半干电转印法
实验概要本方法是先将凝胶紧贴于一块硝酸纤维滤膜，然后再将这种夹层组合直接置于两个乎板电极之间，采用这种半干方法可将蛋白质从凝胶中转印至硝酸纤维素膜上。平板可以是石墨(这种平板较便宜，但使用100次后必须更换)制成的，也可以是铂金的(这种子板价格较贵，但使用寿命较长)。通过电洗脱将蛋白质从凝胶中转印至滤膜上，就像在凝胶中迁移一样，只不过此处蛋白质的移动方向与胶平面垂直。该法转印速度快，均匀，亦不需较大的功率。在最早的文献中，阴极和阳极使用的是不同的缓冲液，但使用稀释的Tris／GlycineSDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳缓冲液系统较为简便。只需在阴极和阳极两边放入若干层预湿的玻璃纤维滤纸即可保持电极、凝胶和滤纸之间的良好接触。主要试剂硝酸纤维素滤膜蒸馏水或去离子水考马斯亮蓝染色液转印缓冲液(0.04％SDS，20％甲醇溶于48mmol／LTRIS，39mol／L甘氨酸)吸水纸(Whtaman 3 MM或替代物)主要设备半干转印装置实验......阅读全文
湿转和干转，哪个方法更好
对于一个完美的westernblot实验，蛋白在聚丙烯凝胶中根据天然分子量进行分离，蛋白被很好的从凝胶上转移到固相支持物上，然后通过特异性的抗体进行免疫检测。 对于转印来说，使用湿转的方法是比较好的，因为凝胶和膜都能够完全浸没在转印buffer中，在半干转的条件下，转印是在两个电极板之间发
转管培养法与转瓶培养
转管培养法（roller tube culture）是Gey 提出的，实验室常用，为了扩大细胞产量，将试管改用转瓶，故称转瓶培养，其培养方法是一样的，试管或转瓶固定在支加上，倾斜度为5°～10°左右，或将转瓶放在一排排转轴之间，使转瓶随着转轴以每小时6～12 转缓慢转动。细胞贴附于玻璃壁
湿转和干转，哪个方法更好？
对于一个完美的westernblot实验，蛋白在聚丙烯凝胶中根据天然分子量进行分离，蛋白被很好的从凝胶上转移到固相支持物上，然后通过特异性的抗体进行免疫检测。对于转印来说，使用湿转的方法是比较好的，因为凝胶和膜都能够完全浸没在转印buffer中，在半干转的条件下，转印是在两个电极板之间发生，这种类型
做western转膜，用湿转电泳，还是半干转电泳好
半干转要用专门的半干转膜仪，而湿转用电泳仪配附件即可；半干转所需时间较短，但控制不好，中间发热比较大容易把膜和胶烘坏；而湿转耗时较长，尤其对大分子量的蛋白转膜效果较好。相对来讲，还是湿法转膜的实验室多一些。
Western－转膜时用干转还是湿转效果比较好？
关键看效果怎么细分，干转，速度快，效率稍低，湿转，速度比较慢，转移效率高。但是最主要看蛋白的分子量大小。如果普通分子量为主，干转就挺好的，效率非常高，几分钟就做完了。分子量特别大，又没有其他人的方案做参考，可以先试试湿转。就是几个小时等得比较痛苦。好几个人做的话，真是等到花儿也谢了。至于说效果，不是
Western－转膜时用干转还是湿转效果比较好
关键看效果怎么细分，干转，速度快，效率稍低，湿转，速度比较慢，转移效率高。但是最主要看蛋白的分子量大小。如果普通分子量为主，干转就挺好的，效率非常高，几分钟就做完了。分子量特别大，又没有其他人的方案做参考，可以先试试湿转。就是几个小时等得比较痛苦。好几个人做的话，真是等到花儿也谢了。至于说效果，不是
印三酮的化学特性
茚三酮是一种用于检测氨或者一级胺和二级胺的试剂。该试剂近似为白色结晶，或浅黄色结晶粉末，微溶于乙醚及三氯甲烷，100℃以上变为红色。用于鉴定氨基酸，反应十分灵敏，是鉴定氨基酸的最简便方法。 茚三酮是一种用于检测氨或者一级胺和二级胺的试剂。当与这些游离胺反应时，能够产生深蓝色或者紫色的物质，叫做
免疫印迹与免疫检测
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 转移缓冲液仪器、耗材 摇床海绵纤维素膜尼龙膜电转仪实验步骤 1. 制备抗原样品，并用小型或标准尺寸的单向或双向凝胶分离蛋白，在一个或多个泳道中分离预染色或生物素酰化的蛋白质分子量标准。2. 电泳完成后，拆卸凝胶夹层，去除积层胶。以适量的转移缓冲液室温平衡凝胶30 m
