Omega质粒大量提取流程
实验概要Omega质粒大量提取试剂盒中文说明书(E.Z.N.A. EndoFree Plasmid Maxi Kit I)。主要试剂1. 使用前，将RNase A全部加入Solution I中并于4度保存。2. 按下表用无水乙醇稀释DNA Wash Buffer，并于室温保存。 D6926-00B: 加入60ml无水乙醇 D6926-01B: 加入160ml无水乙醇 D6926-03B: 加入200ml无水乙醇 D6926-04B: 每瓶中加入200ml无水乙醇实验步骤1. 取100- 200ml 菌液3,500-5,000 x g室温离心10min收集菌体沉淀；2. 小心去除上清液，加10 ml Solution Ⅰ/ RNase A，涡旋或用移液枪上下吹打重悬菌体；3. 加10 ml......阅读全文
Omega质粒大量提取流程
实验概要Omega质粒大量提取试剂盒中文说明书(E.Z.N.A. EndoFree Plasmid Maxi Kit I)。主要试剂1. 使用前，将RNase A全部加入Solution I中并于4度保存。2. 按下表用无水乙醇稀释DNA Wash Buffer，并于室温保存。 D6926-0
Omega质粒小量提取流程
实验试剂1. 使用前，将RNase A全部加入Solution I中并于4度保存。2. 按下表用无水乙醇稀释DNA Wash Buffer，并于室温保存。 D6948-00B: 加入8ml无水乙醇 D6948-01B: 加入80ml无水乙醇 D6848-02B: 加入80ml无水乙
Omega质粒小量提取流程
实验试剂1. 使用前，将RNase A全部加入Solution I中并于4度保存。2. 按下表用无水乙醇稀释DNA Wash Buffer，并于室温保存。 D6948-00B: 加入8ml无水乙醇 D6948-01B: 加入80ml无水乙醇 D6848-02B: 加入80ml无水乙
Omega质粒小量提取流程
实验概要Omega质粒小量提取试剂盒中文说明书(E.Z.N.A. EndoFree Plasmid Mini Kit I)。主要试剂1. 使用前，将RNase A全部加入Solution I中并于4度保存。2. 按下表用无水乙醇稀释DNA Wash Buffer，并于室温保存。 D6948-0
Omega质粒DNA中量提取流程
实验概要Omega质粒DNA中量提取试剂盒中文说明书(E.Z.N.A. EndoFree Plasmid Midi Kit I)。主要试剂1. 使用前，将RNase A全部加入Solution I中并于4度保存。2. 按下表用无水乙醇稀释DNA Wash Buffer，并于室温保存。 D691
Omega质粒DNA中量提取流程
实验概要Omega质粒DNA中量提取试剂盒说明书(E.Z.N.A. EndoFree Plasmid Midi Kit)。主要试剂1. 使用前，将RNase A全部加入Solution I中并于4度保存。2. 按下表用无水乙醇稀释DNA Wash Buffer，并于室温保存。 D6915-01
Omega真菌RNA提取流程
实验概要Omega真菌RNA提取试剂盒中文说明书(E.Z.N.A. Fungal RNA Kit)。主要试剂1. 取适量RB裂解液，按1ml裂解液加入20ul 2-疏基乙醇。该混合液可于室温放置一周。2. 用DEPC水配置一小瓶70%乙醇。3. 按下表用无水乙醇稀释RNA Wash Buffer I
质粒DNA的大量提取和纯化实验
碱法 实验材料 细菌 试剂、试剂盒 ST
质粒DNA的大量提取和纯化实验
实验材料 细菌试剂、试剂盒 STE酚 氯仿NaClPEG乙醇仪器、耗材 离心管离心机抽干机实验步骤 1、取培养至对数生长后期的含pBS质粒的细菌培养液250 ml，4 ℃下5000 g离心15分钟,弃上清,将离心管倒置使上清液全部流尽。2、将细菌沉淀重新悬浮于50 ml用冰预冷的STE中（此步可省略
