神经干细胞的培养

一、 神经干细胞的分离无菌条件下取新生SD大鼠(出生48h内)脑组织,D-Hanks液充分漂洗后,在解剖显微镜下剥离脑膜,准确分离海马,用眼科剪将海马剪碎后,再转移到DMEM/F12(1:1)加B27 和bFGF(20ng/ml)的无血清培养基,吸管吹打机械分离制作单细胞悬液,台盼蓝染色后细胞计数,调整细胞浓度为5×104~5个/ml,置于24孔培养板中培养,每孔加入细胞悬液500μl。待神经球形成后再次机械分离克隆制作单细胞悬液,仍以5×104个/ml的细胞浓度置于24孔培养板中培养,每孔加入细胞悬液500μl。此后每7d机械分离克隆传代1次,方法同前。 二、BrdU标记将BrdU溶于无血清培养基,过滤除菌后加入神经球形成后再次机械分离克隆制作的单细胞悬液中(BrdU终浓度为5μmol/L),培养7d待新的神经球形成后,将神经球转移到预先涂布有多聚赖氨酸的培养板中,贴壁2h行BrdU免疫细胞化学染......阅读全文

简述神经干细胞的治疗机理

  1、患病部位组织损伤后释放各种趋化因子,可以吸引神经干细胞聚集到损伤部位,并在局部微环境的作用下分化为不同种类的细胞,修复及补充损伤的神经细胞。由于缺血、缺氧导致的血管内皮细胞、胶质细胞的损伤,使局部通透性增加,另外在多种黏附分子的作用下,神经干细胞可以透过血脑屏障,高浓度的聚集在损伤部位;  

指出成人神经干细胞的新标志

在衰老过程中,神经干细胞的数量减少,导致神经发生减少和与年龄相关的认知能力下降,焦虑和抑郁。因此,如果我们要利用神经发生来中止或逆转与海马年龄相关的病理,识别负责NSC保存的核心分子机制至关重要。哺乳动物的学习和记忆中心海马具有显着的能力,可以在整个生命中产生新的神经元。新生儿神经元是由神经干细胞(

Cell:揭秘激活神经干细胞的信号

   来自同济大学医学院、加州大学洛杉矶分校、南昌大学等处的研究人员报告称,他们利用单细胞RNA测序技术,同时运用加权基因共表达网络分析(WGCNA),揭示出了激活休眠神经干细胞的信号。这一重要的研究结果发布在5月21日的《细胞》(Cell)杂志上。  同济大学医学院的李思光(Siguang Li)

神经干细胞的结构特点和功能

神经干细胞(英语:Neural stem cells (NSCs))是一类存在于中枢神经系统中的干细胞,属于多能干细胞。神经干细胞在人、小鼠等生物的胚胎发育中扮演重要角色,亦存在于这些生物的成体中。这类细胞具有分化为神经元、星状细胞、寡突胶质细胞的能力。胚胎发育过程中,神经干细胞称为“放射状胶质细胞

关于神经干细胞的应用前景分析

  神经干细胞的来源、分离、培养及鉴定还有许多工作要做,神经干细胞诱导、分化及迁移机制有待进一步研究。通过细胞培养技术及基因组的研究,如DNA微列阵技术,进一步明确成体神经干细胞的确切位置,可以设计药物特异性地激活这些细胞。进一步认识神经干细胞的本质和控制分化基因,通过调控靶基因,可以从神经干细胞诱

Nature揭示神经干细胞分化新机制

  来自俄勒冈大学的研究人员在一项新研究中,通过探究果蝇的大脑揭示了一个新的干细胞机制,这可能有助于阐明人类神经元是如何形成的。相关研究论文在线发表在6月27日的《自然》(Nature)杂志上。   “我们所面对的问题是‘像神经干细胞这样的单一干细胞类型,是如何生成各种不同类型的神经元的?’”论文

移植成体神经干细胞可控制机体老化

  英国《自然》杂志7月25日在线发表的一篇研究表明,以小鼠为实验对象,移植或减少其健康下丘脑的成体神经干细胞(NSC),能够相应减慢或加速机体老化。  虽然人们已经知道神经系统能控制老化,而且最近的研究证明,下丘脑在此过程中的作用尤其重要,但身体老化的表现具体是如何产生的却并不清楚,科学家需要开展

概述神经干细胞的的重要作用

  神经干细胞在神经发育和修复受损神经组织中发挥重要作用。神经干细胞移植是修复和代替受损脑组织的有效方法,能重建部分环路和功能。此外神经干细胞可作为基因载体,用于颅内肿瘤和其它神经疾病的基因治疗,利用神经干细胞作为基因治疗载体,弥补了病毒载体的一些不足。Wagner等将神经干细胞移植到帕金森病模型的