高灵敏度化学发光技术应用心得
一．概述 化学发光 (ChemiLuminescence ，简称为 CL) 分析法是分子发光光谱分析法中的一类，它主要是依据化学检测体系中待测物浓度与体系的化学发光强度在一定条件下呈线性定量关系的原理，利用仪器对体系化学发光强度的检测，而确定待测物含量的一种痕量分析方法。化学发光与其它发光
蛋白质免疫印迹实验
蛋白质免疫印迹实验 实验步骤 操作流程 (1)制备与凝胶大小一致的硝酸纤维素膜一张，吸水滤纸 2 张
蛋白质免疫印迹实验
实验步骤 操作流程(1)制备与凝胶大小一致的硝酸纤维素膜一张，吸水滤纸 2 张 (Whatman 3 MM)。(2) 将凝胶在转印缓冲液中浸泡 30m in，将转移膜、滤纸和海绵垫也在同样的缓冲液浸湿。(3) 安装转印「夹心三明治」。将凝胶放置在玻璃平板上，然后将一张浸湿的滤纸放在凝胶上，如
wb封闭液用水溶解对结果影响
WB实验的注意事项一、蛋白样品的制备按组织净重(g)：裂解液体积(ml)=1：10的比例加入相应体积的裂解液(加入终浓度为1mM的PMSF、适当浓度的蛋白酶抑制剂和磷酸化酶抑制剂，以避免内源性酶分解蛋白，影响蛋白质的抽提)进行匀浆。蛋白质的样品制备是westemblotting的第一步，也是关键步骤
垂直电泳系统的操作方式是怎样的？
垂直电泳系统由电泳槽和三个功能模块组成，每个模块都自带电极，电泳槽一体成型设计。系统采用专用底座配合带胶条玻璃配合制胶，简单方便，有效防止漏胶。转印时，操作类似于“三明治”的操作方式，一小时内即可完成转印。毛细管电泳模块带有密封圈，方便毛细管的插入和取出，至多可容纳10个毛细管。 垂直电泳
蛋白质免疫印迹实验
这是一个建立在 B urnette 实验方案基础上的实验流程，小于 80k D a 的蛋白质的转移效果很好并且结果稳定, 重复性好。应用这种膜转移方法，我们利用多克隆抗体在下面的样本中检测目的蛋白：哺乳动物细胞和细菌溶解产物、细胞培养上清、组织提取物以及组织液。虽然下列实验条件是根据我们自己的实验需
电泳、转膜
转膜是把DNA从琼脂糖凝胶中转移到固相支持物（一般是尼龙膜）上固定，是进行各种后续研究（如RFLP分析，阳性克隆的筛选验证等所有涉及分子杂交的研究）的前提。实验目的：掌握Southern blotting的原理及操作步骤。实验原理：1. 转膜的方式： 向上的毛细管转移 向下的毛细管转移 同时向
常见的高压电泳仪/电泳仪
产品名称： JY-ECP3000型高压电泳仪 输出类型： 恒压/恒流/恒功率输出 输出范围： 20~3000V / 1~200mA/1~200W 分辨率： 电压1V, 电流1mA,电功率1W 定时范围： 1分钟～99小时59分钟 显示： 带背光的LCD液晶屏(128×64 像素
如何诊断膀胱印戒细胞癌？
根据膀胱印戒细胞癌的临床表现及检查诊断一般无困难，但早期膀胱印戒细胞癌的诊断并不容易，要注意病史的特点与有关的辅助检查相结合综合判断，争取早期诊断。 原发性膀胱印戒细胞癌的诊断标准： ①肿瘤多发生在膀胱的侧壁和底部； ②常伴有腺性或囊性膀胱炎； ③癌与正常膀胱上皮间有移行病变； ④无其
印俄加强能源与安全合作
俄罗斯总统普京12月10日抵达印度首都新德里，11日与印度总理莫迪举行了第十五届印俄首脑会晤。这是莫迪就任印度总理以来两人举行的第三次会晤。此前，普京与莫迪曾先后在今年的金砖国家峰会和二十国集团峰会上两次会晤。 为了向普京释放善意，莫迪特地在自己的社交账户上用俄语推送欢迎词。莫迪说，两国曾
环境宣教如何踏石留印？
在日前召开的《全国环境宣传教育行动纲要(2011~2015年)》部际联席会暨全国生态文明宣传教育工作绩效评估试点工作会议上，作为试点省的山东省从能力建设、宣教效果、特色创新等方面对生态文明宣传教育工作进行了展示，受到了来自环境保护部、中宣部、中央文明办、教育部、共青团中央、全国妇联 6部委的
借助电转方法将Cas9蛋白质/sgRNA导入小鼠原核受精卵生...
