体外肝细胞损伤模型建立(CCl4和H2O2)
1 大鼠肝细胞的分离和培养 大鼠4%戊巴比妥麻醉,门静脉插管,先以无钙灌流液灌流,继以37℃通入O2的Ⅳ型胶原酶灌流液继续循环灌流15 min。将肝脏移至一平皿内,轻轻撕去肝包膜后,加入含5%小牛血清的清洗液,用吸管吹打成单个肝细胞悬液,200目尼龙网过滤,低速离心(500 r·min-1,1 min,4℃)弃上清,同法用清洗液反复洗3次。然后用完全1640培养液(内含10%小牛血清,105 U·L-1青霉素,100 mg·L-1链霉素和10 mg·L-1胰岛素)制成1×109个·L-1肝细胞悬液。分离的肝细胞经0.6%台盼蓝拒染法测得细胞活力大于90%,高碘酸雪夫反应显示糖原法鉴定99%为肝实质细胞。 将上述肝细胞悬液分别加入24孔(每孔1 ml)和96孔(每孔0.1 ml)培养板中,置37℃,5%CO2培养箱中培养。12~16 h后可见肝细胞贴壁于培养板孔底上生长。 2 CCl4诱导肝细胞坏死性损伤模型的建立 肝细胞培养1......阅读全文
小鼠脑出血模型的建立
实验材料 小鼠试剂、试剂盒 戊巴比妥钠仪器、耗材 钻孔器注射器含抗凝血剂的试管鼠板缝合方针和线实验步骤 1.固定小鼠 a.用绳子将已麻醉的小鼠俯卧(背朝上)固定在鼠板上,绳子用活结,这样不易打滑。固定时要保持小鼠的两只前脚和两只后脚分别在一条直线上。 b.用棉花将小鼠的头微微垫高,这样方便切开皮肤。
肿瘤动物模型建立实验
一、肿瘤动物模型建立的意义: (1)评价抗肿瘤免疫治疗的疗效; (2)作为抗肿瘤药物筛选模型; (3)为肿瘤转移研究提供更好的研究平台; (4)为研发抗肿瘤转移性药物提供良好的实验工具。 二、诱发性肿瘤动物模型 实验方法原理:诱发性肿瘤动物模型是指研究者用化学致癌剂、放射线、致癌病
小鼠脑出血模型的建立
实验材料小鼠试剂、试剂盒戊巴比妥钠仪器、耗材钻孔器注射器含抗凝血剂的试管鼠板缝合方针和线实验步骤1.固定小鼠 a.用绳子将已麻醉的小鼠俯卧(背朝上)固定在鼠板上,绳子用活结,这样不易打滑。固定时要保持小鼠的两只前脚和两只后脚分别在一条直线上。 b.用棉花将小鼠的头微微垫高,这样方便切开皮肤。 2.钻
振动筛的模型建立
振动筛筛箱模型建立 利用有限元分析ANSYS软件建立筛箱的有限元模型,有两种方法,一种是直接利用ANSYS软件建立筛箱的实体模型,或在PRO/E软件中建立实体模型然后导入到ANSYS中,这种方法要耗费较长的时间建模、计算,而且有可能计算不出理想结果;第二种方法是利用ANSYS软件中的壳单元和板
肿瘤动物模型建立实验
一、肿瘤动物模型建立的意义: (1)评价抗肿瘤免疫治疗的疗效; (2)作为抗肿瘤药物筛选模型; (3)为肿瘤转移研究提供更好的研究平台; (4)为研发抗肿瘤转移性药物提供良好的实验工具。 二、诱发性肿瘤动物模型 实验方法原理:诱发性肿瘤动物模型是指研究者用化
肿瘤动物模型如何建立?
常规的动物实验,除了皮肤或者骨的缺损修复,癌症也是其中重要的一种。目前,癌症仍然威胁人类的一大疾病,因此需要动物实验来深入了解如何有效进一步治疗癌症。 通常,动物模型一般是研究者利用化学致癌剂或者致癌病毒诱发实验动物肿瘤。那么肿瘤动物实验模型建立的优点主要有:抗肿瘤药物的筛选以及疗效;抗肿瘤转
反映肝细胞损伤的试验的概述
反映肝细胞损伤的试验:包括血清酶类及血清铁等,以血清酶检测常用,如谷丙转氨酶( ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ACP)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)等等。临床表明,各种酶试验中,以ALT、AST能敏感地提示肝细胞损伤及其损伤程度,反应急性肝细胞损伤以ALT最敏感,反映其损伤程度则A
反映肝细胞损伤的试验检查作用
对于诊断肝功能受损有重要意义。异常结果:急性肝炎早期肝受损时,大多数ALT和胞浆部分的AST被释放出来,一般ALT都高于AST,致使AST/ALT降至0.56左右,但如果AST大幅升高,甚至和ALT发生倒挂现象,表明肝损加重。
小分子“魔法药水”体外实现人类原代肝细胞逆转化和扩增
上海交通大学医学院附属仁济医院鄢和新教授和第二军医大学东方肝脏外科医院王红阳院士研究团队发表了最新原创性成果“Expansion and differentiation of human hepatocyte-derived liver progenitor-like cells and the
臭氧损伤衰老动物模型
实验材料2-3月灵小鼠20月龄大鼠试剂、试剂盒水混合饲料垫料仪器、耗材木制臭氧发生柜鼠笼饮水壶衰老的自由基学说认为:衰老与自由基引起的生物膜脂质过氧化导致膜结构损伤和功能失活有密切关系。生理情况下,自由基不断产生,也不断被机体内防御自由基的酶系统消除,从而维持生理性低水平、有利无害、稳定平衡的自由基
肾小管细胞氧化性损伤模型
材料:DMEM培养基(Gibco BRL Co生产), 无糖DMEM培养基(Gibco BRL Co生产),NRKSIE 鼠。肾小管细胞株(购于华西医科大学内科实验室),乳 酸钠(国产分析纯试剂)。 方法 肾小管细胞培养 NRKSIE鼠肾小管细胞 用0.25% 胰蛋白酶消化,将小管细胞分离成单个细胞
《Hepatology》补充抗氧化剂抗癌?不是想吃就能吃!