Omega胶回收流程
实验概要Omega胶回收试剂盒中文说明书(E.Z.N.A. Gel Extraction Kit)。主要试剂1. 调节水浴的温度为55-65°C。2. 按下表用无水乙醇稀释SPW Wash Buffer，并于室温保存。 D2500-00，D2501-00: 加入20ml无水乙醇 D250
质粒DNA的大量提取和纯化实验——碱法
在制作酶谱、测定序列、制备探针等实验中需要高纯度、高浓度的质粒DNA,为此需要大量提取质粒DNA。大量提取的质粒DNA一般需进一步纯化,常用柱层析法和氯化绝梯度离心法。实验材料细菌试剂、试剂盒STE酚 氯仿NaClPEG乙醇仪器、耗材离心管离心机抽干机实验步骤1、取培养至对数生长后期的含pBS质粒的
质粒DNA的大量提取和纯化有哪些步骤
大提质粒和小提质粒的基本原理是一样的，都是通过一定的方法（如加碱裂解）使在细菌内大量扩增的质粒释放出来，然后经过去蛋白去RNA等一系列步骤纯化DNA，最终将DNA提取出来。区别：1.大提用于大量菌液的提取，100ml-500ml 均可，而小提用的菌液量很少，一般1.5-5ml。2.一般试剂盒中大提比
质粒DNA的大量提取、纯化及棉花的遗传转化
实验概要本实验从转化农杆菌中大量提取质粒DNA并纯化，利用离体子房注射法将外源基因导入棉花，获得转基因棉花。主要试剂1. STE [0.1 mol/L NaCI、10 mmol/L Tris-HCl (pH 8.0), 1 mmol/LEDTA (pH 8.0)]2. 溶液I [50 mmol/L蔗
质粒DNA的大量提取、纯化及棉花的遗传转化
实验试剂1. STE [0.1 mol/L NaCI、10 mmol/L Tris-HCl (pH 8.0), 1 mmol/LEDTA (pH 8.0)]2. 溶液I [50 mmol/L蔗糖、25 mmol/L Tris-HCl (pH 8.0), 10 mmol/L EDTA (pH8.0)]
质粒DNA的大量提取、纯化及棉花的遗传转化
实验试剂1. STE [0.1 mol/L NaCI、10 mmol/L Tris-HCl (pH 8.0), 1 mmol/LEDTA (pH 8.0)]2. 溶液I [50 mmol/L蔗糖、25 mmol/L Tris-HCl (pH 8.0), 10 mmol/L EDTA (pH8.0)]
质粒DNA的大量提取、纯化及棉花的遗传转化
实验试剂1. STE [0.1 mol/L NaCI、10 mmol/L Tris-HCl (pH 8.0), 1 mmol/LEDTA (pH 8.0)]2. 溶液I [50 mmol/L蔗糖、25 mmol/L Tris-HCl (pH 8.0), 10 mmol/L EDTA (pH8.0)]
大量提取质粒DNA（CsCl－密度梯度离心法）
大量提取质粒DNA（CsCl 密度梯度离心法） 2010-7-7大量提取质粒DNA（CsCl 密度梯度离心法）李渊越1. 预约摇床、超速离心机。2. 配 TB 培养基（1L 锥形瓶中装250 ml 培养液），并灭菌。质粒做好转化，并涂板。3. 第一天早上，往 TB 中加入适量的Amp 或Kana。挑
质粒的大量制备
· Plasmid Mini and Maxi Prep Methods (Gimila Lab) · Maxi-preps and all media, solutions (NWFSC)Isolation of cosmid, plasmid and P1 DNA
质粒的大量制备
· Plasmid Mini and Maxi Prep Methods (Gimila Lab) · Maxi-preps and all media, solutions (NWFSC)Isolation of cosmid, plasmid and P1 DNA
