体外荧光法检测核内体早期动力学4
Top of pageProcedureOverviewSteps 1 - 8 Preparation of rat brain cytosolSteps 9 - 10 Culture of PC12 cellsSteps 11 - 30 Preparation of postnuclear supernatantsSteps 31 - 39 Preparation of docking/fusion or sorting/budding reactionsSteps 40 - 43 Imaging of the samplesSteps 44 - 53 Data analysisPoints from here (point 1) up to and including point 8 are related to Preparation of rat brain cytosolTiming: 4–5 hP......阅读全文
体外荧光法检测核内体早期动力学4
Top of pageProcedureOverviewSteps 1 - 8 Preparation of rat brain cytosolSteps 9 - 10 Culture of PC12 cellsSteps 11 - 30 Preparation of postnuclear sup
体外荧光法检测核内体早期动力学
A fluorescence-based in vitro assay for investigating early endosome dynamicsSina V Barysch1,2, Reinhard Jahn1 & Silvio O Rizzoli2ABSTRACTEarly endoso
体外荧光法检测核内体早期动力学6
Critical step Be careful to thaw PNS and cytosol slowly on ice to avoid unwanted protein degradation or breaking of organelles. This might require up
体外荧光法检测核内体早期动力学5
Leave tubes on ice and repeat Steps 13–15 for the next 6–12 plates of cells.When all cells are collected, centrifuge all tubes at 250g for 5 min at 4
体外荧光法检测核内体早期动力学3
REAGENT SETUPCritical step All solutions and buffers must be free of detergent and therefore should be prepared in plasticware, or in glassware thorou
体外荧光法检测核内体早期动力学2
Full size image (70 KB)In vitro incubation of a reaction mix that contains labeled endosomes, cytosol and an ATP-regenerating system at physiological
流式应用精选——微核检测(体内体外)
注:点击文章名称查看详情。文章名称样本仪器型号备注Assessment of the Genotoxic Potential of Azidothymidine in the Comet,Micronucleus, and Pig-a AssayBone Marrow and Peripheral
微生物拟核体内体外染色观察实验
实验方法原理 富尔根氏(Feulgen)染色法是根据席夫氏(Schiff)试剂进行的反应而建立的微生物拟核染色法。席夫氏试剂含有碱性复红和亚硫酸,碱性复红与亚硫酸结合后,失去醌式结构而变为无色。当 DNA 经酸作用而生成的醛化合物与席夫氏试剂结合后,使醌式结构恢复,合成一种带紫红色的碱性复红衍生
体外DNA重组技术4
(二)质粒的大量制备:1.将5ml转化菌种接种于500ml LB培养液(含用于筛选的抗生素)中,37℃以225rpm速度振荡培养12~16小时;2.10,000rpm,4℃离心15min收集菌体;3.将细菌悬浮于100ml预冷的STE(0.1M NaCl,10mM Tris.Cl,pH8.0,1mM
国内体外诊断企业如何突出重围-上市公司盘点
我国体外诊断行业步入快速增长期:据McEvoy & Farmer 的预测,我国体外诊断行业未来增速有望达到15%-20%,远远超过全球5%-7%的增长,至2015 年成为全球第三大市场;三大驱动力促进行业发展,国内企业有望成为最大受益者:驱动一,取消“以药养医”,检查需求或将爆发,规定检
