HLA基因分型方法：PCR－SSO（ASO）探针法
PCR－SSO（ASO）探针法1）常规提取DNA参见RFLP法 2）PCR扩增参见PCR-RFLP法 3）斑点杂交1．将5～20μl扩增产物，加变性液100～200μl室温处理5～15min。2．在尼龙滤膜（预先用2×SSC浸湿2min）上真空点样，每孔以10×SSPE 200μl冲洗，抽干，80℃干燥2h。3．标记探针，取标记缓冲液2.5μl，寡核苷酸片段（dCTP, dGTP, dTTP）50～100ng，[γ-32P]ATP 2.5μl，T4多核苷酸酶10U，双蒸水加至25μl，混匀，37℃保温45min，用0.5mol/L EDTA 1μl终止反应，标记的探针可直接使用或采用柱层析分离标记好的探针。4．点样膜于杂交前漂洗，放入杂交袋中，加入适量预杂交液2ml/250px2在杂交温度下预杂交10～60min，将适量标记探针加入预杂交液中，杂交1h～过夜。5．洗膜，2×SSPE和0.1％SDS于杂交温度洗......阅读全文
HLA细胞法分型试验介绍
HLA细胞法分型试验介绍： HLA-D和DP位点的抗原须用细胞法分型进行鉴定，所以又称LD抗原，其鉴定方法普遍采用混合淋巴细胞培养，也称混合淋巴细胞反应。 1.试验方法将分离的反应细胞（通常是患者的淋巴细胞）与刺激细胞（通常是供者或已知的标准淋巴细胞）配制成1×106/ml浓度的悬液，各加0.
HLA细胞法分型试验介绍
HLA细胞法分型试验介绍：HLA-D和DP位点的抗原须用细胞法分型进行鉴定，所以又称LD抗原，其鉴定方法普遍采用混合淋巴细胞培养，也称混合淋巴细胞反应。1.试验方法将分离的反应细胞（通常是患者的淋巴细胞）与刺激细胞（通常是供者或已知的标准淋巴细胞）配制成1×106/ml浓度的悬液，各加0.2ml到反
HLA细胞法分型试验简介
HLA-D和DP位点的抗原须用细胞法分型进行鉴定，所以又称LD抗原（lymphocytedefinedantigen），其鉴定方法普遍采用混合淋巴细胞培养（mixedlymphocyteculture，MLC），也称混合淋巴细胞反应（mixedlymphocytereaction，MLR）。1.试验
HLA细胞法分型试验简介
HLA-D和DP位点的抗原须用细胞法分型进行鉴定，所以又称LD抗原（lymphocytedefinedantigen），其鉴定方法普遍采用混合淋巴细胞培养（mixedlymphocyteculture，MLC），也称混合淋巴细胞反应（mixedlymphocytereaction，MLR）。
简述HLA低分辨分型的内容
采用序列特异性引物扩增HLA等位基因的特异性片段，经电泳分离，根据PCR结果的反应格局具判断被测标本的HLA等位基因型，具有通量大、正确性好的特点。反映了HLA抗原水平的等位基因类型，用于骨髓、器官移植组织配型的初筛。
关于HLA高分辨分型的介绍
过去治疗白血病通常是通过骨髓移植进行的，由于必须在麻醉状态下抽取骨髓捐献者的部分骨髓，整个过程对捐献者产生非常大的心理压力。现随着科学进步，只需抽取若干毫升静脉血，分离出干细胞，再输入患者体内即可。首先抽取患者和捐献者的静脉血样本，提取DNA，测出各自DNA碱基的顺序，最后通过软件比对分析得出H
HLA分型的基本信息介绍
HLA(humanleucocyteantigen)复合体是人类多态性最丰富的遗传系统，定位于第6号染色体短臂6P21.31区，长3600kb。1999年已完成全部序列分析及基因定位，在此区域内共确认了224个基因座位中128个为功能性基因，其中39.8%和免疫功能相关。HLA基因根据其编码分子
关于HLA分型的基本信息介绍
HLA分型 (HUMAN LEUCOCYTE ANTIGEN），即人类白细胞抗原)是一个由一系列紧密连锁的基因座位所组成的具有高度多态性的复合体。主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex，MHC)是由染色体上一组编码与细胞间识别和抗原呈递相关蛋白的高
关于HLA分型的技术发展介绍
