血小板的活化、荧光染色与流式细胞仪分析
前言血小板活化试验，对于血小板功能、心血管疾病的研究，有重要意义。使用流式细胞仪进行多参数分析，可以特异灵敏地检测血小板表面标记，了解血小板的活化状态和反应性，并同时获得更多关于血小板的信息。在疾病监测、抗血小板治疗病人的筛选及治疗监测、预测并发症等方面有良好的应用前景。使用推荐的三色流式分析方法检测血小板活化的优点是：检测血小板的反应性。了解血小板活化进程。血小板先发生膜糖蛋白变化，然后是胞浆内颗粒释放到血小板外。同时检测多种血小板表面标志。高度灵敏。直接检测血小板的多种标志。使用全血，标本量少。操作简便快捷，将血小板人工激活减至最低。 BDIS血小板活化试剂组成为：PAC-1 FITC：早期血小板活化的标志物，即活化的 gpⅡb/Ⅲa复合物，抗体与活化后血小板膜表面的gpⅡb/Ⅲa复合物纤维蛋白原结合位点相结合。BDIS抗体为IgM型，建议使用PAC-1结合阻断剂RGDS做阴性对照。CD62P PE：血小板活化后......阅读全文
临床化学检查方法介绍血小板活化因子介绍
血小板活化因子介绍： PAF在体内含量很低，活性浓度为10-7-10-9mol/L，其半衰期为30s，不易捕捉;其结构与磷脂接近，不易分离纯化;它本身还有多个分子属，生物活性有很大差别。近年来国内外学者做了大量的工作，归纳起来PAF检测有三大类方法：①生物学检测法;②理化法;③免疫学方法。本节重点
人血小板活化因子(PAF)ELISA试剂盒
人血小板活化因子(PAF)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 PAF 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 PAF与单抗结合，加入生物素化的抗人PAF，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavi
小鼠血小板活化因子(PAF)ELISA试剂盒
小鼠血小板活化因子(PAF)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗小鼠 PAF 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 PAF与单抗结合，加入生物素化的抗小鼠PAF，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Strep
影响血小板活化扩增的药物—普拉格雷（Prasugrel)的简介
普拉格雷（Prasugrel)是第三代P2Y12 受体拮抗剂剂，它是前体药物，需要在肝脏内代谢成活性代谢产物后才能发挥不可逆的阻断ADP 的作用。和氯吡格雷相比，普拉格雷的代谢产物产生更快，活性更高。马晓兵将收治160 例冠心病患者随机分为两组，分别给予普拉格雷和氯吡格雷，结果显示两组治疗前后血
网织血小板——判断骨髓血小板生成、减少的最佳指标
前 言1969年Ingram和CooperSmith对失血性Beagle犬的外周血进行新亚甲蓝染色后镜检观察到部分清晰的浓染网状结构的血小板，命名为网织血小板(RP)。网织血小板是从骨髓中释放人血的新生血小板，其胞浆内不含细胞核和DNA，仅残留mRNA和粗面内质网，保留合成少量蛋白质的能力[1]。
荧光染色显示Y染色质法
实验方法原理在间期细胞核中，女性X染色质和男性Y染色质均可用特殊染色法显示出来。女性的两个X染色体中的一个，在间期时的染色质呈异固缩（Heteropyconosis），呈深染的小体称Barr氏体。Barr氏体位于间期细胞核内面，呈三角形或半月形小体，易为碳酸复红或硫堇等染料着色。正常女性Barr氏体
角膜荧光素染色的概述
角膜荧光素染色法，是一种了解角膜上皮有无缺损及角膜混浊是否为溃疡等的检查方法，可用1%～ 2%荧光素钠滴于下穹窿结膜囊内，1～2分钟后观察，角膜上皮缺损的部位有黄绿着色。 亦作泪膜破裂时间 (BUT) 的测定。
DNA荧光染色的样品制备
试剂、试剂盒 PBS仪器、耗材 DNA荧光染料 流式细胞仪实验步骤 DNA是细胞内含量比较恒定的参量，随着细胞增殖周期的各时相而发生变化。荧光染料（如PI）可选择性地定量嵌入核酸（DNA/RNA）的双螺旋碱基之间，与细胞特异性结合，DNA含量与荧光染料的结合量成正比，因此通过测定荧光强度可获知细胞的