点突变大小鼠在体内体外临床研究的应用(二)
研究点突变疾病的利器——点突变模式动物依靠同源重组,可以将含有突变碱基的DNA片段整合到基因组中,但过低的重组效率以及种属局限限制了点突变的研究。随着各种核酸酶技术在2009-2013年之间井喷式的发展及以后的不断完善,尤其是Crispr/Cas9技术的发明,使得基因编辑的效率大幅提高,难度和成本也
点突变大小鼠在体内体外临床研究的应用(一)
点突变与人类疾病基因是很多生命的蓝图,基因突变虽有对物种的多样性和演化有重要的作用,但同时也是很多疾病的根源。点突变就是突变类型中最常见的一种,是色盲症、镰刀状细胞贫血症、囊性纤维化以及很多肿瘤病变中的罪魁祸首。除了引发癌症以外,一些点突变还能提高癌细胞的药物抗性,因此针对同一靶点有时需要设计不同的
-工信部发布《蓝皮书:2015国内体外诊断产业现状》
IVD定义 业内人士俗称其为IVD也就是英文In Vitro Diagnostic。体外诊断试剂和器械在国外统一称为体外诊断医疗器械。 属于医疗器械的一部分。在我国,体外诊断试剂是指:可单独使用或与仪器、器具、设备或系统组合使用,在疾病的预防、诊断、治疗监测、预后观察、健康状态评价以及遗传性疾
微生物拟核体内体外染色观察实验_溴化乙锭染色法
实验方法原理如果将微生物细胞裂解,使其拟核(即染色体 DNA)被抽提出来,通过溴化乙淀(ethidium bromide,简称 EB)染色并进行琼脂糖凝胶电泳,便可观察到释放到细胞外的染色体 DNA。EB 是一种扁平分子染料。可特异性插入 DNA 碱基对之间,在紫外线照射下,使 DNA 呈现荧光,因
细胞核连缀分析实验_体外细胞核连缀反应
实验材料组织试剂、试剂盒EDTASDS蛋白酶 K仪器、耗材玻璃试管实验步骤1. 融解从 1 g 组织或 5 瓶培养皿细胞制备、冻存于 NSB 中的细胞核。1000 g 离心 5 分钟,去上清,用 200 μl HRB 轻轻吹打重悬。2. 将悬液转至一个带有抗酚螺帽的硅化玻璃试管,37℃ 水浴 5 到
RNA蛋白互作揭示视网膜母细胞瘤发生的染色体构象调控
上海交通大学医学院附属第九人民医院范先群教授主攻眼部肿瘤和眼眶外科,在基础研究和临床治疗方面取得突出成就。其带领的眼肿瘤团队利用ChIRP-MS技术(一种研究RNA-蛋白相互作用的技术手段)结合RNA-seq、ChIP等一系列体内体外实验对视网膜母细胞瘤新的作用机制进行了深入研究。研究发现肿瘤
微生物拟核体内体外染色观察实验_富尔根氏染色法
实验方法原理富尔根氏(Feulgen)染色法是根据席夫氏(Schiff)试剂进行的反应而建立的微生物拟核染色法。席夫氏试剂含有碱性复红和亚硫酸,碱性复红与亚硫酸结合后,失去醌式结构而变为无色。当 DNA 经酸作用而生成的醛化合物与席夫氏试剂结合后,使醌式结构恢复,合成一种带紫红色的碱性复红衍生物。此
细胞核连缀分析实验_体外细胞核连缀反应产物的分析
实验材料环状质粒 DNA试剂、试剂盒氢氧化钠SSPE预杂交缓冲液仪器、耗材狭线印迹装置实验步骤一、狭线印迹的制备1. 如果用的是环状质粒 DNA,用适当的限制酶使 DNA 探针线性化。每个狭线需用 5 μg DNA。2. 往线性 DNA 溶液中加氢氧化钠至 0.1 mol/L,混匀,室温放置 30
荧光法检测种子实验
植物种子中经常存在着许多能够在紫外线照射下产生荧光的物质,如某些黄酮类、香豆、素类、酚类物质等,在种子衰老过程中,这些荧光物质的结构和成分往往发生变化,因而荧光的颜色也相应改变
荧光法检测种子实验
实验方法原理植物种子中经常存在着许多能够在紫外线照射下产生荧光的物质,如某些黄酮类、香豆、素类、酚类物质等,在种子衰老过程中,这些荧光物质的结构和成分往往发生变化,因而荧光的颜色也相应改变;有些种子在衰老死亡时,荧光物质的性质虽未改变,但由于生活力衰退或已死亡的细胞原生质透性增大,浸种时,种子中的荧
荧光法检测种子实验
实验方法原理 植物种子中经常存在着许多能够在紫外线照射下产生荧光的物质,如某些黄酮类、香豆、素类、酚类物质等,在种子衰老过程中,这些荧光物质的结构和成分往往发生变化,因而荧光的颜色也相应改变;有些种子在衰老死亡时,荧光物质的性质虽未改变,但由于生活力衰退或已死亡的细胞原生质透性增大,浸种时,种子中的
荧光法检测种子实验
实验方法原理:植物种子中经常存在着许多能够在紫外线照射下产生荧光的物质,如某些黄酮类、香豆、素类、酚类物质等,在种子衰老过程中,这些荧光物质的结构和成分往往发生变化,因而荧光的颜色也相应改变;有些种子在衰老死亡时,荧光物质的性质虽未改变,但由于生活力衰退或已死亡的细胞原生质透性增大,浸种时,种子中的
刺激隐核虫核酸检测试剂盒(一管式恒温荧光法)使用...
