让基因沉默提高酵母中的蛋白质产量
通过使基因沉默，研究人员成功地显著增加了酵母中的蛋白质产量。该方法可为制药蛋白和工业酶生产工业产出更好的工程化菌株。 来自丹麦科技大学诺和诺德基金会生物可生化性中心、查尔默斯技术大学和KTH皇家理工学院的研究人员已经鉴定出9个基因靶点，通过组合沉默使工程酵母细胞中的蛋白质产量提高了2.2倍。Guokun Wang “这个概念可以推广到其他酵母蛋白生产者，甚至一些丝状真菌和哺乳动物细胞工厂。任何一个与高级蛋白质生产者合作的组织都可以利用这些发现，”来自诺和诺德基金会生物可生化性研究中心的第一作者、博后Guokun Wang说。 本文提高了一种模型蛋白，α-淀粉酶（α-amylase）的酵母生产，证明了细胞内目标蛋白（重组蛋白）的总生产价值。 沉默是一种强有力的工具 通过RNA干扰（RNAi）确定几种适合沉默的基因靶点，获得优化的酵母菌株。通过构建与基因互补的短/长链RNA，干扰RNA与互补的mRNA相互作用并引导其降......阅读全文
让基因沉默提高酵母中的蛋白质产量
通过使基因沉默，研究人员成功地显著增加了酵母中的蛋白质产量。该方法可为制药蛋白和工业酶生产工业产出更好的工程化菌株。 来自丹麦科技大学诺和诺德基金会生物可生化性中心、查尔默斯技术大学和KTH皇家理工学院的研究人员已经鉴定出9个基因靶点，通过组合沉默使工程酵母细胞中的蛋白质产量提高了2.2倍。G
甲醇酵母基因表达系统
1 甲醇酵母表达系统的特点 1.1 宿主 七十年代巴斯德毕赤酵母曾被用于生产单细胞蛋白（SCP），有很好的发酵基础，菌体密度可达100g/L干重。其生长培养液的组分包括无机盐、微量元素、生物素、氮源和碳源，廉价而无毒。它能在以甲醇为唯一碳源的培养基中快速生长，其中醇氧化酶AOX——甲醇代谢途径
酵母菌基因克隆实验
实验材料 酵母菌实验步骤 1. 用含LEU 2作为选择标志的酵母菌DNA文库转化lea 2 cdc 101-1酵母菌株，在23℃培养，依据插入片段的大小，筛选2 000~20 000个Leu+转化体。 2. 影印平板转化体，将其转印到预热的选择性平板，并于37℃培养筛选互补温感突变的表型。过
酵母蛋白质和－RNA－的制备（稀碱法）
实验概要本实验介绍了从酵母中分离制备蛋白质和 RNA 的原理和方法。实验原理酵母细胞富含蛋白质和核酸。用稀碱液（0.2% 的氢氧化钠）处理酵母使细胞裂解，离心收集上清液，得到酵母核蛋白抽提液。用盐酸调节抽提液 pH 至 3.0 （核蛋白的等电点），核蛋白溶解度下降大量沉出，离心收集沉淀物为酵母蛋白质
转基因酵母乙肝疫苗的概述
转基因重组酵母乙肝疫苗是一种乙肝表面抗原（HbsAg）亚单位疫苗，它系采用转基因的方法将乙肝病毒[1]表达表面抗原的基因进行质粒构建，转入进入啤酒酵母菌或者汉逊酵母中，通过培养这种重组酵母菌来表达乙肝表面抗原亚单位。这种乙肝表面抗原亚单位具有原料易得、产量大、安全、高效等特点。
酵母菌基因克隆实验——互补法
实验材料酵母菌实验步骤1. 用含LEU 2作为选择标志的酵母菌DNA文库转化lea 2 cdc 101-1酵母菌株，在23℃培养，依据插入片段的大小，筛选2 000~20 000个Leu+转化体。 2. 影印平板转化体，将其转印到预热的选择性平板，并于37℃培养筛选互补温感突变的表型。过夜培养之
大连化物所实现甲醇酵母高效基因编辑
近日，中国科学院大连化学物理研究所生物催化创新特区研究组研究员周雍进团队实现了甲醇酵母的高效精确基因编辑。该团队在甲醇酵母代表菌株多形汉逊酵母中，建立了具有高同源重组效率的精准基因组编辑工具，初步揭示了同源重组和非同源末端连接修复方式的竞争机制；利用该高效遗传操作平台，构建了多形汉逊酵母细胞工厂
概述酿酒酵母的基因组序列
1996年6月，在国际互联网的公共数据库中公布了酿酒酵母的完整基因组顺序，它被称为遗传学上的里程碑。因为首先，这是人们第一次获得真核生物基因组的完整核苷酸序列；其次，这是人们第一次获得一种易于操作的实验生物系统的完整基因组。 [10] 在酿酒酵母测序计划开始之前，人们通过传统的遗传学方法已确定
酵母遗传学方法2：蛋白质的抽提
酵母蛋白质的抽提此法抽提的酵母蛋白适用于SDS凝胶电泳和Western印迹分析。1．从OD600＝2的细胞培养物中抽提酵母蛋白质。培养物的一种简单制备方法是将细胞接种到5ml YPD中，过夜培养后获得指数培养物（OD600＝0.5～2.0）。2．在水浴上把OD600＝2的细胞培养物转到含有2ml的5
