GSTpulldown操作流程

实验目的:体外检测蛋白质与蛋白质之间相互作用。用于验证两个已知蛋白的相互作用,或者筛选与已知蛋白相互作用的未知蛋白。实验原理:利用重组技术将探针蛋白与GST(Glutathione S transferase)融合,融合蛋白通过GST与固相化在载体上的GTH(Glutathione)亲和结合。因此,当与融合蛋白有相互作用的蛋白通过层析柱时或与此固相复合物混合时就可被吸附而分离。试剂:NaCl, KCl,Na2HPO4,KH2PO4,Triton-100,IPTG(Merck分装),PMSF(Amersco),Cocktaier(Merck 539134),Immobilized Glutathione(PIERCE 15160)实验操作程序:材料及试剂探针蛋白与GST融合的原核蛋白,裂解的细胞蛋白,或者组织蛋白提取物细胞蛋白裂解液,洗脱液:PBS及PBS+1%Triton-100PBS (1L)NaCl: ......阅读全文

GSTpulldown操作流程

实验目的:体外检测蛋白质与蛋白质之间相互作用。用于验证两个已知蛋白的相互作用,或者筛选与已知蛋白相互作用的未知蛋白。实验原理:利用重组技术将探针蛋白与GST(Glutathione S transferase)融合,融合蛋白通过GST与固相化在载体上的GTH(Glutathione)亲和结合。因此,

GSTpulldown操作流程

实验目的:体外检测蛋白质与蛋白质之间相互作用。用于验证两个已知蛋白的相互作用,或者筛选与已知蛋白相互作用的未知蛋白。实验原理:利用重组技术将探针蛋白与GST(Glutathione S transferase)融合,融合蛋白通过GST与固相化在载体上的GTH(Glutathione)亲和结合。因此,

GSTpulldown操作流程

实验目的:体外检测蛋白质与蛋白质之间相互作用。用于验证两个已知蛋白的相互作用,或者筛选与已知蛋白相互作用的未知蛋白。 实验原理:利用重组技术将探针蛋白与GST(Glutathione S transferase)融合,融合蛋白通过GST与固相化在载体上的GTH(Glutathione)亲和结合。

GSTpulldown操作流程

实验材料 探针蛋白原核蛋白细胞蛋白组织蛋白提取物试剂、试剂盒 NaClKClNa2HPO4KH2PO4Triton-100IPTGPMSF(苯甲基磺酰氟)CocktaierImmobilized Glutathione无水乙醇仪器、耗材 定容瓶锥形瓶高速离心机低温冰箱超声仪EP管层析柜

GSTpulldown操作流程

  实验目的:体外检测蛋白质与蛋白质之间相互作用。用于验证两个已知蛋白的相互作用,或者筛选与已知蛋白相互作用的未知蛋白。   实验原理:利用重组技术将探针蛋白与GST(Glutathione S transferase)融合,融合蛋白通过GST与固相化在载体上的GTH(Glutathione)

GSTpulldown操作流程

实验概要体外检测蛋白质与蛋白质之间相互作用。用于验证两个已知蛋白的相互作用,或者筛选与已知蛋白相互作用的未知蛋白。实验原理利用重组技术将探针蛋白与GST(Glutathione S transferase)融合,融合蛋白通过GST与固相化在载体上的GTH(Glutathione)亲和结合。因此,当与

GSTpulldown操作流程

利用重组技术将探针蛋白与GST(Glutathione S transferase)融合,融合蛋白通过GST与固相化在载体上的GTH(Glutathione)亲和结合,已广泛应用于分子生物学(1)证实两种蛋白可能有相互作用(2)寻找能与已知蛋白发生相互作用的未知蛋白。实验方法原理利用重组技术将探针蛋

移液器的操作流程

移液器的使用方法:1调节量程在调节量程时,如果要从大体积调为小体积,则按照正常的调节方法,逆时针旋转旋钮即可;但如果要从小体积调为大体积时,则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度,再回调至设定体积,这样可以保证量取的最高精确度。在该过程中,千万不要将按钮旋出量程,否则会卡住内部机械装置而损坏了移液