核酸荧光染色技术在血液分析仪的最新应用
吴俊一概述 目前，五分类血液分析仪已经为许多大中型医院实验室所使用。五分类仪器不同于三分类仪器的主要区别在于：为了精确定量地检测白细胞的五种成份，各种五分类血液分析仪开始采用多种物理学原理（电阻抗、光散射、高频波技术），甚至设置专用检测通道和化学染色方法检测数目最少的嗜酸、嗜碱性粒细胞。 而高档
核酸荧光染色技术在血液分析仪的最新应用
一概述 目前，五分类血液分析仪已经为许多大中型医院实验室所使用。五分类仪器不同于三分类仪器的主要区别在于：为了精确定量地检测白细胞的五种成份，各种五分类血液分析仪开始采用多种物理学原理（电阻抗、光散射、高频波技术），甚至设置专用检测通道和化学染色方法检测数目最少的嗜酸、嗜碱性粒细胞。 而高档次的
流式细胞仪测定血小板胞浆游离钙浓度
血小板胞浆游离钙离子\[Ca2+\]i与血小板的许多形态与功能活动有关，如血小板形态的改变、聚集、收缩、释放、分泌等。也与血小板参与的凝血、血液流变性调节（如血液黏度、流动性等）以及动脉粥样硬化、脑血管疾病的发生和发展、血管内皮活动等生理、病理过程有关。研究发现\[1\]，当血小板内的\[Ca2+\
病毒免疫荧光实验_荧光抗体染色
实验材料细胞小玻片标本试剂、试剂盒荧光抗体实验步骤荧光抗体染色按不同反应机制，可有以下几种：1.直接法 用已知特异性病毒抗体与荧光素结合，制成荧光特异性抗体，直接与细胞或组织中相应病毒抗原结合，在荧光显微镜下即可见病毒或病毒抗原存在部位呈现特异性荧光。此法特异简便，但一种荧光抗体只能检查一种抗原，特
血细胞分析仪的选择技巧
自七十年代出现第一代血细胞分析仪以来，随着计算机技术、电子制造技术、激光技术及荧光素合成技术的不断发展，现代医疗器械公司生产的细胞仪已今非昔比，制造工艺、功能、精确度有了质的飞跃。 流式细胞仪生产厂商推出各种不同型号的流式细胞仪来满足用户的不同需要。现生产流式细胞的厂商全球至少有六家，各
中国临床流式细胞分析的发展
王建中 北京大学第一医院/第一临床医学院检验科 流式细胞分析又称为流式细胞术（flow cytometry, FCM），是一种大量、高速分析单个细胞的多种生理、生化、免疫、遗传等特性的细胞分析技术，在临床医学中有着广泛的应用。FCM是一种综合运用了激光技术、电子技术、半导体技术、计算机技术、流体
流式细胞术的应用
（一）流式细胞术在细胞生物学中的应用流式细胞术最早被应用于生物学研究领域，就是生物细胞周期和动力学的分析。近年来，DNA倍体分析已经越来越广泛应用于临床和基础研究，发挥越来越重要的作用。1． 有利于肿瘤的早期诊断和鉴别诊断 良性肿瘤或良性增生时不会出现非整倍体细胞（DI＞１），而恶性肿瘤则伴有相当数
流式细胞仪分析技术中荧光测量如何进行呢
荧光信号由被检细胞上标记的特异性荧光染料受激光激发后产生，发射的荧光波长与激发光波长不相同。每种荧光染料都有特定的激发波长，激发后又产生特定波长荧光。通过一些波长选择通透性滤光片，可将不同波长的散射光、荧光信号区分开。选择不同的单克隆抗体及荧光染料可以利用流式细胞仪同时测定一个细胞上的多个不同特
SYPRO－Ruby－荧光染色实验
实验方法原理到目前为止，在常用来检测经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后的蛋白质的方法中，SYPRORUBY 可能是最灵敏的突光染色方法了，它能检测出仅含 1?2ng 蛋白的条带。遗憾的是，如此微量的蛋白条带经染色后用肉眼却不可见，需要一个荧光扫描仪检测（SYPRORuby 的最大激发光和发射光的波长分别是
细胞免疫荧光染色
实验概要细胞免疫荧光染色实验原理利用抗原抗体反应，鉴定细胞是否表达某种蛋白。细胞经固定后，用特异性抗体（一抗）识别目的蛋白，再用一抗的抗体（二抗）识别一抗，二抗一般耦联荧光基团或化学反应基团，通过荧光或化学发光显示目的蛋白。主要试剂防淬灭剂、DPBS、指甲油、4% PFA、10 μg/mL PI、1
LSCM免疫荧光染色
免疫荧光染色 使用预冷的 PBS 缓冲溶液洗涤细胞，去除残留的培养液。立即加入 4% 多聚甲醛(PFA)固定液。在室温固定15 min。用 PBS 洗涤残留的固定液后，用 0. 5% Triton X-100 处理细胞 5 min，这样可以通透细胞膜，使抗体等大分子能通过细胞膜，进到固定细胞的内部。
