骨髓细胞染色体标本的制备
一、原理骨髓染色体标本制备通常用于白血病患者,特别是慢性或急性粒细胞性白血病,因为骨髓反映粒系统细胞增生情况,这些病人不宜用外周血。即使是淋巴细胞性白血病,也不主张用外周血,因为加PHA刺激外周血培养,只能获得正常淋巴细胞分裂相,并不能反映那些病理淋巴细胞的染色体改变。骨髓细胞属不断增殖的细胞,培养可分短期培养和直接制片法,无论哪种其培养液中均不需加PHA。二、用品和试剂同外周血染色体制备。三、操作步骤(一)短期培养法1.取材、培养:从髂骨取骨髓液0.2—0.5ml,无菌注入装有5ml培养液的培养瓶中,37℃培养23—25小时后,加入秋水仙碱(终浓度为0.07μg/ml),继续培养3—4小时,收获。2.染色体制片:低渗、固定、制片及染色同实验一。(二)直接制备法1.从髂骨抽取0.3—0.5ml,立即注入浓度为0.07μg/ml的秋水仙碱的生理盐水5ml中,以吸管轻轻吸动,将骨髓中脂肪颗粒充分吸掉,1000rpm离心8分钟,弃上清......阅读全文
实验动物组织标本的制备实验
实验材料 家兔豚鼠白鼠试剂、试剂盒 营养液仪器、耗材 注射器线浴槽实验步骤 通常选用家兔、豚鼠、大白鼠或小白鼠等动物,禁食24 小时。击头致昏,以避免麻醉或失血对胃肠道机能的影响。立即打开腹腔,取出所需的胃、肠、胆囊等。去除附着的系膜或脂肪等组织。迅速放入充氧(或95%O2+5%CO2
小鼠骨髓的染色体制备
实验概要本实验介绍了制备小鼠骨髓染色体的原理及操作流程。实验原理小鼠骨髓细胞有高度的分裂活性,并且数量非常多,因此不必进行体外培养,可直接观察到分裂期细胞。处于分裂期的细胞经秋水仙素处理,阻断纺锤丝的形成,使细胞分裂停止于中期,此时染色体达到最大收缩,具有典型的形态。低渗处理使细胞破裂,便于染色体分
染色体的标本制作及其组型实验
在真核生物中, 染色体的数量和形态具有物种的特异性一直可以作为此物种分类的基本依据之一。染色体作为遗传物质-DNA的载体, 对生物的遗传、变异、进化和个体发生, 以及细胞的增殖和生理过程的平衡控制等都具有十分重要的意义。每一个物种的细胞一般都有一定数目、形状和大小的染色体。将体细胞核中全部染
小白鼠骨髓细胞染色体显带(C带)技术
实验概要1、了解染色体显带技术的基本知识; 2、学习小白鼠骨髓细胞染色体显带(C带)技术。实验原理染色体显带(Banding)技术是一种用染料对染色体进行分化染色的方法。就是将染色体经酸、碱、温度等处理后,再以染料染色,或单用某些荧光染料就可以染出深浅不同或明暗各异的带纹的纵向结构。此项技术发明于本
小白鼠骨髓细胞染色体显带(C带)技术
实验原理染色体显带(Banding)技术是一种用染料对染色体进行分化染色的方法。就是将染色体经酸、碱、温度等处理后,再以染料染色,或单用某些荧光染料就可以染出深浅不同或明暗各异的带纹的纵向结构。此项技术发明于本上世纪六十年代末、七十年代初,发展至今已是非常成熟。1971年在巴黎召开第四次国际人类遗传
绒毛染色体制备方法
绒毛来源于胚胎的中胚层,最早的初级干绒毛出现于孕三周初,孕8周左右是绒毛发育最旺盛时期。目前国内外绒毛取材多选于8-9周。研究资料表明,绒毛取样不影响胚胎的发育及胎盘的功能。但取样的失败可导致胚胎丢失而终止妊娠。绒毛取样前者首先要检查阴道分泌物以判别阴道的洁净度,防止取样导致宫内感染。其次需做B超检
人淋巴细胞染色体标本制作
实验概要动物细胞染色体标本的制作方法,认识染色体形态实验原理染色体是细胞遗传的研究对象,分析认识眼行为对于认识遗传物质的传递、复制、畸变等都有重要的意义。 获得染色体的方法很多,目前对于哺乳动物比较常用的方法是外周血细胞培养法,就是将外周血接种在适当的培养基中进行培育,人类外周血细胞是终未分化细胞,
流式细胞仪标本的制备
流式细胞仪(FCM)是八十年代集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器,已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断,对淋巴细胞群和亚群进行精确分类,还能分离纯化某一群或亚群细
