⑷软组织肿瘤的治疗一般需根据正确的组织学分类，因其种类多、组织形态相像，有时难以区分其组织来源，应用多种标志进行免疫组化研究对软组织肿瘤的诊断是不可缺少的；⑸发现微小转移灶，有助于临床治疗方案的确定，包括手
免疫荧光组织化学直接法
1.检查抗原法：这是最早的方法，用已知特异性抗体与荧光素结合，制成荧光特异性抗体，直接与细胞或组织中相应抗原结合，在荧光显微镜下即可见抗原存在部位呈现特异性荧光。此法很特异和简便，但一种荧光抗体只能检查一种抗原，敏感性较差。 2.检查抗体法将抗原标记上荧光素，即为荧光抗原，用此荧光抗原与细胞或