HLA系统研究从70年代到80年代末期主要是血清学研究，90年代以来，HLA进入了分子水平研究阶段。HLA分型技术同样走过了这一历程。建立于60年代的血清学及细胞学分型技术主要侧重于分析HLA产物特异性。1991年第11届国际HLA专题讨论上提出了HLA的DNA分型方法，随着测序技术的突飞猛进，
关于HLA高分辨分型优势的介绍
HLA高分辨分型技术与过去的低分辨相比配型速度更快，配型更精确，使得移植排斥反应更小，手术成功率和术后存活率更高。 随着医学的发展，像白血病、地中海贫血等能用最新的基因技术进行分型检测，再寻找合适的供体进行移植治疗。现通过HLA高分辨分型的外周血干细胞移植技术能大大提高配型效果，使患者的康复更
HLA的分型方法淋巴细胞毒试验培养试验
1.淋巴细胞毒试验：为HLA抗原分型常用方法。原理：淋巴细胞膜上的HLA抗原与相应抗体结合后，在补体作用下，细胞膜损伤，细胞溶解破裂被染色，计算显微镜下观察着色细胞的百分率（>20%为阳性反应）。Ⅰ类抗原分型时可用T淋巴细胞或外周血淋巴细胞；进行Ⅱ类抗原分型时需用B淋巴细胞。 2.混合淋巴细胞培养
基因多态性的检测方法
1．限制性片段长度多态性（Restriction Fragment Length Polymorphism，RFLP）：由DNA 的多态性，致使DNA 分子的限制酶切位点及数目发生改变，用限制酶切割基因组时，所产生的片段数目和每个片段的长度就不同，即所谓的限制性片段长度多态性，导致限制片段长度发生改
基因分型的新方法被研发
廉价的基因分型方法对现代基因组学至关重要。在最新这篇论文中，研究人员报道了QUILT，它使用低覆盖率的全基因组序列数据执行二倍体基因型填充。QUILT采用吉布斯采样将读数划分为母本和父本集，并使用大型参考面板促进快速单倍体填充。 研究人员证明了这种划分在许多兆碱基上是准确的，能够实现接近理
PacBio－RS－II测序仪革新HLA检测分型技术[创新技巧]
PacBio RS II测序系统一经推出，其长读长、单分子碱基分辨率及无GC偏好性的特征即受到广大研究者的推崇，尤其是在HLA检测分型领域，国际上权威HLA检测分型机构相继引进PacBio RS II测序技术进行相关服务或试剂盒的研发，推起了PacBio在HLA研究应用领域的高潮。His
PacBio－RS－II测序仪革新HLA检测分型技术[创新技巧]
PacBio RS II测序系统一经推出，其长读长、单分子碱基分辨率及无GC偏好性的特征即受到广大研究者的推崇，尤其是在HLA检测分型领域，国际上权威HLA检测分型机构相继引进PacBio RS II测序技术进行相关服务或试剂盒的研发，推起了PacBio在HLA研究应用领域的高潮。 His
关于HLA细胞学分型方法的介绍
HLA-D座位上的抗原称之为LD抗原，采用细胞学分型方法检测。常用检测方法有三种：混合淋巴细胞培养（MLC）技术；纯合细胞分型技术；预处理淋巴细胞分型方法。MLC又可分单向MLC和双向MLC。 （1）单向MLC：刺激细胞不再增殖，未处理的应答细胞能够识别外来刺激细胞的HLA-D抗原，发生增殖。
用PCR进行基因分型
与许多一次做数百块Southern blots的研究人员一样，我第一次用PCR做基因分型（genotyping）时觉得见效很快，不再需要等几天才能看到结果，不再需要DNA显微图像或者操作紫外线了。随着技术的不断进步，RCR使基因组学和转录组学发生了翻天覆地的变化，甚至随着免疫PCR的普及开始进军蛋白
HLA配型的关系
HLA配型 多用血清学方法作HLA－A、HLA－B、HLA－DR配型，然而需要MLC确定的HLA－Ⅱ类分子是否匹配，是关系到移植物能否长期存活更有用的指标。配型的关系是：①供、受者HLA－A和HLA－B相配的位点数越多，移植物存活几率越高；②供、受者HLA－DR位点相配更重要，因为HLA－DR和HL
HLA配型的关系
HLA配型 多用血清学方法作HLA－A、HLA－B、HLA－DR配型，然而需要MLC确定的HLA－Ⅱ类分子是否匹配，是关系到移植物能否长期存活更有用的指标。配型的关系是：①供、受者HLA－A和HLA－B相配的位点数越多，移植物存活几率越高；②供、受者HLA－DR位点相配更重要，因为HLA－DR和HL