免疫荧光染色技术
抗原物质固定剂固定条件（min）蛋白质抗原95%～100%乙醇室温3～10酶、激素丙 酮4℃ 30免疫球蛋白四氯化碳病 毒丙酮、四氯化碳、无水乙醇室温5～10或4℃ 30～60多糖、细菌等微火加热，甲醇、10%甲醛、丙酮室温5～10或4℃ 30～60类 脂 （异嗜性抗原）10%甲醛，10%佛茂尔（F
SYPRO－Orange－荧光染色实验
实验材料单向凝胶电泳分离后的蛋白样品仪器、耗材铝箔荧光扫描仪塑料容器实验步骤1.电泳结束后，将凝胶置于盛有试剂 A 的塑料容器中，试剂 A 的量要足够覆盖整块凝股。例如，一’块典型的 mini 胶（8 cmXIOcm 或 8 cmX8 cm) 需用 50~IOOml 的试剂 A。2.用铝箔遮盖好容器
吖啶橙荧光染色
【临床意义】 红细胞系统细胞核发深绿色荧光。原始红细胞有时可看到粉红色核仁。粒细胞系统细胞核发黄绿色荧光。原始粒细胞有时也可看到粉红色的核仁。但嗜酸性粒细胞的细胞核发深绿色荧光，比红细胞系统还要深一些。 淋巴细胞核的荧光稍带灰绿色。 各系统细胞的胞浆内因含有核糖核酸（RNA），所以均发红色荧光
组织免疫荧光染色
概述： 织免疫荧光染色多是使用组织的冰冻切片，因为在切片过程中基本上暴露了细胞和细胞核内结构，故不需要使用细胞通透剂(Triton-100,NP-40)。染色后的切片应放置冰箱内避光保存，防止荧光淬灭。常用的荧光素有：异硫氰酸(fluorescein isothiocyanate,FITC,发
原代细胞DNA与RNA的吖啶橙荧光染色法
基本原理：吖啶橙（acridine orange，AO）是一种常用荧光染料，吖啶橙与原代细胞内的DNA、RNA都有亲和力，但有一定的特异性，即结合后发不同颜色的荧光，DNA呈亮绿色，而RNA呈橘红色至火红色。此法简便快捷，既可染活原代细胞又可染固定原代细胞。用于直接染色观察活原代细胞或固定染色观
原代细胞DNA与RNA的吖啶橙荧光染色法
基本原理：吖啶橙（acridine orange，AO）是一种常用荧光染料，吖啶橙与原代细胞内的DNA、RNA都有亲和力，但有一定的特异性，即结合后发不同颜色的荧光，DNA呈亮绿色，而RNA呈橘红色至火红色。此法简便快捷，既可染活原代细胞又可染固定原代细胞。用于直接染色观察活原代细胞或固定染色观
细胞活化与细胞复苏
1. 收到细胞株包裹时， 请检查细胞株冷冻管是否有解冻情形， 若有请立即通知。细胞株请尽速开始培养， 或立即冷冻保存(置于–70 °C， 隔夜后， 移到liq N2)。细胞复苏的原则－快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细
荧光免疫染色和DAPI染色实验步骤
免疫染色实验方法和步骤免疫染色(immunol staining)包括免疫荧光(immunol fluorescence)、免疫组化(immunol histochemistry)、免疫细胞化学(immunol cytochemistry)等，可以参考如下步骤进行操作。 1. 样品准备(Sample
活化分析的概念
利用核反应使待测样品中的稳定核素转变为放射性核素后，由核反应截面、粒子注量率、射线能量、半衰期和放射性活度来确定待测物的含量。可分为中子活化分析、带电粒子活化分析和光子活化分析。活化分析作为高灵敏度核分析技术，在生物样品分析和高纯材料中微量材料的分析，以及在环境科学、考古学和法医学等领域广泛应用。
活化分析的原理
用一定能量和流强的中子、带电粒子或γ射线同样品中所含核素发生核反应，使之成为放射性核素（这个过程称为活化），测量此放射性核素的衰变特性（如半衰期、射线的能量和射线的强度等）来确定待分析样品中所含核素的种类及其含量 [2] 。如用热中子活化分析砷，所用的核反应为：n+75As→76As*+γ或记为7
活化分析的概念
活化分析（activation analysis）是指用一定能量和流强的中子（包括 热中子、超热中子、快中子、冷中子）、带电粒子（质子、氘子、 3He、 4He、重离子等）或者高能γ光子轰击试样，使待测原子受激活化，然后测定由核反应生成的放射性核素衰变时放出的缓发辐射，或者直接测定核反应时放出的瞬发