对比法测定DNA浓度
Plate assay for determination of DNA concentrationA fairly accurate, rapid assay of DNA concentration can be obtained by UV visualization of samples spotted onto ethidium bromide-containing agarose plates.1) Prepare 0.8% (w/v) agarose/ethidium bromide plates by melting 0.8g agarose in 100ml 1 x TAE buffer (50 x TAE: 2M Tris-acetate, 50mM EDTA), allowing agarose to cool to approximately 50°C and adding 10ul of a 10mg/......阅读全文
BCA法测定蛋白浓度结果偏大原因
bca法测蛋白浓度超过量程肯定不准确的超过量程一般就是是超过了标准曲线的最高点。双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法,硫铵不干扰显色, Cu2+与蛋白质的肽键,以及酪氨酸残基络合,形成紫蓝色络合物,此物在540nm波长处有最大吸收。双缩脲法常用于0.5g/L~10g/L含量的蛋白质溶液测定。
请教Bradford法测定蛋白浓度原理及方法
解:是利用蛋白质-染料结合的原理,定量地测定微量蛋白质浓度的快速灵敏的方法。试剂和仪器一、试剂试剂盒自备:G250染色液、BSA标准蛋白。BSA标准蛋白浓度已稀释至500μg/ml,-20℃保存。二、测试样品待测样品蛋白浓度稀释在50-500μg/ml范围内为宜。三、仪器96孔酶标、酶标仪。操作方法
碘量滴定法测定乙醇浓度
碘量滴定法在酸性溶液中,乙醇被重铬酸钾氧化生成乙酸,过量的重铬酸钾溶液以碘化钾还原,析出的碘,以硫代硫酸钠溶液滴定。取50 mL试样放入250 mL三角瓶中,加50 mL水,迅速蒸馏出50 mL备用。在两个250 mL碘量瓶中,各吸取10 mL 0.1 N重铬酸钾和5 mL浓硫酸,混匀冷却至室温。在
Lowry-检测法测定蛋白质浓度实验
实验方法原理Lowry 法又称为 Folin-酚试剂法。首先在碱性溶液中形成铜-蛋白复合物,然后这一复合物还原磷钼酸-磷钨酸试剂 (Folin-酚上级),产生钼蓝和钨蓝复合物的深蓝色,这种深蓝色 的复合物在745~750 nm 处有最大的吸收峰,颜色的深浅(吸收值)与蛋白质浓度成正比,可根据 750
Lowry-检测法测定蛋白质浓度实验
Lowry检测法 实验方法原理 Lowry 法又称为 Folin-酚试剂法。首先在碱性溶液中形成铜-蛋白复合物,然后这一复合物还原磷钼酸-磷钨酸试剂 (F
浓度和旋光管长度对比旋光度有何影响
比旋光度是物理常数,与浓度和旋光管的长度无关。浓度和旋光管长度与旋光度有关。浓度越大、旋光管长度越大,旋光度也越大。
内标对比法样品溶液和内标物浓度是否必须相同
必须相同。内标法的目标重量的纯物质作为内标(见文章内标)溶液中加入一定量的样品混合物中以进行分析,然后色谱用含有内标物的样品.
缓释制剂在不同浓度乙醇中的溶出差异对比
前言 Palladone是一种缓释止痛胶囊,活性成分为氢吗啡酮(一种纯阿片类受体激动剂),2004年9月,PURDUEPHARMA获得FDA的批准上市,主要用于治疗主要用于需要阿片类药物镇痛的患者;但不到一年时间,2005年7月14日该公司即从市面上撤回该产品并退市,因为其与酒精一起服用,
东芝最新电化学DNA芯片可在低浓度下检测DNA
日本东芝公司(Toshiba)日前宣布研制成功高灵敏度的电化学DNA芯片,这种芯片能够在非常低的浓度下检测DNA。 这款新型芯片集成了目前广泛使用的半导体电路技术之一的CMOS电路及传感器,是对东芝先进DNA芯片系列产品及相关技术的最新补,可迅速投入的应用包括抗癌药物的易感性分析及用于疾病起因
双脱氧链终止法测定DNA序列
[目的] 掌握双脱氧链终止法测定DNA序列的原理与方法[原理]DNA聚合酶催化的DNA链延伸是在3’-OH末端上进行的。由于2’,3’-双脱氧三磷酸核苷酸(ddNTP)的3’-位脱氧而失去游离-OH,当它参入到DNA链后,3’-OH末端消失,使DNA链的延伸终止。本实验根据此原理,将待测DNA片段插
如何用紫外吸收法测定DNA含量
首先,分光光度计测量的样品必须是均一的,摇匀后再测量结果会准确些。它是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同。
为什么要测定dna的浓度和纯度
首先,分光光度计测量的样品必须是均一的,摇匀后再测量结果会准确些.它是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器.核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能.可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA.核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm.每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同.
