活细胞间接免疫荧光法
一．实验器材：1． 器材：40孔塑料板、40孔板离心机、微量加样器、振荡器、盖玻片、荧光显微镜等2． 试剂：单抗隆抗体（单抗）、荧光标记抗鼠免疫球蛋白、PBS（pH7.2-7.4）、甘油、叠氮钠（NaN3）等二．方法（微量法）1． 将分离好的单个核细胞用PBS洗2次，1000rpm每次10分钟。用含0.1% NaN3 PBS调细胞浓度在0.5-1×108/ml（5000万-1亿/ml），加在40孔板上，每孔10ul，含5-10×105细胞，然后加入单抗（第一抗体）50ul（同时加入AB型血清5ul）振荡混匀，置4℃，至少30分钟。2． 用含0.1%NaN3的PBS洗一次，1000rpm离心3-5分钟弃上清。3． 加荧光标记抗鼠抗体（第二抗体）工作液20ul，混匀振荡置4℃/30分钟（时间不能超过）。4． &nb......阅读全文
活细胞间接免疫荧光法
一．实验器材：1． 器材：40孔塑料板、40孔板离心机、微量加样器、振荡器、盖玻片、荧光显微镜等2． 试剂：单抗隆抗体（单抗）、荧光标记抗鼠免疫球蛋白、PBS（pH7.2-7.4）、甘油、叠氮钠（NaN3）等二．方法（微量法）1． 将分离好的单个核细胞用PBS洗2次，1000rpm每次10分钟
间接免疫荧光法原理
间接免疫荧光试验是用特异性抗体与标本中相应抗原反应后，再用荧光素标记的第二抗体（抗抗体）与抗原-抗体复合物中第一抗体结合，洗涤后在荧光显微镜下观察特异性荧光，以检测未知抗原或抗体。本法比直接法敏感度提高5-10倍，且一种荧光二抗可检测多种抗原抗体系统，缺点是易产生非特异性荧光。
什么是直接免疫荧光法和间接免疫荧光法
免疫荧光技术是将荧光素如异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)与相应抗体（或抗原）以化学的方法结合，将荧光标记抗体（或抗原）与标本中相应的抗原结合形成荧光标记的抗体- 抗原复合物，用荧光显微镜观察。在镜下见到有荧光存在即推断有抗原抗体复合物的存在，根据已 知
什么是直接免疫荧光法和间接免疫荧光法
免疫荧光技术是将荧光素如异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)与相应抗体（或抗原）以化学的方法结合，将荧光标记抗体（或抗原）与标本中相应的抗原结合形成荧光标记的抗体- 抗原复合物，用荧光显微镜观察。在镜下见到有荧光存在即推断有抗原抗体复合物的存在，根据已 知
什么是直接免疫荧光法和间接免疫荧光法
免疫荧光技术是将荧光素如异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)与相应抗体（或抗原）以化学的方法结合，将荧光标记抗体（或抗原）与标本中相应的抗原结合形成荧光标记的抗体- 抗原复合物，用荧光显微镜观察。在镜下见到有荧光存在即推断有抗原抗体复合物的存在，根据已 知
间接免疫荧光法检测自身抗体
自身抗体诊断的标准技术是间接免疫荧光法，其特点是特异性强，阳性与阴性样品的信号强度对比明显，通过显微镜观测能够精确地判断组织或细胞内荧光的分布。自身抗原的位置决定了其相应抗体的典型的荧光模式，所有与此典型模式不相关区域的染色被认为是非特异性染色。即使偶尔伴有强的非特异性染色，但弱的特异性信号也能够被
间接免疫荧光法检测自身抗体
自身抗体诊断的标准技术是间接免疫荧光法，其特点是特异性强，阳性与阴性样品的信号强度对比明显，通过显微镜观测能够精确地判断组织或细胞内荧光的分布。自身抗原的位置决定了其相应抗体的典型的荧光模式，所有与此典型模式不相关区域的染色被认为是非特异性染色。即使偶尔伴有强的非特异性染色，但弱的特异性信号
间接免疫荧光法有哪些优缺点
优点：可直接看到细胞核，判断疾病的方向缺点：培养荧光操作人员大约需要半年时间，成本高（需要荧光显微镜）；不能量化指标，周期长，半定量。
间接免疫荧光法的操作步骤介绍
