新技术同时检测基因和蛋白表达

美国俄亥俄州立大学的研究人员近日开发出一种新技术,能同时观察细胞中的基因数量和蛋白表达。此技术能够详细分析基因状态以及相应蛋白表达之间的关联,并更透彻地了解癌症及其他复杂疾病。该成果发表在《Neuro-Oncology》上。 这种新技术称为荧光原位基因蛋白分析(fluorescent in situ gene protein assay)。它将传统的荧光原位杂交(FISH)与原位邻位连接分析(in situ proximity ligation assay,简称PLA)相结合。 PLA分析采用核酸适体(aptamer)或单/多克隆抗体-核酸复合物作为邻位连接探针。当一对邻位探针同时识别同一个目标蛋白分子时,它们将在空间......阅读全文

GFP(绿色荧光蛋白基因)的免疫印迹1

[实验原理]免疫印迹(Western blotting 或 Immunoblotting)一般由凝胶电泳、样品的印迹和免疫学检测三个部分组成。第一步是做SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳,使待测样品中的蛋白质按分子量大小在凝胶中分成带。第二步把凝胶中已分成条带的蛋白质转移到一种固相支持物上,用得最多的材料

多药耐药基因编码蛋白(P170)的表达

实验步骤             展开

载脂蛋白e基因分型的检查过程

  应用碘化钠法提取模板DNA,聚合酶链反应(PCR)特异性扩增Apo E基因含112 位和158 位氨基酸的基因序列,扩增产物用限制内切酶Hha I酶切,聚丙烯酰胺凝胶电泳后,观察酶切位点的限制性片段长度多态性(RFIP)图谱。  ApoE表型检测即可以以VLDL为样品,又可以直接以血清(或血浆)

江苏成功诞生α乳白蛋白转基因克隆奶山羊

  记者9月2日从江苏省农业科学院畜牧研究所获悉,该所目前已陆续诞生多只转人α-乳白蛋白基因的克隆奶山羊,标志着江苏在相关技术领域迈入国内先进行列。  据动物遗传资源与草食家畜育种项目组负责人曹少先博士介绍,转基因克隆奶山羊的诞生经历了基因克隆、载体构建、细胞转染、体细胞核移植及胚胎移植等

一种杂交蛋白可按需裁编基因片断

  据美国科学促进会8月30日报道,美国爱荷华州立大学研究人员研发出一种杂交蛋白质,其能使活细胞中双链DNA(脱氧核糖核酸)在需要的位置断裂,并可接入需要的功能基因片段。这一成果有望带来更好的个性化基因疗法。   遗传发育与细胞生物学副教授杨冰(音译)及其团队把两种不同细菌的蛋白质

基因突变致蛋白质合成异常分析(五)

   表4-2选择性免疫蛋白缺乏症分型IgA缺乏症选择性IgA缺乏症共济失调-毛细血管扩张症Nezelof综合症慢性皮肤粘膜念珠菌病SIgA(分泌型)缺乏症IgA缺乏症IgA缺乏症选择性IgM缺乏症Wiskott-Aldrich综合征IgE缺乏症IgA-IgM缺乏症IgA-IgG缺乏症L链缺乏症  

Nat-Com:多功能蛋白或可阻断寄生基因进行“跳跃”

  近日研究发现,大多数生物包括人类都有一种叫做“跳跃基因”的寄生DNA片段,它们将自己插入到DNA分子中破坏遗传程序。这一现象会导致与年龄相关疾病的产生,如癌症。但是罗彻斯特大学的研究人员报告说,在小鼠实验中,当多功能蛋白质为执行另一种功能而阻止它们受控制时,老鼠的“跳跃基因”就变得异常活跃。  

英发现控制人体血红蛋白含量基因

  英国研究人员说,他们发现了一种控制人体血红蛋白含量的基因,这将有助于研制治疗贫血症等病症的药物。   英国帝国理工学院研究人员11日在《自然遗传学》杂志上报告说,他们对1.6万人的基因图谱和血红蛋白含量进行了分析。结果显示,基因TMPRSS6控制着人体内的血红蛋白含量。研究对象中既有欧洲人也有

蛋白激酶C基因的结构特点和主要作用

蛋白激酶C(PKC)是一个丝氨酸和苏氨酸特异性蛋白激酶家族,可被钙和第二信使甘油二酯激活pkc家族成员磷酸化多种蛋白质靶点,参与多种细胞信号传导途径。PKC家族成员也是一类肿瘤促进剂佛波酯的主要受体pkc家族的每个成员都有一个特定的表达谱,并被认为在细胞中发挥着独特的作用。该基因编码的蛋白是pkc家