知道OD值后如何算出DNA的浓度
DNA的量与260nm处的吸光度值(OD值)成正比,因此使用紫外分光光度计定量是最科学的。1个OD值的合成DNA的重量约为33ng。一般用不着算的,仪器会自己显示出来的~~~
不同品牌试剂盒提取土壤DNA的结果对比
1.引言 提取高浓度、大片段、多样性程度高、具有代表性的土壤微生物总DNA对土壤微生物多样性研究至关重要。然而,土壤是一个非常复杂的异质体系,其中含有的腐植酸及腐植酸类似物、酚类化合物、重金属离子等,在DNA提取过程中如不能有效去除,将直接影响后续的PCR扩增、核酸杂交、内切酶消化等分子操作。用传统
原子吸收光谱法测定水中钙浓度
化学干扰 来源:Analytes (Target species)与共存元素发生化学反应生成难挥发的化合物所引起的干扰,主要影响原子化效率,使待测元素吸光度的降低。 消除: 1. 加入释放剂:SO42-、PO43-对Ca2+的干扰----加入La(III)、Sr(II)---释放Ca2+;
植物染色体DNA的抽取及浓度测定
目的意义DNA是遗传信息的载体和基本遗传物质,它在遗传变异、代谢调控等方面起着重要作用,是分子生物学和基因工程研究的对象,但无论是研究植物DNA的结构和功能,还是开展外源DNA的转化、转导的研究,首先要做的就是从植物组织中提取天然状态的高分子量的纯化DNA。因此,本实验的目的是学习植物基因组DNA提
用Nanodrop测量cDNA-,是选择DNA浓度测量吗
如果你的测量仪器上有cDNA选项最好,没有的话就选DNA,OD值和cDNA浓度是有转换公式的,你可以根据测量的OD值自己算。做PCR的话影响因素很多,你可以做个模版浓度梯度,试试多大浓度扩增效果最好。
斑点滤膜结合法测定蛋白质浓度实验
实验材料待测蛋白质样品试剂、试剂盒10%三氯醋酸(TCA)考马斯亮蓝凝胶染色液考马斯亮蓝凝胶脱色液仪器、耗材Whatman 3 MM 滤纸实验步骤1. 用铅笔在 3 mm 滤纸上画出 1 cm x 1 cm 大小的方格;2. 在每一方格中心加入 3 ul 样品;3. 将滤纸凉干,大约需要 15 mi
280-纳米光吸收法测定蛋白质浓度实验
实验方法原理由于蛋白质分子中常酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸等苯环结构,在紫外 280 nm 波长处有最大吸收峰,其吸收值与蛋白质浓度成正比,故可用 280 nm 波长吸收值大小来测定蛋白质含量。实验材料待测蛋白质样品试剂、试剂盒实验用缓冲液(空白对照)仪器、耗材分光光度计(配备紫外档)石英比色杯用于溶液
280-纳米光吸收法测定蛋白质浓度实验
实验方法原理 由于蛋白质分子中常酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸等苯环结构,在紫外 280 nm 波长处有最大吸收峰,其吸收值与蛋白质浓度成正比,故可用 280 nm 波长吸收值大小来测定蛋白质含量。实验材料 待测蛋白质样品试剂、试剂盒 实验用缓冲液(空白对照)仪器、耗材 分光光度计(配备紫外档)石英比色杯
斑点滤膜结合法测定蛋白质浓度实验