抗氧化剂在癌症的发生和发展中的角色越来越有争议,越来越多的证据显示不同的抗氧化剂在不同类型的癌症进程中,既有可能会起到积极的预防作用,又或者会加速癌症的发展。尽管不能全盘否认抗氧化剂在预防肿瘤方面积极的作用,该不该使用抗氧化剂以及如何使用,都给人们造成了相当的困扰。第二军医大学近日于《Hepat
全球粮食系统环境影响模型建立
据英国《自然》杂志10月10日在线发表的一篇可持续性研究文章,科学家建立了一个全球粮食系统模型,经过分析指出,如果不采取行动应对人口和收入水平的预期变化,在2010—2050年期间,粮食系统(为全球人口提供食物所涉及的过程和基础设施)对环境造成的影响可能会上升50%—90%。研究人员分析了几种环
肿瘤动物模型建立实验(一)
实验方法原理 诱发性肿瘤动物模型是指研究者用化学致癌剂、放射线、致癌病毒诱发动物的肿瘤等。实验材料 肿瘤细胞小鼠试剂、试剂盒 无血清培养基质3%中性甲醇石腊仪器、耗材 低温离心机血球计数器游标卡尺实验步骤 一、肝癌 1.二乙基亚硝胺(DEN)诱发大白鼠肝癌(1)取体重250 g左右的封闭群大白鼠,雌
几种休克动物模型得建立
1.Hypovolemic shock(MODS Multiple organ dysfunction syndrome): 低血容量性休克模型Wistar大鼠,4. 5 %异戊巴比妥(80 mg/ kg )? 在25 ℃室温下腹腔内给药麻醉?,右股动脉插入套管针 ,连接多导生理记录仪,监测血压;左
肿瘤动物模型建立实验(二)
5、鼻咽癌(1)二甲基胆蒽(MC)诱发大鼠鼻咽癌① 取直径2~3 mm的硬质塑米管,在酒精灯上小火拉成锥形,每段长约3.5 cm,管内填以结晶体MC。② 小管一端用火封闭,以防药物外溢,尖端用针刺数孔,使MC能从小妃溢出。③ 取体重120 g左右的大白鼠,雌雄均可,乙醚麻醉后,由前鼻孔将上述含MC的
肿瘤动物模型建立实验(二)
2.二烃黄樟素(Dihydrosafrole)诱发大鼠食管癌(1)二烃黄樟素是一种制备啤酒的调味品,在大鼠饲料中加入百万分之二千五百至一万(2500~10000 ppm)黄樟素,就能引起20~75%的食管癌。3.甲基苄基亚硝胺诱发大鼠食管癌(1)用0.2%或0.005% 的甲基苄基亚硝胺水溶液,给动
肿瘤动物模型建立实验(一)
一、肿瘤动物模型建立的意义:(1)评价抗肿瘤免疫治疗的疗效;(2)作为抗肿瘤药物筛选模型;(3)为肿瘤转移研究提供更好的研究平台;(4)为研发抗肿瘤转移性药物提供良好的实验工具。二、诱发性肿瘤动物模型实验方法原理:诱发性肿瘤动物模型是指研究者用化学致癌剂、放射线、致癌病毒诱发动物的肿瘤等。实验材料:
肿瘤动物模型建立实验(三)
5、AKR白血病模型AKR小鼠为白血病高发品系,淋巴细胞白血病发病率雄性76%~90%,雌性为68%~90%。6、实验用6~12月龄AKR小鼠, 此时鼠的脾和淋巴结肿大,血象异常。7、经血液检查确诊为白血病后的次日, 配对分组并开始给予受试药,观察结果。8、结果判定观察指标:末梢血象,白细胞数,淋巴
LPS炎症模型建立不出来
目前对内毒素致病机理的研究已达分子水平,研究表明当L PS 与单核/ 巨噬细胞表面的mCD/ 4结合后, 通过一系列细胞内信号传导使NF -κB 活化, 活化的NF -κB 进入细胞核与靶基因的启动子区域的特定序列结合, 迅速诱导mRNA 合成, 释放多种细胞因子(cytokines) 如TNF -
反映肝细胞损伤的试验指标解读结果
ALT(谷丙转氨酶)正常值:男5-40 U/L,女5-35 U/L。 AST(谷草转氨酶)正常值:8-40 U/L。 AST/ALT(谷草/谷丙)正常值:1.0-2.0。
关于反映肝细胞损伤的试验的介绍