流式细胞仪标本的制备
流式细胞仪(FCM)是八十年代集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器,已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断,对淋巴细胞群和亚群进行分类,还能分离纯化某一群或亚群细胞。
正常细胞常规核型的标本制备实验
微量全血培养人淋巴细胞染色体标本制备肿瘤细胞的染色体标本制备人体染色体常规核型的分析实验方法原理采用微量全血培养人体外周血中淋巴细胞,在淋巴母细胞分裂高峰时加入秋水仙素,破坏细胞纺锤体的形成,使细胞停止在分裂中期。然后收集细胞,低渗处理,使细胞胀大,染色体伸展。接着进行固定并除去中期分裂相中残存的蛋
流式细胞仪标本的制备
流式细胞仪(FCM)是八十年代集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器,已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断,对淋巴细胞群和亚群进行精确分类,还能分离纯化某一群或亚群细
正常细胞常规核型的标本制备实验
微量全血培养 人淋巴细胞染色体标本制备 肿瘤细胞的染色体标本制备 人体染色体常规核型的分析 实验方法原理 采用微量全血培养人体外
流式细胞仪标本的制备
流式细胞仪(FCM)是八十年代集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器,已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断,对淋巴细胞群和亚群进行精确分类,还能分离纯化某一群或亚群细
免疫标记电镜技术标本制备的要求
为保持组织的抗原性,固定剂不宜过强。 1.包埋前染色 优点是切片染色前不经过锇酸固定、脱水及树脂包埋等过程,抗原未被破坏,易于获得良好的免疫反应。特别适用于含抗原量较少的组织。 2.包埋后染色 优点是超微结构保存较好,方法简便,阳性结构有高度的可重复性,能在同一张切片上进行多重免疫染色。
离体蛙心标本的制备实验
实验材料蛙仪器、耗材蛙板小玻板粗剪刀直剪刀大镊子小镊子眼科剪刀探针玻璃分针大烧杯小烧杯滴管培养皿棉线任氏液锌铜叉实验步骤(1)暴露蛙心:取蟾蜍一只,毁坏脑和脊髓,将其仰卧固定在蛙板上。从剑突下将胸部皮肤向上剪开或剪掉,然后剪掉胸骨,打开心包,暴露心脏和动脉干。 (2)观察心脏的解剖结构:在腹面可以看
正常细胞常规核型的标本制备实验
微量全血培养 人淋巴细胞染色体标本制备 肿瘤细胞的染色体标本制备 人体染色体常规核型的分析 实验方法原理 采用微量全血培养人体外
离体蛙心标本的制备实验
实验材料 蛙仪器、耗材 蛙板小玻板粗剪刀直剪刀大镊子小镊子眼科剪刀探针玻璃分针大烧杯小烧杯滴管培养皿棉线任氏液锌铜叉实验步骤 (1)暴露蛙心:取蟾蜍一只,毁坏脑和脊髓,将其仰卧固定在蛙板上。从剑突下将胸部皮肤向上剪开或剪掉,然后剪掉胸骨,打开心包,暴露心脏和动脉干。 (2)观察心脏的解剖结构:在腹面
动物骨髓细胞有丝分裂染色体制片材料、原理和步骤2
2.第3步可省去,改用1ml 注射器直接钻入骨末端即可,避免剪去骨骺时损失过多骨髓细胞; 3.在分离股骨大转子一端时,应防止折断股骨头; 4.如有需要,细胞悬液可用尼龙网过滤,进一步去除骨碎片及杂质。 四、实验结果及思考题 1.在低倍及中倍镜下观察Giemsa染色之后的染色体制片,寻
扫描电镜生物标本制备实验
实验材料病毒试剂、试剂盒无仪器、耗材扫描电镜实验步骤1. 标本的初步处理 待检标本都具有柔软而且含有大量水分的特点,在高度真空的扫描电镜中观察的标本都必须是干燥标本,因此,病毒标本在用扫描电镜观察之前都必须进行预处理并达到以下要求:(1) 标本的预处理要求:①尽可能使标本的形貌和结构保持活体时的近似