实验方法原理 实验材料 待测蛋白质样品试剂、试剂盒 10%三氯醋酸(TCA)考马斯亮蓝凝胶染色液考马斯亮蓝凝胶脱色液仪器、耗材 Whatman 3 MM 滤纸实验步骤 1. 用铅笔在 3 mm 滤纸上画出 1 cm x 1 cm 大小的方格;2. 在每一方格中心加入 3 ul 样品;3. 将滤纸凉干
斑点滤膜结合法测定蛋白质浓度实验
斑点滤膜结合法 实验方法原理 实验材料 待测蛋白质样品
280-纳米光吸收法测定蛋白质浓度实验
280纳米(A280)光吸收法 实验方法原理 由于蛋白质分子中常酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸等苯环结构,在紫外 280 nm 波长处有最大吸收峰,其吸收值与蛋白质
氟离子选择电极法测定氟离子的浓度范围
水中氟含量的高低对人体健康有一定影响,饮用水含氟为 0.5mg/L左右为宜.氟含量过高易患氟斑牙或发生氟中毒,而过低又会引起龋齿病.通常超过1.4mg/L的水禁止使用.氟的测定通常采用比色和直接电位法(即氟离子选择性电位法).前者的测定范围较宽,但干扰因素多,往往需对试样进行预处理.后者的测量范围虽
双头面筋仪与手洗法测定面筋含量的方法对比
我国南北有着饮食差异,一直以来,南方人爱吃米饭,北方人爱吃面食,面食种类多。面条由面粉做成,具体来说,是由中筋粉制成,中筋粉的蛋白质含量在8.0%-10.5%之间。所以一般根据面粉中蛋白质含量的多少,可以分为高筋面粉、中筋面粉、低筋面粉及无筋面粉,所以要将面粉分类,需要用到专业的双头面筋仪进行测定。
采用不同标准方法测定粮食水分的对比试验
粮食水分在16%(含16%)以上时,按照现行国家标准,要采用两次烘干测定法,进行水分含量测定(GB/T20264-2006),但这种烘干测定法测定时间较长。为了解决在粮食烘干降水期间,高水分玉米(水分高于≥16%)水分含量测定时间较长,检验结果不能更及时指导生产的问题,我们对如何缩短高水分玉米水分
酶解法测定DNA物理图谱的基本步骤
用部分酶解法测定DNA物理图谱包括二个基本步骤:⑴完全降解选择合适的限制性内切酶将待测DNA链(已经标记放射性同位素)完全降解,降解产物经凝胶电泳分离后进行自显影,获得的图谱即为组成该DNA链的酶切片段的数目和大小。⑵部分降解以末端标记使待测DNA的一条链带上示踪同位素,然后用上述相同酶部分降解该D
二喹啉甲酸(BCA)检测法测定蛋白质浓度实验
二喹啉甲酸(BCA)检测法是近来新研制的一种改进的 Lowery 测定法,反应简单而且几乎没有干扰物质的影响。实验方法原理在碱性环境下蛋白质分子中的肽键结构能与 Cu2+络合生成络合物,同时将 Cu2+还原成 Cu+。而 BCA 试剂可敏感特异地与结合,形成稳定的有颜色的复合物。 在 562nm 处
二喹啉甲酸(BCA)检测法测定蛋白质浓度实验
二奎琳甲酸检测法 实验方法原理 在碱性环境下蛋白质分子中的肽键结构能与 Cu2+络合生成络合物,同时将 Cu2+还原成 Cu+。而 BCA 试剂可敏感特异地与
激光拉曼光谱内标法测定葡萄糖液浓度
摘 要 利用葡萄糖溶液的激光拉曼光谱中的特征峰—CCO(1 125 cm- 1 ) , 以本底溶液水为内标物, 组成相对强度, 对葡萄糖溶液含量进行了测定研究, 其线性范围为0~118 mol ·L - 1 , 检出限为01022 7 mol ·L - 1 ,共存的KCl 和NaCl 不引起干扰,