关于神经干细胞的细胞移植的介绍

  传统的药物治疗效果不令人满意,吃药只可暂时性的控制疾病,一旦停药,病症复现甚至更严重。常年服药不仅让患者痛苦不已,而且对身体造成极大的危害,导致 其他严重疾病的并发。药物不具备激活脑神经细胞的功能是根本原因,所以要想从根本上治疗脑病等神经系统疾病,借助外界移植神经干细胞是唯一有效的方法。  科学

凝胶开发用于培养大量神经干细胞

在许多方面,干细胞是生物界的天才。一方面,这些天然的变形器可以将自身转化为体内几乎任何类型的细胞。在这方面,他们承诺能够治愈从脊髓损伤到癌症等疾病。另一方面,材料科学与工程副教授Sarah Heilshorn表示,干细胞就像女主角一样,也是一种善变和困难的工作。“我们只是不知道如何有效地生长大量干细

小鼠神经干细胞分化为星形胶质细胞

实验概要小鼠神经干细胞分化为星形胶质细胞主要试剂无菌水、DPBS、0.05%胰蛋白酶胰蛋白酶、细胞基础培养液、 PDL、laminin、小鼠神经分化培养液(Neuron M)、小鼠神经干细胞向星形胶质细胞分化培养液主要设备4孔板、12mm细胞培养玻片实验步骤 在4孔板每个孔中放置一块12mm细胞培养

腺病毒介导EGFP基因转染神经干细胞

摘要: 本实验从新生SD大鼠海马组织中分离神经干细胞,并通过观察携带EGFP基因的腺病毒(Ad/ EGFP)转染NSCS后EGFP表达规律及转染对NSCS的活力、增殖、分化等的影响,探讨EGFP作为NSCS的示踪标志物的可行性,为进一步的NSCS移植研究提供体外研究

小鼠神经干细胞分化为神经元

实验概要小鼠神经干细胞分化为神经元主要试剂无菌水、DPBS、0.05%胰蛋白酶胰蛋白酶、细胞基础培养液、 PDL、laminin、小鼠神经分化培养液(Neuron M)主要设备4孔板、12mm细胞培养玻片实验步骤① 在4孔板每个孔中放置一块12mm细胞培养玻片,每孔加入100ug/mL的PDL500

wnt信号通路如何影响神经干细胞增殖

wnt信号通路主要是通过影响b-catenin来发挥作用的,当有wnt信号时,APC,Axin和GSK3的复合物无法形成,主要是GSK3无法与b-catenin结合,使得其在细胞质中积累,进入细胞核,从而启动癌基因的启动子密码,发生癌变。此外还有文献说是b-catenin除了进入细胞核之外,也可以与

PNAS-石艳红小组-神经干细胞研究

在9月14日的《美国国家科学院院刊》PNAS网站上公布了来自美国加州贝克曼City of Hope研究所的华裔神经学副教授石艳红(Yanhong Shi,音译)领导的研究组的一项有关神经干细胞的最新研究进展。 TLX是一种对神经干细胞的增殖和自我更新至关重要的转录因子。但是到目前为止,TLX介导的神

小鼠神经干细胞的流式分析及收集

实验概要小鼠神经干细胞的流式分析及收集主要试剂神经干细胞培养液主要设备流式细胞仪、移液枪、流式细胞管实验步骤(1)在上流式细胞仪器前轻轻混匀样品。为了分析和收集细胞,通过调整前向散射范围(FSC-A)和侧向散射范围(SSC-A)来调整细胞门以去除细胞碎片,留下需要的细胞;设置FSC-A和前向散射宽度

美将成人皮肤细胞变成神经干细胞

  据美国物理学家组织网4月25日报道,美国戴维·格拉斯通研究所的科学家丁盛(音译)报告称,他通过细胞重组技术,对现有的诱导多功能干细胞(iPS细胞)技术进行改进,将成人皮肤细胞直接转化成了神经干细胞,新方法在再生医学领域具有重要的应用潜力。相关研究发表于4月25日出版的《美国国家科学

神经干细胞有望助脑瘤患者修复认知功能

  美国研究人员日前报告说,他们进行的动物研究显示,神经干细胞有望帮助脑瘤患者修复受损的认知功能。  美国加利福尼亚大学欧文分校的研究人员培育出患脑瘤的实验鼠,并对它们的脑部进行放疗,实验鼠的认知能力因而受到损伤。放疗2天后,研究人员向它们的脑部植入人类神经干细胞,在随后 1个月及4个月的评估中,这