借助电转方法将Cas9蛋白质/sgRNA导入小鼠原核受精卵生成非嵌合体突变体胚胎基因编辑解析：借助电转方法将Cas9蛋白质/sgRNA导入小鼠原核受精卵生成非嵌合体突变体基因编辑技术指能够让人类对目标基因进行“编辑”，实现对特定DNA片段的敲除、加入等。而CRISPR/Cas9技术自问世以来，就有着
经典的western方法
Western转膜步骤 下面的步骤适用于通过Xcell Ⅱ转印系统进行蛋白印记的大部分应用。为达到最佳效果，用户的优化是必要的。 I. 所需材料： • Xcell SureLock™或Xcell Ⅱ™ Mini-Cell以及Blot Module（Cat. Nos. EI10001, EI9001及
western－blot－试验中蛋白转膜总转不上去
当然，首先要考虑的问题是你转过头了，蛋白质跑出去了。其次你的电流有点大，你也没说转了多久？用的干转还是湿转？是不是拿出来的时候很热？这种情况有可能使蛋白质降解。我们一般是湿转用100mA转2小时， 干转所需电流更小。
Western转膜步骤
下面的步骤适用于通过Xcell Ⅱ转印系统进行蛋白印记的大部分应用。为达到最佳效果，用户的优化是必要的。I. 所需材料：•Xcell SureLock™或Xcell Ⅱ™ Mini-Cell以及Blot Module（Cat. Nos. EI10001, EI9001及EI9051）•电泳后的迷你胶
海藻酸钠在印纺工业的应用
海藻酸钠在印染工业中用作活性染料色浆，优于粮食淀粉和其它浆料。印出的纺织品花纹鲜艳，线条清晰，给色量高，得色均匀，渗透性与可塑性均良好。海藻胶是现代印染业的最佳浆料，现已广泛应用于棉、毛、丝、尼龙等各种织品的印花，特别适用于配制拨染印花浆。 中国纺织部门以海藻胶与淀粉混合或代替淀粉配制经纱浆料
宋延林：“印”出绿色新世界
“如果说我们是浪漫主义者，是不可救药的理想主义分子，我们想的都是不可能的事情。那么，我们将一千零一次地回答，是的，我们就是这样的人。”中国科学院化学研究所（以下简称化学所）研究员宋延林热爱文学，特别喜欢切·格瓦拉这句话。在科学家的角色里，宋延林一直坚持的浪漫主义和理想主义就是把“不可能的事情”变成现
简述膀胱印戒细胞癌的预防
膀胱癌的预防有5个方面： ①针对病因采取预防措施，如已经肯定在外来致癌因素中，染料、橡胶、皮革等工种能引起膀胱癌的发生，吸烟和服用某些药物，膀胱癌的发病率明显增高，这就要求改善染料、橡胶、皮革等工业的生产条件，提倡禁止吸烟，避免大量、长期服用可致膀胱癌的药物。 ②高度重视血尿患者的密切随访，
“养猪院士”印遇龙的四十年
一双球鞋，一身运动服，一辆自行车，这是印遇龙每个上班日的标配；走起路来健步如飞，说话大嗓门；喜欢游泳、打乒乓球、跑步，智能手机玩得娴熟。已过花甲之年的印遇龙，生活中充满了朝气与活力。 与生活中的随意不同，科研中的印遇龙又是个十分严谨的人。他的科研哲学很简单：深入第一线，在生产中发现问题、解决问
光子嫩肤怎么会留下痘印
蓝宝石是激光的一种，波长不同而已。长痘痘的原因有很多，主要和内分泌有关，建议你先找准你长痘痘的原因，然后对症下药。而光子只是改善毛孔粗大，对长出来的痘痘没什么效果。
印遇龙院士：“养猪”自有大学问
在长沙市马坡岭，从一条小路进去，拐弯处有一个院子——中国科学院亚热带农业生态研究所。 当院子里只有3栋员工宿舍时，第一批来所里的湖南桃源小伙子印遇龙在宿舍后面建起了一栋猪舍。 “要研究猪，必须自己养一头猪。”几乎没有人料到，这一“养”就是30多年，“养”出了一个国际知名的畜禽健康养殖中心，“
印日盯上东非天然气资源
印度《经济时报》10月26日报道称，国有公司印度石油(Oil India)正在同东非国家莫桑比克谈判，希望参与莫境内Rovuma-1超大海上气田的开发，获得该项目的部分权益。据透露，莫桑比克正在修改能源政策，根据新政策，参与该国油气资源开发的外国公司将有权利把属于自己的权益油气运回母国。