生化检测项目载脂蛋白E基因分型介绍

载脂蛋白E基因分型介绍:  载脂蛋白E(ApoE)是一种富含精氨酸的碱性蛋白质,ApoE在脂类代谢中起着重要的作用。载脂蛋白(Apo)E基因常见的等位基因型分为三种ε2、ε3、ε4,ApoE基因型的检测可以作为临床辅助诊断和风险率估计的指标。载脂蛋白E基因分型正常值:  载脂蛋白E主要存在于CM、V

基因突变致蛋白质合成异常分析(一)

   蛋白质性质是由DNA分子上碱基数量和顺序决定的。如果DNA分子的碱基数量或顺序发生变化,由它编码的蛋白质结构就发生相应的改变。由于基因突变导致蛋白质分子质和量异常,从而引起机体功能障碍的一类疾病称为分子病(molecular disease)。  分子病种类很多,根据各种蛋白质的功能可将分子病

我学者发现大豆蛋白数量性状基因位点

  国际学术期刊《理论与应用遗传学》日前在线发表了河南省农科院研究员卢为国关于大豆蛋白方面的最新研究成果。卢为国在以《大豆中控制水溶性蛋白含量的数量性状基因定位》为题的研究论文中,报道了两个大豆水溶性蛋白的QTL位点,根据目前的文献检索结果,这在国际上尚属首次。   大豆是人类重要的蛋白来源,大豆

载脂蛋白e基因分型的注意事项

  不合宜人群:在血脂正常的人群。  检查前禁忌:保持情绪稳定,切忌急躁、激动或闷闷不乐。  检查时要求:谨遵医嘱,配合医生。

报告基因实验——荧光蛋白(FP)-的显微检测

实验材料活体组织仪器、耗材落射荧光显微镜汞灯实验步骤表达突光蛋白的材料一般首先用落射荧光显微镜(epi-fluorescent  microscopy) 来观察 ,尤其当研究表皮上表达的荧光蛋白或者用反褶积软件去掉从焦点之外采集的荧光时[18]。然而,对于较厚的材料,必须使用共聚焦显微镜,因为它可以

载脂蛋白e基因分型的注意事项

  不合宜人群:在血脂正常的人群。  检查前禁忌:保持情绪稳定,切忌急躁、激动或闷闷不乐。  检查时要求:谨遵医嘱,配合医生。

如何通过chip确定与基因结合的蛋白质

染色质免疫沉淀,所以对ChIP实验过程的每一步都应设计相应的对照.当检测如转录调控因子一类的DNA结合蛋白,在生理状态下把细胞内的DNA与蛋白质交联在一起.如果你是只知道你的蛋白.染色质免疫沉淀技术一般包括细胞固定,可是双链或者是单链,将与目的蛋白相结合的DNA片段沉淀下来,在非变性的聚丙烯凝胶电泳

载脂蛋白e基因分型的临床意义

  异常结果:光镜、电镜检查发现ApoE缺乏鼠的视网膜内、外核层细胞数量明显降低,外核层细胞核染色质浓缩,核周空泡形成,玻璃膜增厚,弹力层不连续甚至结构不清,从而发生AMD的眼底损害。  需要检查的人群:该试验不是用于筛查普通人群的,它是在非常特殊情况下使用并提供医生额外的信息。

载脂蛋白e基因分型的临床意义

  异常结果:光镜、电镜检查发现ApoE缺乏鼠的视网膜内、外核层细胞数量明显降低,外核层细胞核染色质浓缩,核周空泡形成,玻璃膜增厚,弹力层不连续甚至结构不清,从而发生AMD的眼底损害。  需要检查的人群:该试验不是用于筛查普通人群的,它是在非常特殊情况下使用并提供医生额外的信息。

蛋白质芯片对于基因表达的筛选的应用

从人胎儿脑的cDNA文库中选出92个克隆的粗提物制成蛋白质芯片,用特异性的抗体对其也进行检测,结果的准确率在87%以上,而用传统的原位滤膜技术准确率只达到63%。与原位滤膜相比,用蛋白质芯片技术在同样面积上可容纳更多的克隆,灵敏度可达到pg级。

基因突变致蛋白质合成异常分析(三)