成都生物所酵母耐热基因研究获进展
第二代燃料乙醇具有清洁、原料来源广泛、可再生等诸多优点，有望替代传统化石能源的使用，缓解当前人类社会面临的日趋严重的能源危机及环境污染等问题，成为目前各国研究的热点。木质纤维素原料的高效、低成本酶解是纤维素乙醇能否实现产业化的关键之一。目前广泛使用的同步糖化发酵方式(SSF)，能使糖化和发酵在时
美用转基因酵母造出止痛药
科技日报北京8月17日电 酵母不但能用来发面蒸馒头，也能用来制造止痛药。日前，发表在《科学》上的一项研究介绍了一种用转基因酵母生产吗啡类止痛药的方法。研究人员称，该法不但能将药物的生产周期从一年缩短到几天，还能将成本降低到传统方法的十分之一，未来技术成熟后，有望大幅降低相关药物的零售价格。 止
人肌肉基因首次插入面包酵母DNA
荷兰研究人员成功将人类肌肉基因插入面包酵母的DNA中，这是科学家首次将如此重要的人类特征植入酵母细胞，得到的人源化酵母模型，可作为药物筛选和癌症研究工具。相关论文发表于《细胞报告》杂志。 代尔夫特理工大学研究团队添加到酵母细胞中的特征由一组十个基因控制，人类没有这些基因就无法生存。这组基因包含了
酵母基因组DNA简易高效提取方案
1. 10ml菌液过夜培养至饱和（OD600值为2-3） 2. 离心沉降细胞（Sorvall中以2000rpm的速度），然后以冷的、等体积的无菌蒸馏水洗涤 3. 将细胞沉淀在200μl 裂解缓冲液中重悬浮，然后加入约300μl 玻璃珠和200μl的1：1苯酚：氯仿混和液 4. 漩涡摇匀1-2min
转基因酵母乙肝疫苗的制备方法
基因重组乙肝疫苗是利用转基因技术，构建含有乙肝病毒HBsAg基因的重组质粒，转入酵母（啤酒酵母. 汉逊酵母或毕赤酵母）或重组中国仓鼠卵巢细胞（CHO）表达的乙型肝炎表面抗原，在繁殖过程中产生于未糖基化的HBsAg多肽，经破碎酵母菌体，颗粒形未糖基化的HBsAg多肽释放，经纯化，灭活，加氢氧化铝后
转基因酵母乙肝疫苗的用法用量
1.剂量：20μg剂量疫苗（1.0ml悬液）：用于成人和15岁以上儿童接种。 2.初免程序：为达到最佳免疫效果，需连续进行三次肌肉注射。推荐有两种初免程序： （1）加速程序：即0、1、2月免疫程序。 （2）第2针和第3针间隔较长的程序：即0、1、6月免疫程序。在某些特殊情况下成人需要更快的
酵母人工染色体标记基因的介绍
在 YAC载体中最常用的是 pYAC4 。由于酵母的染色体是线状的,因此其在工作状态也是线状的。但是,为了方便制备YAC载体, YAC 载体以环状的方式存在,并增加了普通大肠杆菌质粒载体的复制元件和选择标记,以便保存和增殖。 1、复制元件 YAC 载体的复制元件是其核心组成成分,其在酵母中复
如何区别酵母提取物、酵母浸粉、酵母粉和酵母浸膏？
酵母浸粉的介绍： 酵母浸粉又称酵母提取物，是采用新鲜酵母经酵母自溶、过滤、 浓缩、喷雾干燥而得到的一种浅黄色至类白色 干燥粉末。有酵母自然 香味，易溶于水，水溶 液呈淡黄色。酵母浸粉极具吸湿性，请放阴凉干燥处保存。酵母浸粉当中含有氨基酸类、肽类、水溶性维生素、及酵母多糖、酵母核酸组成的一种
酵母基因组DNA的玻珠制备法
实验概要本实验利用玻珠制备法制备了酵母基因组DNA。主要试剂无菌水，裂解缓冲液，5mol/L NaCl，苯酚，氯仿：已戊醇(24：1)，乙醇，TE缓冲液，EDTA-Sark，蛋白酶K，5mol/L醋酸铵主要设备摇床，玻璃离心管，台式离心机，玻珠，振荡器，P-1000移液器，1.5ml离心管实验步骤1
转基因酵母乙肝疫苗的药理作用
可刺激免疫系统产生保护性抗体，这种抗体存在于人的体液之中，乙肝病毒一旦出现，抗体会立即作用，将其清除，阻止感染，并不会伤害肝脏
酵母菌絮凝基因研究取得系列成果
蛋白酶A缺失及抗老化啤酒酵母工程菌的构建 6月底，《西安晚报》以《细菌吃淤泥 城河水变清》为题，报道了西安护城河玉祥门到西门清淤示范区内，运用菌种清淤，在1个多月的时间里，让河水重新变清的消息。这显示了微生物在污水治理方面的巨大威力。 科学家发现一种絮凝基因，把它转入到具有污水处
酵母菌基因组DNA的提取实验
实验材料 酵母菌试剂、试剂盒 SE缓冲液山梨醇EDTA溶菌酶PVP蛋白酶K缓冲液 Tris仪器、耗材 高速冷冻离心机台式离心机恒温水浴低温冰箱冷冻真空干燥器取液器电泳仪水平电泳槽紫外观测仪实验步骤 1. 1.5 ml 对数生长期细菌细胞。2. 离心，12 000 rpm，1-2 min。3.
