Omega质粒DNA中量提取流程

实验概要Omega质粒DNA中量提取试剂盒中文说明书(E.Z.N.A. EndoFree Plasmid Midi Kit I)。主要试剂1. 使用前,将RNase A全部加入Solution I中并于4度保存。2. 按下表用无水乙醇稀释DNA Wash Buffer,并于室温保存。 D6915-00B: 加入16ml无水乙醇 D6915-01B: 加入80ml无水乙醇 D6815-03B: 加入200ml无水乙醇 D6815-04B: 每瓶中加入200ml无水乙醇实验步骤1. 取20- 50ml 菌液3,500-5,000 x g室温离心10min收集菌体沉淀;2. 小心去除上清液,加2.5 ml Solution Ⅰ/ RNase,涡旋或用移液枪上下吹打重悬菌体。3. 加2.5 ml......阅读全文

Omega质粒DNA中量提取流程

实验概要Omega质粒DNA中量提取试剂盒说明书(E.Z.N.A. EndoFree Plasmid Midi Kit)。主要试剂1. 使用前,将RNase A全部加入Solution I中并于4度保存。2. 按下表用无水乙醇稀释DNA Wash Buffer,并于室温保存。    D6915-01

Omega质粒DNA中量提取流程

实验概要Omega质粒DNA中量提取试剂盒中文说明书(E.Z.N.A. EndoFree Plasmid Midi Kit I)。主要试剂1. 使用前,将RNase A全部加入Solution I中并于4度保存。2. 按下表用无水乙醇稀释DNA Wash Buffer,并于室温保存。    D691

Omega质粒小量提取流程

实验试剂1. 使用前,将RNase A全部加入Solution I中并于4度保存。2. 按下表用无水乙醇稀释DNA Wash Buffer,并于室温保存。    D6948-00B: 加入8ml无水乙醇    D6948-01B: 加入80ml无水乙醇    D6848-02B: 加入80ml无水乙

Omega质粒小量提取流程

实验概要Omega质粒小量提取试剂盒中文说明书(E.Z.N.A. EndoFree Plasmid Mini Kit I)。主要试剂1. 使用前,将RNase A全部加入Solution I中并于4度保存。2. 按下表用无水乙醇稀释DNA Wash Buffer,并于室温保存。    D6948-0

Omega质粒大量提取流程

实验概要Omega质粒大量提取试剂盒中文说明书(E.Z.N.A. EndoFree Plasmid Maxi Kit I)。主要试剂1. 使用前,将RNase A全部加入Solution I中并于4度保存。2. 按下表用无水乙醇稀释DNA Wash Buffer,并于室温保存。    D6926-0

Omega质粒小量提取流程

实验试剂1. 使用前,将RNase A全部加入Solution I中并于4度保存。2. 按下表用无水乙醇稀释DNA Wash Buffer,并于室温保存。    D6948-00B: 加入8ml无水乙醇    D6948-01B: 加入80ml无水乙醇    D6848-02B: 加入80ml无水乙

中量提取质粒DNA(CsCl-密度梯度离心法)

中量提取质粒DNA(CsCl 密度梯度离心法) 2010‐07‐07李渊越1. 将菌液倒入装有 50mL TB 的锥形瓶中,或从培养好的平板上挑取单克隆,锥形瓶置于37℃摇床350rpm 培养16-20h,至OD600 到10-12。(OD600 到40 为用TBS 培养基在我们的培养条件下所能达到

Omega真菌RNA提取流程

实验概要Omega真菌RNA提取试剂盒中文说明书(E.Z.N.A. Fungal RNA Kit)。主要试剂1. 取适量RB裂解液,按1ml裂解液加入20ul 2-疏基乙醇。该混合液可于室温放置一周。2. 用DEPC水配置一小瓶70%乙醇。3. 按下表用无水乙醇稀释RNA Wash Buffer I