扫描电镜生物标本制备实验
实验方法原理 实验材料 病毒试剂、试剂盒 无仪器、耗材 扫描电镜实验步骤 1. 标本的初步处理 待检标本都具有柔软而且含有大量水分的特点,在高度真空的扫描电镜中观察的标本都必须是干燥标本,因此,病毒标本在用扫描电镜观察之前都必须进行预处理并达到以下要求:(1) 标本的预处理要求:①尽可能使标
染色体的标本制作及其组型实验2
3.3.5. 磷酸缓冲液:1/15 mol/L Na2HPO4•12H2O: 2.39g 溶于100ml双蒸水中。1/15 mol/L KH2PO4 0.907g 溶于100ml双蒸水中。取1/15 mol/L Na2HPO4•12H2O液80ml、1/15 mol/L KH2PO4液 20ml混合
染色体的标本制作及其组型实验3
4.2 染色体的组型实验4.2.1. 选择染色体清晰的照相底片,用放大机制作出放大10倍的清晰照片。4.2.2 将染色体逐一剪下,并对每个中期染色体逐一进行测量,包括每条染色体的长度和每个臂的长度。4.2.3. 根据测量数据,计算出每对染色体平均的相对长度、臂指数与着丝粒指数。4.2.4 把相对长度
动物骨髓细胞有丝分裂染色体制片材料、原理和步骤1
实验九 动物骨髓细胞有丝分裂染色体制片 一、实验目的: 了解动物细胞染色体制片的原理,学习骨髓细胞染色体的制片方法,观察动物细胞染色体的数目和形态。 二、实验原理: 染色体是基因的载体。真核细胞染色体的数目和结构是重要的遗传指标之一。制备染色体标本是细胞遗传学最基本的技术,优良的染色
小白鼠骨髓细胞染色体显带(C带)技术介绍
实验原理染色体显带(Banding)技术是一种用染料对染色体进行分化染色的方法。就是将染色体经酸、碱、温度等处理后,再以染料染色,或单用某些荧光染料就可以染出深浅不同或明暗各异的带纹的纵向结构。此项技术发明于本上世纪六十年代末、七十年代初,发展至今已是非常成熟。1971年在巴黎召开第四次国际人类遗传
骨骼细胞染色体制备方法
1. 在含有细胞培养基的细胞培养管中无菌添加骨髓样本1ml(参考细胞密度
人癌细胞染色体制备
实验概要本实验介绍了人癌细胞染色体制备的基本原理及操作步骤。有助于学习人类染色体制备的常规方法,了解人癌细胞染色体及其变异。实验原理目前大多数癌症都建立了相应的细胞株或细胞系,体外培养的癌细胞多属于连续的周期细胞,可以用来制备染色体。国内外制备动物和人类染色体的常规方法是空气干燥法,该方法的关键包括
人类外周血染色体制备
实验概要人外周血小淋巴细胞,通常都处在G1期(或G0期),一般情况下不进行分裂。如在培养液中加入植物血凝素(PHA),这种小淋巴细胞受到刺激可转化为淋巴母细胞,进入有丝分裂。短期培养后,经秋水仙素处理,低渗和固定,即可得到大量的有丝分裂细胞。人体的1ml外周血内一般含有约1×106~3×106个小淋
人类外周血染色体制备
一、原理人外周血小淋巴细胞,通常都处在G1期(或G0期),一般情况下不进行分裂。如在培养液中加入植物血凝素(PHA),这种小淋巴细胞受到刺激可转化为淋巴母细胞,进入有丝分裂。短期培养后,经秋水仙素处理,低渗和固定,即可得到大量的有丝分裂细胞。人体的1ml外周血内一般含有约1×106~3×106个小淋
人类外周血染色体制备
实验方法原理人的外周血淋巴细胞培养疗法是1960年由Moorhead提出来的。正常情况下,人外周血小淋巴细胞都处在G1期(或G0期)。但在体外给予一-定的条件,进行培养,经72h就可获得大量的有丝分裂细胞。这种取材简易、用血量少的培养方法已被广泛采用。在培养液中加入植物血凝素(PHA),淋巴细胞受到
羊水标本的制备、培养和分析实验
实验材料羊水试剂、试剂盒乙醇chang 培养基秋水仙胺低渗液甲醛 冰乙酸固定剂Permount 封固剂仪器、耗材用于细胞培养的20ml 注射器或试管15ml 离心管离心机盖玻片巴氏吸管倒置显微镜精细镊蓝垫或纸巾玻片加热器实验步骤展