酵母菌基因组DNA的提取实验
基本方案 实验材料 酵母菌 试剂、试剂盒
克隆化酵母DNA的操作实验——基因置换技术
实验材料酵母实验步骤一、整合性破坏1. 将基因的内部片段亚克隆到YIP载体。2. 在此内部片段中将质粒线性化。3. 继续整合性转化步骤3（见基本方案1）。二、基因破坏一步法1. 将合适的选择性基因亚克隆到目的基因上，必要时，可在亚克隆的同时引入一个缺失。2. 采用合适的限制性位点，从步骤1
酵母双杂交技术及其在蛋白质组研究中的应用
作为后基因组时代出现的新兴研究领域之一, 蛋白质组学(proteomics)正受到越来越多的关注。 蛋白质组学的研究目标是对机体或细胞的所有蛋白质进行鉴定和结构功能分析。 蛋白质组学的研究不局限任何特定的方法。 高分辨率的蛋白质分离技术如二维凝胶电泳和高效液相层析, 经典的蛋白质鉴定方法如氨
酵母双杂交技术及其在蛋白质组研究中的应用
作为后基因组时代出现的新兴研究领域之一, 蛋白质组学(proteomics)正受到越来越多的关注。 蛋白质组学的研究目标是对机体或细胞的所有蛋白质进行鉴定和结构功能分析。 蛋白质组学的研究不局限任何特定的方法。 高分辨率的蛋白质分离技术如二维凝胶电泳和高效液相层析, 经典的蛋白质鉴定方法如
酵母双杂交技术及其在蛋白质组研究中的应用
摘要 蛋白质组学是在后基因组时代出现的一个新兴的研究领域, 它的主要任务是识别鉴定细胞、组织或机体的全部蛋白质, 并分析蛋白质的功能及其模式。 因此, 揭示蛋白质组中蛋白质间的相互作用关系也是蛋白质组学的重要内容之一。 酵母双杂交技术是用来检测蛋白质间是否相互作用的一个非常有效的手段。 该技术在酵
酵母还能快速“重建”新冠病毒基因组？
据《自然》杂志6日发表的一项合成生物学研究，瑞士一个研究团队开发出一种可以快速重建新冠病毒的方法。重建病毒有助于研究人员开发诊疗方法和疫苗，同时，拥有合成能力也被认为是未来防治相关疫情的重要一环。 在实验室重建病毒，是一种有效的研究疾病暴发所涉病原体的方法。发生疫情时，将病毒样本送至研究机构可
“人工合成酵母基因组计划”最新成果发布
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/11/511980.shtm
华南理工团队最新成果丰富酵母基因表达
4月30日，华南理工大学食品科学与工程学院黄明涛教授课题组对酿酒酵母中的未折叠蛋白响应元件（UPRE）进行了改造，并应用于基因表达的动态调控。该成果以“Tailored UPRE2 variants for dynamic gene regulation in yeast”为题，发表在《美国国家科学
天津大学最新文章：酵母基因组工程
生物通报道：酿酒酵母染色体的人工合成突破了真核生物基因组重新设计与合成, 将引发基因组工程研究新的高潮. 近期来自天津大学系统生物工程教育部重点实验室，深圳华大基因研究院等处的研究人员以酵母基因组工程为例, 对“自上而下”和“自下而上”两种不同策略的基因组工程研究取得的最新进展进行综述, 并展望