关于神经干细胞应用中遇到的问题分析

  建立的神经干细胞系绝大多数来源于鼠,而鼠与人之间存在着明显的种属差异;神经干细胞的来源不足;部分移植的神经干细胞发展成脑瘤;神经干细胞转染范围的非选择性表达及转染基因表达的原位调节;利用胚胎干细胞代替神经干细胞存在着社会学及伦理学方面的问题等。(神经干细胞系的建立可以无限地提供神经元和胶质细胞,

日发现神经干细胞脑内移动机制

  日本名古屋市立大学研究人员在29日的美国科学杂志《神经元》网络版上发表文章指出,他们在利用老鼠进行实验时,发现其脑内新产生的神经干细胞在脑内移动的机制。这一发现可能有助于开发治疗脑梗塞等脑部疾病的新方法。   此前,研究人员已经知道神经干细胞主要存在于成年哺乳动物侧脑室的室管膜

广州生物院利用尿液细胞获得神经干细胞

  12月9日,国际学术期刊《自然—方法学》(Nature Methods)在线发表了中科院广州生物医药与健康研究院裴端卿研究员和潘光锦研究员领导的研究组的最新研究成果—— “利用病人尿液细胞获得神经干细胞”。   他们研究通过特殊的手段将一些干细胞因子导入从病人尿液中分离而来的细胞中并通过特

胎牛血清可促进神经干细胞的分化

神经干细胞体外分化研究是神经科学研究领域的热点。有人观察了不同浓度胎牛血清对神经干细胞分化的影响。具体做法是:分离大鼠海马区组织,制成单细胞悬液后,加入适量培养基((含bFGF10 ng/mL、EGF 20 ng/mL HEPES 5 mmol/LHeparin 5mg/mL、葡萄糖23.33 mm

自闭症与神经干细胞功能障碍

  许多自闭症谱系障碍相关基因突变都跟突触蛋白有关,或者对神经元之间连接很重要。发育障碍相关基因缺陷经常位于大脑发育相关基因之中。(图片来源:123RF)  最近《Stem Cell Reports》杂志发表了一篇文章,来自赫尔辛基大学的研究人员利用从脆性X染色体综合征(FraX)患者皮肤成纤维细胞

微重力环境有助神经干细胞修复脊髓损伤

近日,中国科学院遗传发育所研究员戴建武再生医学团队及国家卫生健康委科学技术研究所研究员马旭团队利用微重力反应器模拟太空微重力环境,发现这一环境有助提升三维(3D)培养神经干细胞修复脊髓损伤的效果。相关成果近日发表于《生物材料科学》期刊。如何利用微重力环境开展组织工程研究是目前空间生物学研究的前沿和热

胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定

原代、传代培养 实验材料 孕13d的昆明种二级小鼠 试剂、试剂盒 胎牛血清

信号转导在神经干细胞分化中的作用

  信号转导在神经干细胞分化中十分重要。作为一种信号传导途径,Notch信号传导系统尚未完全阐明。认为Notch受体是一种整合型膜蛋白,是一个保守的细胞表面受体,它通过与周围配体接触而被激活,其信号传导途径开始于Notch受体与配体结合后其胞浆区从细胞膜上脱落,并向细胞核转移,将信号传递给下游信号分

皮肤细胞经三维培养变身神经干细胞

  日前,中科院遗传与发育生物学研究所戴建武研究组成功利用三维培养,将皮肤细胞变成神经干细胞。相关研究成果发表于《生物材料》。   2006年,山中伸弥利用逆转录病毒转基因的方法实现体细胞重编程,产生诱导性多能干细胞(iPS细胞),开创了基因调控细胞重编程的全新领域。随后大量研究表明,不同基因的联

胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定

原代、传代培养实验材料孕13d的昆明种二级小鼠                                                          试剂、试剂盒胎牛血清                                                          

我研究发现阻碍脑卒中后神经干细胞再生“元凶”

  复旦大学医学神经生物学国家重点实验室、脑科学研究院教授赵冰樵带领研究团队首次发现,脑内一种名叫“caspase-3”的分子,一旦被激活,不仅在人的脑卒中发生初期起“细胞杀手”作用,而且在脑卒中的恢复期继续起破坏作用;研究团队还发现,药物可以抑制caspase-3的破坏作用,从而促进脑卒中后神经干

日本研究发现:神经干细胞复制分化可被光“控制”

  日本京都大学1日发表一份公报说,其病毒研究所的研究小组开发出了利用照射光线来控制神经干细胞增殖和分化的技术。   神经干细胞能够自我复制,并且具有多能性,能够分化并发育成脑的三种主要细胞——神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。此前的研究曾经显示,神经干细胞的自我复制和细胞分化是受“Hes1、“