质粒DNA提取实验

碱解法SDS碱裂解法(试剂盒提取)实验方法原理碱裂解法是基于DNA的变性与复性差异而达到分离目的的。碱性使质粒DNA变性,再将pH值调至中性使其复性,复性的为质粒DNA,而染色体DNA不会复性,缠结成网状物质,通过离心除去。实验材料大肠杆菌                              

质粒DNA提取技术

实验概要通过本实验,学习和掌握碱裂解法提取质粒的方法和技术。实验原理质粒是基因工程中常用的载体之一。质粒是染色体外小型双链环状的DNA,大小在1~200kb之间。碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们的。在pH值介于12.0~12.5这个狭窄的范围内,线

质粒DNA提取实验

            实验方法原理 碱裂解法是基于DNA的变性与复性差异而达到分离目的的。碱性使质粒DNA变性,再将pH值调至中性使其复性,复性的为质粒DNA,而染色体DNA不会复性,缠结成网状物质,通过离心除去。

质粒DNA提取实验

实验方法原理 质粒多为一些双链、环状的DNA分子,是独立于细菌染色体之外进行复制和遗传的辅助性遗传单位。质粒是进行分子生物学实验操作,进行遗传工程改良物种等工作时最主要的DNA载体。 提取质粒的基本步骤分为三步:①细菌的培养和质粒的扩增②细菌菌体的裂解③质粒DNA的纯化实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒

质粒DNA的提取

实验概要        通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒。实验原理         碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们。在pH值介于12.0~12.5这个狭窄的范围内,线性的DNA双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒DNA

SDS碱裂解法制备质粒DNA——中量制备

实验方法原理用碱和 SDS 处理可以从中度规模(20~50 ml)的细菌培养物中分离质粒 DNA,所获得的 DNA 产物可用于电泳分析或限制性内切核酸酶消化,经柱层析进一步纯化之后,还可用于转染哺乳动物细胞。试剂、试剂盒碱裂解液抗生素乙酵酚氯仿STETE仪器、耗材LB、YT 或 Terrific 培

质粒DNA提取实验步骤

质粒DNA提取可以:(1)快速纯化质粒;(2)用于测序、体外转录与翻译、限制性内切酶消化、细菌转化等分子生物学实验。实验方法原理质粒多为一些双链、环状的DNA分子,是独立于细菌染色体之外进行复制和遗传的辅助性遗传单位。质粒是进行分子生物学实验操作,进行遗传工程改良物种等工作时最主要的DNA载体。  

BIOG游离DNA提取试剂盒说明(中量)

运输条件:常温运输               货 号:51019-M: 10次反应             51020-M: 20次反应                            储存条件:室温(15-25℃),消化液、DNA Carrier请于-20℃存放产品特点          

质粒DNA提取时质粒为何会丢失

中稳定存在,经多次转接后有可能造成质粒丢失。因此不要频繁转接,每次接种时应接种单菌落。另外,检查筛选 用

碱裂解法提取质粒DNA

实验目的1、掌握最常用的提取质粒DNA的方法和检测方法;2、了解制备原理及各种试剂的作用。实验原理碱裂解法是基于DNA的变性与复性差异而达到分离目的的。碱性使质粒DNA变性,再将pH值调至中性使其复性,复性的为质粒DNA,而染色体DNA不会复性,缠结成网状物质,通过离心除去。细菌质粒是一类双链、闭环

碱裂解法提取质粒DNA

实验概要本实验介绍了碱裂解法提取质粒DNA的实验原理和操作步骤。实验原理碱裂解法是一种应用最为广泛的制备质粒DNA的方法,碱变性抽提质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH值高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大

碱裂解法提取质粒DNA

实验目的      1、掌握最常用的提取质粒DNA的方法和检测方法;       2、了解制备原理及各种试剂的作用。      实验原理 碱裂解法是基于DNA的变性与复性差异而达到分离目的的。碱性使质粒DNA变性,再将pH值调至中性使其复性,复性的为质粒DNA,而染色体DNA不会复性,缠结成网状物