   2.地中海贫血由于珠蛋白基因缺失或突变导致某种珠蛋的链合成障碍,造成α链和β链合成失去平衡面导致的溶血性贫血称为地中海贫血(thalassemia)。根据合成障碍的肽链不同可把地中海贫血分为α和β地中海贫血两类。此外还有少见的δβ和γβ地中海贫血。  (1)α地中海贫血(α-thalassem

载脂蛋白e基因分型的正常值

  载脂蛋白E主要存在于CM、VLDL、IDL和部分HDL中, 正常人血浆ApoE浓度为0.03-0.05g/L。Apo E的浓度与血浆甘油三酯含量呈正相关。

基因突变致蛋白质合成异常分析(六)

   目前已知的DMD基因突变主要为缺失型,约占病例的50%-60%;重复(duplication)次之,约占6%,有两个缺失热区:即5’端的第4-21外显子(占缺失的20%);另一为第45-52外显子(占54%-60%)。内含子44约160-180kb,断裂频率最高,缺失导致移码突变者,多数会引起

关于治疗性疫苗—基因工程蛋白疫苗的介绍

  (1) 基因工程蛋白疫苗— 亚单位疫苗  用于慢乙肝治疗的亚单位蛋白疫苗是通过基因工程方法生产的重组HBsAg,包含HBV包膜蛋白的不同组分(preS1、preS2、S),并通过哺乳动物细胞及酵母菌系统表达。用此类疫苗治疗慢乙肝,主要依据预防性疫苗的常规剂量,增加了免疫的次数,结果虽然提示具有一

让基因沉默提高酵母中的蛋白质产量

  通过使基因沉默,研究人员成功地显著增加了酵母中的蛋白质产量。该方法可为制药蛋白和工业酶生产工业产出更好的工程化菌株。  来自丹麦科技大学诺和诺德基金会生物可生化性中心、查尔默斯技术大学和KTH皇家理工学院的研究人员已经鉴定出9个基因靶点,通过组合沉默使工程酵母细胞中的蛋白质产量提高了2.2倍。G

载脂蛋白e基因分型的检查过程

  应用碘化钠法提取模板DNA,聚合酶链反应(PCR)特异性扩增Apo E基因含112 位和158 位氨基酸的基因序列,扩增产物用限制内切酶Hha I酶切,聚丙烯酰胺凝胶电泳后,观察酶切位点的限制性片段长度多态性(RFIP)图谱。  ApoE表型检测即可以以VLDL为样品,又可以直接以血清(或血浆)

关于基因表达的机制蛋白质运输的介绍

  许多蛋白质定位于细胞质以外的其它细胞器,多种信号序列(信号肽)负责将蛋白质引导至它们应该在的细胞器。原核生物中,由于细胞的有限区室化,这通常是一个简单的过程。真核生物却存在多种不同的靶向过程以确保蛋白质到达正确的细胞器。  并非所有蛋白质都保留在细胞内,许多蛋白质如消化酶、激素和细胞外基质蛋白通

蛋白印迹法有什么作用?可用来基因检测么

  蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。  与Southern Blo

GFP(绿色荧光蛋白基因)的免疫印迹2

第二部分:免疫印迹染色[仪器、材料与试剂](一)仪器与器具1.电泳仪(要求为大电流低电压)2.电泳转移槽及转移夹3.水平摇床4.小塑料盒5.镊子6.搪瓷盘(二)材料1.醋酸纤维膜2.滤纸3.一次性塑料手套(三)试剂1.转移电泳缓冲液25mmo1/L Tris,192mmo1/L 甘氨酸,20%甲醇,

非法重组频率挖掘优质蛋白玉米修饰基因测定

  12月10日,中国科学院分子植物科学卓越创新中心/植物生理生态研究所巫永睿研究组团队在Communications Biology 杂志上在线发表题为High frequency DNA rearrangement at qγ27 creates a novel allele for Quali

蛋白质磷酸化调控基因表达的机制

组蛋白的磷酸化一般导致对应区域基因表达的上调。表观遗传调控包括DNA甲基化,组蛋白修饰(磷酸化,乙酰化,甲基化等)和小RNA调节,是在DNA序列的基础上对基因表达的调节,是细胞分化的本质。如果除去表观遗传调控,人体各个细胞应该是一样的,但是组蛋白修饰在DNA复制过程中不但可以被复制,也可以在相应蛋白