移液器的操作流程

1调节量程在调节量程时,如果要从大体积调为小体积,则按照正常的调节方法,逆时针旋转旋钮即可;但如果要从小体积调为大体积时,则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度,再回调至设定体积,这样可以保证量取的高确度。在该过程中,千万不要将按钮旋出量程,否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。 2装配枪头(吸液

临床输血操作流程

1 一般病人用血 (1)当班护士协助医师向病人解释,做好输血前的“九项”①检查工作;(2)将血交叉申请单与贴好标签的试管携至病人床边核对“4项”②内容后,采血标本5~6ml;(3)将“4单”③及血标本一起送到血库与血库人员核对、双签名;(4)交叉配血完成后,由当班护士与血库人员共同核对“九项”、双签

熔点仪操作流程

熔点仪操作流程1、装样1、将样品置于瓷研钵内,轻轻研碎成尽可能细密的粉末,以得到均一的样品。2、取一支或数支清洁、干燥的熔点管,将其开口端插入样品中,装入样品。3、取一长约0.8米的干燥玻璃管,直立于玻璃板上,将装有试样的熔点管在其中投落至少20次,使熔点管内样品紧缩至3-4mm高。如果同时测两个样

ELISpot实验操作流程

ELISPOT全名为酶联免疫斑点检测,英文:Enzyme-linked Immunospot Assay。它结合了细胞培养技术与酶联免疫吸附技术(即ELISA技术),能够在单细胞水平检测细胞因子的分泌情况。其技术原理,一句话概括就是:用抗体捕获培养中的细胞分泌的细胞因子,并以酶联斑点显色的方式将其表

细胞复苏操作流程

细胞复苏操作流程:1、将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。2、将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻

真空烘箱操作流程

  1、将物料均匀放入真空干燥箱内样品架上,推入干燥箱内;  2、关紧箱门,放气阀,箱门上有螺栓,可使箱门与硅胶密封条紧密结合;  3、将真空泵与真空阀连接,开启真空阀,抽真空;  4、依据真空泵的性能,抽到压力表为真空泵的极限值为准;  5、抽完真空后,先将真空阀门关闭,如果真空阀门关不紧,请更换

离子色谱操作流程

一、配制新鲜的淋洗液 按照色谱柱配制与之相适宜浓度的淋洗液,配制淋洗液的去离子水要经过脱气处理, 如果气泡进入泵内会影响泵的稳定,基线打折,如果气泡进入检测器会影响样品的测定。二、开机顺序 先开主机后开泵,然后打开工作站,点控制面板连接。三、启动泵 首先确保滤头到泵之间的输液管充满淋洗液不能有气体,

实验电炉操作流程

1. 本仪器额定功率为12千瓦,高可控温度为1000度,升温速率必须小于120度/分钟(否则功率过大,影响仪器正常使用)。  2. 箱式电阻炉配套使用的电炉温度控制器可直接调控箱式电阻炉的电源开关、温度控制等测量参数。打开绿色电源开关【ON】,开关变绿,仪器右边的仪表盘上的【指示】灯亮,通过左右拨动

生物安全柜操作操作流程

操作流程:生物安全柜玻璃门为手动操作,正常工作时玻璃门的开启高度200mm,如果超出表示高度时,声光报警系统启动,提醒用户玻璃门超高。注:当玻璃门开启时,紫外灯无法开启。生物安全柜电源为220V、50Hz,柜体后部方有接地标志,必须做到可靠接地后方可使用。接通电源后,通电进入待命状态。(1)按下[紫

为什么要做gstpulldown实验

因为此方法简单易行,操作方便。GST pull-down实验是一个行之有效的验证酵母双杂交系统的体外试验技术,近年来越来越受到广大学者的青睐。其基本原理是将靶蛋白-GST(Glutathione-S-transferase谷胱苷肽巯基转移酶)融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上,作为与目的蛋白亲和的

电子分析天平操作流程及程序流程

  1.手柄在启动和关闭时,务必缓慢均匀地旋转和关闭。过快会导致刀刃紧急接触和受损。同时,由于过度晃动,会导致测量误差。  2.称重时,应适当估计添加砝码,随后启动电子分析天平,按指针偏移方向增加砝码。投影屏幕上的读数应静止到10毫克以内。  3.在每次称量时,都应将电子分析天平关闭,不能在电子分析