质粒提取
一、导论已经提出过许多方法用于从细菌中提纯质粒DNA，这些方法都含有以下3个步骤:细菌培养物的生长。细菌的收获和裂解质粒DNA的纯化。(一)细菌培养物的生长从琼脂平板上挑取一个单菌落，接种到培养物中(有含有行当抗生素的液体培养基中生长)，然后从中纯化质粒，质粒的提纯几乎总是如此。现在使用的许多质粒载
质粒提取
一、导论已经提出过许多方法用于从细菌中提纯质粒DNA，这些方法都含有以下3个步骤:细菌培养物的生长。细菌的收获和裂解质粒DNA的纯化。(一)细菌培养物的生长从琼脂平板上挑取一个单菌落，接种到培养物中(有含有行当抗生素的液体培养基中生长)，然后从中纯化质粒，质粒的提纯几乎总是如此。现在使用的许多质粒载
质粒DNA大量制备实验
碱裂解法 平衡离心法 实验方法原理 这一方案科能是最常用的质粒制备方法，该法不仅相当决捷可靠，而且可获得相当纯净的粗制DNA。
质粒DNA的大量制备
实验概要本方法用于从细菌中提纯大量质粒DNA。主要试剂1. STE 0.1mol/L NaCl 10mmol/L Tris.Cl(pH8.0) 1mmol/L EDTA(pH8.0) 2. 溶液Ｉ 50mmol/L葡萄糖 25mmol/L Tris.Cl(pH8.0) 10mmol/L EDTA(
质粒DNA大量制备实验
实验方法原理 这一方案科能是最常用的质粒制备方法，该法不仅相当决捷可靠，而且可获得相当纯净的粗制DNA。实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒 葡萄糖TrisEDTATENaOHSDS异丙醇乙醇乙酸甲仪器、耗材 离心机漩涡混合器水浴锅实验步骤 1. 往2 ml 烧瓶中加入500 ml ，含有适当抗生素的L
质粒提取（二）
2)加200μl新配制的溶液Ⅱ。溶液Ⅱ0.2mol/L NaOH(临用前用10mol/L贮存液现用现稀释)1%SDS盖紧管口，快速颠倒离心管5次，以混合内容物。应确保离心管的整个内表面均与溶液Ⅱ接触。不要振荡，将离心管放置于冰上。3)加150μl用冰预冷的溶液Ⅲ溶液Ⅲ5mol/L乙酸钾 60ml冰乙
质粒提取（三）
10)按步骤8)所述再次轻轻地吸去上清，这一步操作要格外小心，因为有时沉淀块贴壁不紧，去除管壁上形成的所有乙醇液滴，打开管口，放于室温直至乙醇挥发殆尽，管内无可见的液体(2-5)分钟。11)用50μl含无DNA酶的胰RNA酶(20μg/ml)的TE(pH8.0)溶解核酸稍加振荡，贮存于-20℃。注:
质粒如何提取
需要掌握技能1. 质粒转化具体操作步骤： 将1ul 质粒DNA加入1.5ml的离心管； 将感受态细菌（competent cells）从－70℃冰柜中取出，快速吸取50ul感受态细菌，加入含质粒DNA的1.5ml的离心管； 轻轻地旋转以混匀内容物，在冰中放置30～60 min； 42度热休克
质粒DNA的大量制备实验
实验方法原理 大量碱裂解方法不仅相当快捷可靠，而且可获得相当纯净的粗制DNA。煮沸法的大量制备也简单易行，但得到的DNA比较粗制。高纯度的质粒DNA可通过氯化铯/溴化乙锭平衡离心法或层析法进一步纯化粗制DNA得到。实验材料 培养基菌株试剂、试剂盒 EDTASDS乙醇乙酸钾异丙醇仪器、耗材 离心管实验
质粒DNA的大量制备实验
碱裂解法 氯化铯/溴化乙锭平衡离心法 层析法 实验方法原理 大量碱裂解方法不仅相当快捷可靠，而且可获得相当纯净的粗制DNA。煮沸法的大量制
质粒DNA的提取
实验概要 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒。实验原理 碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们。在pH值介于12.0～12.5这个狭窄的范围内，线性的DNA双螺旋结构解开而被变性，尽管在这样的条件下，共价闭环质粒DNA