微生物拟核体内体外染色观察实验_溴化乙锭染色法
实验方法原理如果将微生物细胞裂解，使其拟核（即染色体 DNA）被抽提出来，通过溴化乙淀（ethidium bromide，简称 EB）染色并进行琼脂糖凝胶电泳，便可观察到释放到细胞外的染色体 DNA。EB 是一种扁平分子染料。可特异性插入 DNA 碱基对之间，在紫外线照射下，使 DNA 呈现荧光，因而可观察到凝胶中的染色体 DNA，由于在提取过程中大分子染色体 DNA 的随机断裂，所以经凝胶电泳后形成的是一条不整齐的浓的荧光带。用 EB 染色法进行的体外观察染色体 DNA 也分两步进行：1. 将细胞裂解后抽提染色体 DNA；2. 通过含有 EB 的琼脂糖凝胶电泳在紫外光下观察染色体 DNA 荧光带。实验材料大肠杆菌试剂、试剂盒TE 缓冲液10% SDS蛋白酶 K（20 mg ml）5 mol L NaClCTAB NaCI酚 氯仿 异戊酵（25:24:1）异丙酵70% 乙醇溴酚蓝加样缓冲液TAE 电泳缓冲液仪器、耗材台式高速离心......阅读全文
微生物拟核体内体外染色观察实验_溴化乙锭染色法
实验方法原理如果将微生物细胞裂解，使其拟核（即染色体 DNA）被抽提出来，通过溴化乙淀（ethidium bromide，简称 EB）染色并进行琼脂糖凝胶电泳，便可观察到释放到细胞外的染色体 DNA。EB 是一种扁平分子染料。可特异性插入 DNA 碱基对之间，在紫外线照射下，使 DNA 呈现荧光，因
微生物拟核体内体外染色观察实验
实验方法原理 富尔根氏（Feulgen）染色法是根据席夫氏（Schiff）试剂进行的反应而建立的微生物拟核染色法。席夫氏试剂含有碱性复红和亚硫酸，碱性复红与亚硫酸结合后，失去醌式结构而变为无色。当 DNA 经酸作用而生成的醛化合物与席夫氏试剂结合后，使醌式结构恢复，合成一种带紫红色的碱性复红衍生
微生物拟核体内体外染色观察实验_富尔根氏染色法
实验方法原理富尔根氏（Feulgen）染色法是根据席夫氏（Schiff）试剂进行的反应而建立的微生物拟核染色法。席夫氏试剂含有碱性复红和亚硫酸，碱性复红与亚硫酸结合后，失去醌式结构而变为无色。当 DNA 经酸作用而生成的醛化合物与席夫氏试剂结合后，使醌式结构恢复，合成一种带紫红色的碱性复红衍生物。此
微生物的染色与形态结构观察实验——鞭毛染色法
实验方法原理鞭毛是细菌的运动“器官”，一般细菌的鞭毛都非常纤细，其直径为0.01~0.02 μm，在普通光学显微镜的分辨力限度以外，故需要用特殊的鞭毛染色法，才能看到。鞭毛染色是借媒染剂和染色剂的沉淀作用，使染料堆积在鞭毛上，以加粗鞭毛的直径，同时使鞭毛着色，在普通光学显微镜下能够看到。实验材料苏云
微生物的染色与形态结构观察实验——荚膜染色法
实验方法原理荚膜是包围在细菌细胞外面的一层粘液性物质，其主要成分是多糖类，不易被染色，故常用衬托染色法，即将菌体和背景着色，而把不着色且透明的荚膜衬托出来。荚膜很薄，易变形，因此，制片时一般不用热固定。实验材料圆褐固氮菌试剂、试剂盒荚膜染色液纯甲实验步骤1. 在载玻片一端滴一滴无菌水，取少许培养了
微生物的染色与形态结构观察实验——革兰氏染色法
实验方法原理革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。它是1884年由丹麦医师Gram创立的。革兰氏染色法（Gramstain）不仅能观察到细菌的形态而且还可将所有细菌区分为两大类：染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌，用G+表示；染色反应呈红色（复染颜色）的称为革兰氏阴性细菌，用G-表示。细菌对于
微生物的染色与形态结构观察实验——细菌芽孢染色法
实验方法原理芽孢染色法是利用细菌的芽孢和菌体对染料的亲合力不同的原理，用不同染料进行着色，使芽孢和菌体呈不同的颜色而便于区别。芽孢壁厚、透性低，着色、脱色均较困难，因此，当先用一弱碱性染料，如孔雀绿（malachitegreen）或碱性品红（basicfuchsin）在加热条件下进行染色时，此染料不
微生物的染色与形态结构观察实验——细菌的单染色法