1、细胞准备与固定 （1）单层生长细胞：取对数生长细胞，用0.25％胰蛋白酶消化，制成单细胞悬液。将细胞接种到预先放置几张6×22mm盖玻片的培养瓶或培养皿中，置二氧化碳培养箱培养1-3天，待细胞接近长成单层，取出盖玻片，进入PBS（0.01 mol/L,pH7.4）洗2次，然后根据实验目的，
间接免疫荧光
实验方法原理固定细胞，顺序加入一抗和二抗，通过 UV 光观察。实验材料细胞培养在盖玻片产生一抗种属的二抗猪血清或其他封闭剂D-PBSA试剂、试剂盒新鲜制备的固定剂用含10%的FBS培养液封固剂实验步骤1. 用 D-PBSA 洗涤长有细胞的盖玻片，置于合适的培养皿中。如 13 mm 盖玻片可用24 孔
间接免疫荧光
实验方法原理固定细胞，顺序加入一抗和二抗，通过 UV 光观察。实验材料细胞培养在盖玻片 产生一抗种属的二抗
间接免疫荧光
中文名称间接免疫荧光英文名称indirect immunofluorescence定 义直接免疫荧光技术的改进。待检细胞首先用未标记的抗体处理，使之与特异的抗原形成复合物，然后再用抗抗体的荧光标记抗体着色，即可检测出特异抗原在细胞中的存在部位，具有荧光增强效应。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞
间接免疫荧光
方案16.11 间接免疫荧光实验方法原理固定细胞，顺序加入一抗和二抗，通过 UV 光观察。实验材料细胞培养在盖玻片产生一抗种属的二抗猪血清或其他封闭剂D-PBSA试剂、试剂盒新鲜制备的固定剂用含10%的FBS培养液封固剂实验步骤1. 用 D-PBSA 洗涤长有细胞的盖玻片，置于合适的培养皿中。如 1
亚细胞定位的免疫荧光法介绍
1、直接法 将标记的特异性荧光抗体，直接加在抗原标本上，经一定的温度和时间的染色，用水洗去未参加反应的多余荧光抗体，室温下干燥后封片、镜检。 2、间接法 如检查未知抗原，先用已知未标记的特异抗体（第一抗体）与抗原标本进行反应，用水洗去未反应的抗体，再用标记的抗抗体（第二抗体）与抗原标本反应
免疫荧光组织（细胞）化学染色方法：间接法
一、原理与意义 免疫荧光组织（细胞）化学染色方法——间接法，是一种荧光抗体染色法。该方法只需制备一种荧光抗体可以检出多种抗原，敏感性较高，操作方法较易掌握，而且能解决一些不易制备动物免疫血清的病原体（如麻疹）等的研究和检查，所以已被广泛应用于自身抗体和感染病人血清的试验。 二、操作流程 （一）双层法
移植免疫的间接识别
中文名称间接识别英文名称indirect recognition定 义移植免疫应答中，受者T细胞识别由受者抗原提呈细胞所提呈的供者同种异型抗原或异种抗原。间接识别途径激活T细胞速度较慢、数量较少。应用学科免疫学（一级学科），免疫病理、临床免疫（二级学科），移植免疫及其他（三级学科）
免疫荧光法介绍
免疫荧光法（Immunofluorescence method）是将免疫学方法(抗原抗体特异结合)与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出，从而可对抗原进行细胞定位。用免疫荧光技术显示和检查细胞或组织内抗原或半抗原物质等方法称为免疫荧光细胞(
酵母免疫荧光法
实验步骤展
推荐间接免疫荧光法为原发性胆汁性肝硬化一线筛查方法
原发性胆汁性肝硬化（Primary biliary cirrhosis，PBC）是一种自身免疫介导的慢性胆汁淤积性肝脏疾病，以血清中高滴度的抗线粒体抗体（antimitochondrial antibodies，AMA）为主要特征。PBC 的诊断主要基于以下标准：（1）血清碱性磷酸酶升高；（
皮肤间接免疫荧光试验
免疫荧光技术的原理是不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体（或抗原）上，与其相应的抗原（或抗体）结合后，在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。间接免疫荧光试验是将荧光素标记的抗体先与特异性抗体抗原复合物反应，形成抗原-抗体-抗抗体复合物体系。染色程序分为两步，第一步：用未知未标记的抗体（待检标本