反映肝细胞损伤的试验:包括血清酶类及血清铁等,以血清酶检测常用,如谷丙转氨酶( ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ACP)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)等等。临床表明,各种酶试验中,以ALT、AST能敏感地提示肝细胞损伤及其损伤程度,反应急性肝细胞损伤以ALT最敏感,反映其损伤程度则A
慢性肝细胞损伤时的血浆蛋白变化
慢性肝细胞损伤时血浆蛋白的变化是关于医学检验职称的生化检验知识,医学|教育网搜集整理了相关内容与考生分享,希望给予大家帮助!血浆白蛋白可反映肝脏合成功能,代表肝的储备功能。此外前白蛋白(PA)及抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)亦能很好地反映肝脏的储备能力,藉以判断慢性肝细胞损伤的病变程度。γ~球蛋白增高的程度
慢性肝细胞损伤的检验指标临床生化
慢性肝细胞损伤的检验指标:(一)慢性肝细胞损伤的酶学指标γ-GT在反映慢性肝细胞损伤及其病变活动时较转氨酶敏感。γ-GT活性75%存在于肝细胞微粒体,当慢性肝病有活动性病变时,诱导微粒体酶合成增加。在急性肝炎恢复期ALT活性已正常,如发现γ-GT活性持续升高,即提示肝炎慢性化;慢性肝炎即使ALT正常
培养乳鼠心肌细胞的缺氧损伤模型和缺氧预处理(APC)模型
原代心肌细胞培养及APC模型的制作参照先前报道的方法[2]。即取出生后1-2 d乳鼠心尖部组织, 胰酶消化, 离心后用含20%小牛血清的DMEM培养基制成细胞悬液, 过滤, 按差速贴壁分离法纯化心肌细胞, 以1×105 cells/cm2接种于24孔板, 每24 h更换培养液。贴壁生长2 d, 于实
白蛋白分泌、CYP3A4活性分析
原代人类肝细胞(PHH)体外培养模型人类肝脏功能,可以产生与真实体内药物代谢非常相似的代谢谱。而PHH培养是研究体外肝细胞生物学、肝功能和药物诱导肝毒性的金标准,但常规的2D水平 PHH培养由于受到去分化和肝特异性功能迅速丧失的限制,所以我们需要寻求一种更稳定的体外模型构建方法,从而能够真实反映体内
肿瘤动物模型建立实验——诱发性肿瘤动物模型
肿瘤动物模型的建立可应用于:(1)评价抗肿瘤免疫治疗的疗效;(2)作为抗肿瘤药物筛选模型;(3)为肿瘤转移研究提供更好的研究平台;(4)为研发抗肿瘤转移性药物提供良好的实验工具。实验方法原理诱发性肿瘤动物模型是指研究者用化学致癌剂、放射线、致癌病毒诱发动物的肿瘤等。实验材料肿瘤细胞小鼠试剂、试剂盒无
肿瘤动物模型建立实验——自发型肿瘤动物模型
实验方法原理自发性肿瘤动物模型是指未经人为处理;自然发生的肿瘤动物模型,主要有自发性乳腺癌模型和自发性白血病模型。实验材料C3H小鼠A系小鼠CBA小鼠试剂、试剂盒受试药仪器、耗材记号笔脚规实验步骤一、自发性乳腺癌小鼠模型类型 1. C3H小鼠:繁殖用雌鼠自发性乳腺癌发生率为85%~100%。 2.
中外科学家建立食蟹猴胚胎3D长时程体外培养模型
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/5/500458.shtm2023年5月11日,中国科学院动物研究所/北京干细胞与再生医学研究院和美国宾夕法尼亚大学的研究人员在《细胞》杂志在线发表封面文章。他们建立了一个可支持食蟹猴胚胎体外发育至受精后25天
脊髓机械性损伤模型的制作实验——大鼠脊髓NYU模型
实验方法原理脊髓挫伤是临床最常见的脊髓损伤类型(交通事故、高空坠物、运动损伤等造成),NYU模型是应用最广泛的鼠类脊髓挫伤模型,该模型可以很好地模拟临床,适用于病理和脊髓再生等多方面研究。双侧椎板(T8)去除术后,使用脊髓撞击仪(NYU大鼠脊髓撞击仪I型),以不同重量的下落重物撞击脊髓,造脊髓撞击伤