实验方法原理在中性、碱性或弱酸性溶液中，细菌细胞通常带负电荷，所以常用碱性染料进行染色。碱性染料并不是碱，和其他染料一样是一种盐，电离时染料离子带正电，易与带负电荷的细菌结合而使细菌着色。实验材料金黄色葡萄球菌试剂、试剂盒生理盐水吕氏碱性美蓝染色液石炭酸复红染色液仪器、耗材显微镜载玻片接种环双层瓶擦
螺旋体形态及染色特征观察实验_Fontana－镀银染色法
实验步骤观察梅毒的组织切片。用Fontana 镀银染色法染色。镜下可见螺旋致密而规则，约8～14个，两端尖直，螺旋体呈棕褐色，组织染成棕黄色。钩端螺旋体纯培养涂片。用Fontana 镀银染色法染色。镜下可见一端或两端有钩，类似S型和C型的棕褐色螺旋体，螺旋不太清楚，菌体整齐，细粗均匀。
细胞骨架观察实验—考马斯亮蓝染色法
实验方法原理荧光免疫染色法显示细胞骨架具有清晰优点，但操作过程较复杂；考马斯亮蓝染色法简便易行，清晰度稍差，但如分化处理适当能提高清晰度。实验材料细胞试剂、试剂盒磷酸二氢钠磷酸氢二钠戊二醛甲醇冰醋酸蒸溜水考马斯亮蓝仪器、耗材培养瓶实验步骤1. 固定液准备0.1 M 磷酸二氢钠（NaH2PO4·2H
细胞骨架观察实验—抗管蛋白免疫染色法
实验方法原理细胞骨架微管的主要成分主要为管蛋白（Tublin），用免疫荧光法能显出其清晰结构。实验材料细胞试剂、试剂盒PBS丙酮甲醛仪器、耗材碟皿恒温箱实验步骤1. 细胞培养用支持物细胞培养法，把细胞培养在小盖片上；2. 漂洗用镊子挟出小盖片，在温PBS中漂洗3 次，每次30 秒；3. 固定在
微生物染色液配制及染色法
1、美蓝染色法1.1 吕氏碱性美蓝染色液美蓝 0.3g 95%乙醇 30mL 0.01%氢氧化钾溶液100mL将美蓝溶解于乙醇中,然后与氢氧化钾溶液混合.1.2 染色法将涂片在火焰上固定,待冷.滴加染液,染1～3min,水洗,待干,镜检.1.3 结果菌体呈蓝色. 2、革兰氏染色法2.1 结晶紫染色液
微生物染色液配制及染色法
1、美蓝染色法1.1 吕氏碱性美蓝染色液美蓝 0.3g 95%乙醇 30mL 0.01%氢氧化钾溶液100mL将美蓝溶解于乙醇中,然后与氢氧化钾溶液混合.1.2 染色法将涂片在火焰上固定,待冷.滴加染液,染1～3min,水洗,待干,镜检.1.3 结果菌体呈蓝色. 2、革兰氏染色法2.1 结晶紫染色
微生物染色液配制及染色法
2.1 美蓝染色法2.1.1 吕氏碱性美蓝染色液美蓝 0.3g95%乙醇 30mL0.01%氢氧化钾溶液 100mL将美蓝溶解于乙醇中，然后与氢氧化钾溶液混合。2.1.2 染色法将涂片在火焰上固定，待冷。滴加染液，染1～3min，水洗，待干，镜检。2.1.
微生物常用染色法及染色程序
微生物染色的基本原理，是借助物理因素和化学因素的作用而进行的。物理因素如细胞及细胞物质对染料的毛细现象、渗透、吸附作用等。化学因素则是根据细胞物质和染料的不同性质而发生地各种化学反应。酸性物质对于碱性染料较易吸附，且吸附作用稳固；同样，碱性物质对酸性染料较易于吸附。如酸性物质细胞核对于碱性染料就有化
微生物的染色与形态结构观察实验
实验方法原理 在中性、碱性或弱酸性溶液中，细菌细胞通常带负电荷，所以常用碱性染料进行染色。碱性染料并不是碱，和其他染料一样是一种盐，电离时染料离子带正电，易与带负电荷的细菌结合而使细菌着色。实验材料 金黄色葡萄球菌试剂、试剂盒 生理盐水吕氏碱性美蓝染色液石炭酸复红染色液仪器、耗材 显微镜载玻片接种环
细胞骨架观察实验——鬼笔环肽显示微丝蛋白染色法
实验材料细胞试剂、试剂盒PBS三硝基甲苯甘油仪器、耗材显微镜实验步骤1. 盖片培养细胞（70 %～80 %汇合），PBS洗3 次；2. 2 %的甲醛/PBS 液（甲醛按37 %）固定3 分钟；3. 0.5 %的三硝基甲苯/PBS处理3 次，每次10 分钟；4. PBS漂洗3 次；5. 用罗
培养细胞的染色实验——Giemsa染色法
实验方法原理Giemsa 染色是最常用的方法之一，它简便、快速，适用于多种细胞和染色体染色。试剂、试剂盒Giemse甘油甲醇Sorensen仪器、耗材滴管玻璃片实验步骤1. 染液制备（1）称Giemse粉0.5 g、甘油22 ml，在研钵内先用少量甘油与Giemsa充分混合，研磨至无颗粒；（2）再
培养细胞的染色实验——Feulgen染色法