质粒DNA的提取与纯化

一、实验目的与原理质粒多为一些双链、环状的DNA分子,是独立于细菌染色体之外进行复制和遗传的辅助性遗传单位。质粒是进行分子生物学实验操作,进行遗传工程改良物种等工作时最主要的DNA载体。提取质粒的基本步骤分为三步:①细菌的培养和质粒的扩增,②细菌菌体的裂解,③质粒DNA的纯化。本实验采取的菌体裂解方

质粒DNA的小量快速提取

实验概要本实验介绍了质粒DNA小量快速提取的基本原理及操作步骤。实验原理在碱性条件下,染色体DNA和质粒DNA都发生变性,但质粒DNA的超螺旋共价闭合环状结构的两条互补链不会完全分离,当用酸性的高盐缓冲液将pH中和至中性时,变性的质粒DNA又恢复到原来的构型并溶解在溶液中,而染色体DNA不能复性而形

质粒DNA的提取与鉴定

本实验采取碱裂解法的方法来提取质粒 ,之后经琼脂糖凝胶电泳来检测DNA。质粒DNA 的提取与鉴定(一)碱裂解法提取质粒[实验原理]碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们。在pH值介于12.0~12.5这个狭窄的范围内,线性的DNA双螺旋结构解开而被变

质粒DNA的提取与纯化

一、实验目的与原理 质粒多为一些双链、环状的DNA分子,是独立于细菌染色体之外进行复制和遗传的辅助性遗传单位。质粒是进行分子生物学实验操作,进行遗传工程改良物种等工作时最主要的DNA载体。 提取质粒的基本步骤分为三步: ①细菌的培养和质粒的扩增 ②细菌菌体的裂解 ③质粒DNA的纯化 本实验采取的菌体

Omega胶回收流程

实验概要Omega胶回收试剂盒中文说明书(E.Z.N.A. Gel Extraction Kit)。主要试剂1. 调节水浴的温度为55-65°C。2. 按下表用无水乙醇稀释SPW Wash Buffer,并于室温保存。    D2500-00,D2501-00: 加入20ml无水乙醇    D250

质粒DNA的提取与电泳鉴定

质粒DNA的提取是从事基因工程工作中的一项基本实验技术,但提取方法有很多种,以下介绍一种最常用的方法: 碱裂解法:此方法适用于小量质粒DNA的提取,提取的质粒DNA可直接用于酶切、PCR扩增、银染序列分析。方法如下: 1、接1%含质粒的大肠杆菌细胞于2ml LB培养基。 2、37℃振荡培养过夜。 3

质粒DNA的提取与电泳鉴定

质粒DNA的提取是从事基因工程工作中的一项基本实验技术,但提取方法有很多种,以下介绍一种最常用的方法:碱裂解法:此方法适用于小量质粒DNA的提取,提取的质粒DNA可直接用于酶切、PCR扩增、银染序列分析。方法如下:1、接1%含质粒的大肠杆菌细胞于2mlLB培养基。2、37℃振荡培养过夜。3、取1.5

SDS裂解法提取质粒DNA实验

实验方法原理 这种温和的方法(改进自 Godson and Vapnek 1973 ) 在处理大质粒(>15 kb ) 时较碱裂解法和煮沸法好。但温和的代价是产量低:有相当数量的质粒 DNA 混于细胞渣滓中,在操作的早期步骤中丢失。试剂、试剂盒 抗生素氯霉素氯仿EDTA乙醇NaClSDSSTETri

SDS裂解法提取质粒DNA实验

这种温和的方法(改进自 Godson and Vapnek 1973 ) 在处理大质粒(>15 kb ) 时较碱裂解法和煮沸法好。但温和的代价是产量低:有相当数量的质粒 DNA 混于细胞渣滓中,在操作的早期步骤中丢失。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理这种温和的方法(改进自

SDS裂解法提取质粒DNA实验

            实验方法原理 这种温和的方法(改进自 Godson and Vapnek 1973 ) 在处理大质粒(>15 kb ) 时较碱裂解法和煮沸法好。但温和的代价是产量低:有相当数量的质粒 DNA 混于细胞渣滓中,在操作的早期步骤中丢失。