刺激隐核虫核酸检测试剂盒(一管式恒温荧光法)使用说明说明动物疫病检测系列基于独特的恒温荧光检测技术,可针对食品、动物组织等样品中病原的特异核酸片段进行扩增,通过实时扩增曲线判定结果。本产品用于刺激隐核虫的检测,检出限为103copies/μl基因组DNA。◆ 产品组成(96测试)032111LⅢ试剂
捕获早期RNA转录动力学的关键
生命的活动是通过蛋白质的制造而发生的,蛋白质赋予我们的细胞结构和功能。细胞蛋白质从DNA编码的基因指令中获得行进顺序,他们的序列首先被复制并在一个叫做转录的多步骤过程中被制造成RNA。 科罗拉多州立大学的一个研究合作项目专门研究高分辨率荧光显微镜和计算模型,以实时、精细地可视化和描述这类生命过
人类胃器官早期发育机制与体外重构研究获突破
清华大学副教授邵玥团队与合作者利用人多能干细胞,首次在体外培养出一种包含胃底和胃窦双极分布的胃器官发育模型,破解了WNT信号梯度悖论,建立了微尺度组织定向组装技术,可对类胃囊中不同谱系的组织模块独立开展基因编辑。相关研究成果近日发表于《自然》。胃是人体内结构精密的消化器官。在胃部结构中,胃底和胃窦两
真核生物基因组4
(2) 苯丙酮尿症 苯丙酮尿症(PKU)的病因是患者肝细胞缺乏苯丙氨酸羟化酶,使体内的苯丙氨酸不能正常代谢为酪氨酸,导致血清中苯丙酮酸浓度升高。现已知苯丙氨酸羟化酶基因定位于12q24.1,此基因全长约90kb,含13个外显子,在中国人中已发现10余种点突变,这是造成酶活性缺乏的原因。 2.
FIA荧光法及动力学分析法结合
将流动注射分析法与荧光光度法相结合,大大提高分析灵敏度。利用铽与EDTA、磺基水杨酸反应生成三元配合物,可以用荧光法测定矿石中铽含量。激发波长为320nm,测定波长545nm。对80pg含量的铽,其测量的相对标准偏差为4%,且各种金属离子不受干扰。 催化分析法的最大优点是灵敏度比一般化学分析法
FIA荧光法及动力学分析法结合
将流动注射分析法与荧光光度法相结合,大大提高分析灵敏度。利用铽与EDTA、磺基水杨酸反应生成三元配合物,可以用荧光法测定矿石中铽含量。激发波长为320nm,测定波长545nm。对80pg含量的铽,其测量的相对标准偏差为4%,且各种金属离子不受干扰。 催化分析法的最大优点是灵敏度比一般化学分析法
内体的结构特点和特征
内体是膜包裹的囊泡结构,有初级内体(early endosome)和次级内体(late endosome)之分, 初级内体通常位于细胞质的外侧,次级内体常位于细胞质的内侧,靠近细胞核。内体的主要特征是酸性的、不含溶酶体酶的小囊泡。
胚内体腔的结构特点
主要是指脊椎动物的局部卵裂的胚胎,其包于胚内的体腔部分(靠近侧板内腔的肾节部位),具体说,就是体壁中胚层与脏壁中胚层之间的腔隙,称为胚内体腔。此腔向外延伸则与胚体外区的胚外体腔相接。