免疫荧光染色（间接法）
1、切片固定后用毛细滴管吸取经适当稀释的免疫血清滴加在其上，置于染色盒中保持一定的湿度，37℃作用30min。然后用0.01mol/l pH7.2PBS洗两次，10min，用吸水吸去或吹干余留的液体。 2、再滴加间接荧光抗体（如兔抗人 -球蛋白荧光抗体等），同上步骤，染色30min，37℃，缓冲盐水
免疫酶标技术——间接法
实验方法原理将酶标记在第二抗体上，再与已形成的抗原抗体复合物中的第一抗体反应。目前广泛应用的PAP法、ABC法是在间接法的原理和技术的基础上发展起来的。实验材料抗体试剂、试剂盒PBSH2O2血清仪器、耗材显微镜实验步骤1. 标本固定；2. PBS洗涤2×3 分钟；3. 1 %H2O2（或1 %
免疫荧光技术——间接法
实验方法原理基本原理是先用特异性抗体与细胞内相应抗原结合，再用荧光素标记的二抗与特异性抗体相结合，形成抗原-特异性抗体-标记荧光抗体的复合物。因为在复合物上带有比直接法更多的荧光标记物，所以比直接法更敏感。实验材料抗体试剂、试剂盒PBS伊文氏兰仪器、耗材显微镜实验步骤1. 标本固定后，PBS洗涤3
免疫荧光法是什么？
免疫萤光法首先将将萤光物质标记在抗原（或抗体）上，通过免疫反应检测抗体（或抗原），如果二者对应，形成带有萤光物质的免疫复合物不被水冲掉，在萤光显微镜下可见萤光。如果二者不对应，不形成免疫复合，萤光物质被水冲掉，在显微镜下不显萤光。
免疫荧光法是什么
免疫萤光法首先将将萤光物质标记在抗原（或抗体）上,通过免疫反应检测抗体（或抗原）,如果二者对应,形成带有萤光物质的免疫复合物不被水冲掉,在萤光显微镜下可见萤光.如果二者不对应,不形成免疫复合,萤光物质被水冲掉,在显微镜下不显萤光.
富集活细胞
实验方法原理在 25 ml 缧口盖离心管中加人6 ml Ficoll-Hypaque溶液，将 9 ml 含 2×107 个细胞的培养基加在上面，离心，从交界部位收集活细胞。实验材料细胞悬液
活细胞计数
活细胞计数是培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好，所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。 培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好，所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。
富集活细胞
实验方法原理在 25 ml 缧口盖离心管中加人6 ml Ficoll-Hypaque溶液，将 9 ml 含 2×107 个细胞的培养基加在上面，离心，从交界部位收集活细胞。实验材料细胞悬液D-PBSA试剂、试剂盒Ficoll-Hypaque溶液或其他类似物仪器、耗材离心管或常规容器生长培养基注射器移
活细胞计数
活细胞计数是培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好，所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。 培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好，所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。
富集活细胞
实验方法原理 在 25 ml 缧口盖离心管中加人6 ml Ficoll-Hypaque溶液，将 9 ml 含 2×107 个细胞的培养基加在上面，离心，从交界部位收集活细胞。 实验材料