华大基因新技术实现一次性达到HLA分型最高分辨率
骨髓和其他器官移植时，供者和受者之间人类白细胞抗原（HLA）相容程度越高，排斥反应的发生率就越低，移植成功率和移植器官长期存活率就越高。反之，就越容易发生排斥反应。7月开始，深圳华大基因应用新一代测序技术，只需通过一次实验就能够读取数千份样本的HLA序列数据，并一次性达到HLA分型的最
用PCR进行基因分型2
质谱法原则上，添加到引物末端的核苷能够直接依据质量，利用通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectroscopy，MALDI-TOFMS）直接检测出来，这是一种不需标
乙肝HBV基因分型检测原理
1、全面型别分析 采用Sanger测序法对乙肝病毒进行分型基因检测。通过提取慢性乙型肝炎患者血液中的病毒DNA，利用特异性引物对HBVDNA中的基因进行PCR扩增。通过对扩增后的目的基因进行测序，将测序信息与NCBI中标准株的序列信息进行比对，可一次性检出慢性乙型肝炎病毒A、B、C、D
用PCR进行基因分型1
与许多一次做数百块Southern blots的研究人员一样，我第一次用PCR做基因分型（genotyping）时觉得见效很快，不再需要等几天才能看到结果，不再需要DNA显微图像或者操作紫外线了。随着技术的不断进步，RCR使基因组学和转录组学发生了翻天覆地的变化，甚至随着免疫PCR的普及开始进军蛋白
丙型肝炎病毒的基因分型
HCV基因分型还无统一标准，因用于基因分型的部位和采用的技术方法不同，出现了各种基因分型结果，但各种基因型分类方法之间有一定的对应关系，兹举几种基因型分类法供参考。 HCV基因型各种分型之间的对应关系 现知欧美国家多数HCV-Ⅰ型感染，而亚洲国家以Ⅱ型为主，Ⅲ型次之。Okomoto报告日本慢
HPV分型基因检测的简介
HPV分型基因检测指的是检测多种基因型HPV的同时可以对HPV阳性结果进行基因分型的检测技术。其利用包括PCR-荧光探针法或其他分子生物学方法在内的核酸检测技术，以特定高危型HPV核酸（包括DNA和RNA）序列为检测目的，对人宫颈样本(如人宫颈脱落上皮细胞或分泌物等)进行体外定性检测的试剂，以确
HPV分型基因检测的意义
近年来，人类乳头状瘤病毒（HPV）的发现及分型为宫颈癌筛查提供了一个全新途径。1976 年，Zur Hausen H 首次提出人类乳头状瘤病毒（HPV）与宫颈癌的发病密切相关。随后大量流行病学资料及研究已明确显示 HPV 持续感染是宫颈癌发病的首要条件。绝大多数宫颈癌样本都可检出HPV，HPV阴
临床化学检查方法介绍载脂蛋白E基因分型
载脂蛋白E基因分型介绍： 载脂蛋白E(ApoE)是一种富含精氨酸的碱性蛋白质，ApoE在脂类代谢中起着重要的作用。载脂蛋白(Apo)E基因常见的等位基因型分为三种ε2、ε3、ε4，ApoE基因型的检测可以作为临床辅助诊断和风险率估计的指标。载脂蛋白E基因分型正常值： 载脂蛋白E主要存在于CM、V
临床化学检查方法介绍载脂蛋白E基因分型
载脂蛋白E基因分型介绍： 载脂蛋白E(ApoE)是一种富含精氨酸的碱性蛋白质，ApoE在脂类代谢中起着重要的作用。载脂蛋白(Apo)E基因常见的等位基因型分为三种ε2、ε3、ε4，ApoE基因型的检测可以作为临床辅助诊断和风险率估计的指标。载脂蛋白E基因分型正常值： 载脂蛋白E主要存在于CM、V
什么是基因分型定量检测系统？
基因分型定量检测系统是采用的基因芯片技术，用来检测HPV\HSV等DNA病毒的系统。该系统广泛应用于传染病流行病学中，如性传播疾病（尖锐湿疣、生殖器疱疹）、慢病（肿瘤、高血压）等。
PYRO测序用于SNP基因分型原理
其实是一种段片段焦磷酸测序技术，在测序引物的引导下，完成段片段（含snp）的测序，从而实现基因分型。缺点：不能检测长片段，对于重复序列没有办法。原理简介1.测序引物与单链，PCR扩增的DNA模板相结合。然后将其与DNA聚合酶、ATP硫酸化酶、荧光素酶和三磷酸腺苷双磷酸酶，以及底物APS和荧光素一起孵