模温机额的操作流程

  一、启动前的检查  1、周围是否清洁无杂物,检查电源、加热器、控制器、压力表、泵浦等是否正常.  2、检查膨胀油箱油位是否在1/2-3/5 液位以上位置,液位感应器等是否正常.  3、接通控制柜电源,检查电压是否正常,检查指示灯及各显示仪表是否正常.  二、启动  1、启动导热油循环泵,启泵后正

反向PCR的操作流程

扩增前先用限制性内切酶酶切样品DNA,然后用DNA连接酶连接成一个环状分子,通过反向PCR扩增引物的上游片段和下游片段。

暗室实验的操作流程

1.新鲜配制1-2ml工作液(A液与B液1:1或1:40混合配制)2. 进入暗室,在黑暗的条件下,加入1μl未稀释的二抗(HRP连接物)3. 混合后,可立即在暗室中观察到蓝色光

移液器的操作使用流程

移液器的使用选择量程合适的移液器:移液器只能在特定量程范围内准确移取液体,如超出zui低或zui大量程,会损坏移液器并导致计量不准;设定容量值 粗调:通过调节旋钮将容量值迅速调整至接近自己的预想值;细调,当容量值接近设定值以后,应将移液器刻度显示窗平行放至自己的眼前,通过调节旋钮慢慢地将容量值调至预

烘箱的使用操作流程

烘箱外壳通常选用薄钢板制作,外表烤漆,工作室选用优异的构造钢板制作。外壳与工作室之间填充硅酸铝纤维。加热器装置底部,也可安顿顶部或两边。温度操控仪表选用数显智能表,PID调节:装备999.99小时时刻操控器并与报警装置相连接。使烘箱的操作更简洁,方便与有效。烘箱的使用操作流程:1. 使用前必需留心所

洗板机的操作流程

  1.打开电源,启动洗板机,待自动停止后,视屏显示[Run]:A,-+,洗板机启动运行Other yes.  2.按Other键,视屏出现Prime:Ch1即第一通道(蒸馏水清洗通道),通过-+键可调节Ch1和Ch2(洗涤液通道),CH1按yes键洗板机自动用蒸馏水清洗洗涤通道。Ch2,按yes键

箱式实验电炉操作流程

1. 本仪器额定功率为12千瓦,高可控温度为1000度,升温速率必须小于120度/分钟(否则功率过大,影响仪器正常使用)。  2. 箱式电阻炉配套使用的电炉温度控制器可直接调控箱式电阻炉的电源开关、温度控制等测量参数。打开绿色电源开关【ON】,开关变绿,仪器右边的仪表盘上的【指示】灯亮,通过左右拨动

干燥烘箱的操作流程

安全标准作业程序设备名称:烘箱作业方式:个人作业处理物品:玻璃容器使用器具:无防护器具:护目镜、绝缘手套、实验衣工作步骤:1.工作前:(1)检查电气是否異常(2)将玻璃容器放置烘乾箱内(3)开启电源开关并调整适当温度与加热时间。2.工作中:(1)专心操作并配戴防护器具。(2)操作人员严禁離开加工区。

WesternBlot操作流程

试剂配制(一)母液1.0mol/L Tris·HCl Tris (MW121.14) 30.29g蒸馏水 200ml溶解后,用浓盐酸调pH至所需点(见下所示),最后用蒸馏水定容至250ml,高温灭菌后室温下保存。 PH HCl7.4 约17ml7.5 约16m7.6 约15ml8.0 约10ml1.

快速消解的操作流程

  1.打开消解器,预热到165℃。温度和程序设置与选择参见仪器程序更新。   2. 拧开两支COD快速消解预制管试剂的盖子。  确认使用的是合适量程的试剂。   3. 样品准备: 将一支预制管试剂拿住并保持在45°,用移液管或移液枪移取2.00 mL水样到预制管中。   4. 空白样准备: 将另一

药敏试验的操作流程

(1)培养基的厚度对抑菌圈的大小有影响,故平皿中加入培养基要固定,以4mm深度为宜。制备的平板使用时应放于35℃温箱中30min去除过多的水分,以免影响抗菌药物的扩散。(2)接种细菌后应在室温放置片刻,待菌液被培养基吸收后,再贴纸片;但不宜放置太久,否则在贴纸片前细菌已开始生长可使抑菌圈缩小。(3)