实验方法原理此染色法为Feulgen早在1924年提出的一种鉴别细胞中DNA的组织化学方法。细胞中的DNA在60 ℃用1 N HCl酸解离脱氧核糖核酸，使嘌呤碱基与糖苷犍破坏，嘌呤碱脱掉，脱氧核糖的中的醛基游离；醛基能与Schiff试剂相结合，形成一种紫色的复合物。本方法中酸的离解根重要，若温度过低
鞭毛染色实验——改良－Leifson－氏染色法
实验方法原理鞭毛染色的基本原理，是在染色前先用媒染剂处理含使它沉积在鞭毛上，使鞭毛直径加粗，然后再进行染色。实验材料苏云金芽孢杆菌假单胞菌金黄色葡萄球菌试剂、试剂盒Leifson 氏鞭毛染色液0.01％ 美蓝水溶液仪器、耗材载玻片盖玻片凹载玻片无菌水凡士林显微镜实验步骤1. 载玻片的准备 菌种材料的
鞭毛染色实验——硝酸银染色法
细菌的鞭毛很纤细，其直径通常为 0.01 ~0.02 μm， 所以，除了很少数能形成鞭毛束（由多根鞭毛构成）的细圈可以用相差显微镜直接观察到鞭毛束的存在外，一般细菌的鞭毛均不能用光学显微镜直接观察到，而只能用电子显微镜观察。要用普通光学显微镜观察细菌的鞭毛，必须用鞭毛染色法。鞭毛染色方法很多，本实验
关于微生物染色—革兰氏染色法的基本介绍
革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师Gram创立。 细菌先经碱性染料结晶染色，而经碘液媒染后，用酒精脱色，在一定条件下有的细菌此色不被脱去，有的可被脱去，因此可把细菌分为两大类，前者叫做革兰氏阳性菌（G+），后者为革兰氏阴性菌（G—）。为观察方便，脱色后再用一种
关于微生物染色—单染色法的基本介绍
微生物染色—单染色法： 用一种染色剂对涂片进行染色，简便易行，适于进行微生物的形态观察。在一般情况下，细菌菌体多带负电荷，易于和带正电荷的碱性染料结合而被染色。因此，常用碱性染料进行单染色，如美兰、孔雀绿、碱性复红、结晶紫和中性红等。若使用酸性染料，多用刚果红、伊红、藻红和酸性品红等。使用酸性
鞭毛染色法及活细菌运动性的观察
实验概要学习并掌握细菌鞭毛染色的基本方法及观察细菌鞭毛的着生情况；学习用压滴法和悬滴法观察细菌的运动性。实验原理鞭毛是细菌的运动“器官”，一般细菌的鞭毛都非常纤细，其直径为0.01—0.02μm，在普通光学显微镜的分辨力限度以外，故需要用特殊的鞭毛染色法，才能看到。鞭毛染色是借媒染剂和染色剂的沉淀作
鞭毛染色法及活细菌运动性的观察
实验原理鞭毛是细菌的运动“器官”，一般细菌的鞭毛都非常纤细，其直径为0.01—0.02μm，在普通光学显微镜的分辨力限度以外，故需要用特殊的鞭毛染色法，才能看到。鞭毛染色是借媒染剂和染色剂的沉淀作用，使染料堆积在鞭毛上，以加粗鞭毛的直径，同时使鞭毛着色，在普通光学显微镜下能够看到。在显微镜下观察细菌
革兰氏染色法实验步骤简介
步骤 革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是： 1）涂片固定。 2）草酸铵结晶紫染1分钟。 3）蒸馏水冲洗。 4）加碘液覆盖涂面染约1分钟。 5）水洗，用吸水纸吸去水分。 6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸去水分。 7）蕃红染
简单染色法与革兰氏染色法
（一）细菌的简单染色法 1 目的 1.1 学习微生物 涂片、染色的基本技术。 1.2 掌握细菌的简单染色法。 1.3 初步认识细菌的形态特征，巩固学习油镜的使用方法和无菌操作技术。 2 原理 细菌的涂片和染色是微生物学实验中的一项基本技术。细菌的细胞小而透明，在普通的光学显微镜下不易识
蛋白质凝胶染色法实验
实验步骤总蛋白质的检测1. 总蛋白质色度法染色简便的目视检测、相对简单的使用及广大熟悉方法的用户基础群，使得考马斯亮蓝(C B B )—直是最普遍使用的总蛋白质凝胶染色剂。如需要比考马斯亮蓝染色更高的检测敏感度，那么银染法是可选择的色度方法。如果需要对切下的蛋白质进行质谱分析，则首选不会引入共价蛋白
蛋白质凝胶染色法实验
实验步骤 总蛋白质的检测 1. 总蛋白质色度法染色 简便的目视检测、相对简单的使用及广大熟悉方法的用户基础群，使得考马斯亮蓝(C B B )—直是最普遍使用的总蛋白质凝胶染色剂。如需要比考马斯亮蓝染色更高的检测敏感度，那么银
简述革兰氏染色法的实验原理
原理 通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其