间接免疫荧光法原理

间接免疫荧光试验是用特异性抗体与标本中相应抗原反应后,再用荧光素标记的第二抗体(抗抗体)与抗原-抗体复合物中第一抗体结合,洗涤后在荧光显微镜下观察特异性荧光,以检测未知抗原或抗体。本法比直接法敏感度提高5-10倍,且一种荧光二抗可检测多种抗原抗体系统,缺点是易产生非特异性荧光。......阅读全文

间接免疫荧光

实验方法原理固定细胞,顺序加入一抗和二抗,通过 UV 光观察。实验材料细胞培养在盖玻片                                                                  产生一抗种属的二抗                                

间接免疫荧光

实验方法原理固定细胞,顺序加入一抗和二抗,通过 UV 光观察。实验材料细胞培养在盖玻片产生一抗种属的二抗猪血清或其他封闭剂D-PBSA试剂、试剂盒新鲜制备的固定剂用含10%的FBS培养液封固剂实验步骤1. 用 D-PBSA 洗涤长有细胞的盖玻片,置于合适的培养皿中。如 13 mm 盖玻片可用24 孔

间接免疫荧光

方案16.11 间接免疫荧光实验方法原理固定细胞,顺序加入一抗和二抗,通过 UV 光观察。实验材料细胞培养在盖玻片产生一抗种属的二抗猪血清或其他封闭剂D-PBSA试剂、试剂盒新鲜制备的固定剂用含10%的FBS培养液封固剂实验步骤1. 用 D-PBSA 洗涤长有细胞的盖玻片,置于合适的培养皿中。如 1

间接免疫荧光

中文名称间接免疫荧光英文名称indirect immunofluorescence定  义直接免疫荧光技术的改进。待检细胞首先用未标记的抗体处理,使之与特异的抗原形成复合物,然后再用抗抗体的荧光标记抗体着色,即可检测出特异抗原在细胞中的存在部位,具有荧光增强效应。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞

移植免疫的间接识别

中文名称间接识别英文名称indirect recognition定  义移植免疫应答中,受者T细胞识别由受者抗原提呈细胞所提呈的供者同种异型抗原或异种抗原。间接识别途径激活T细胞速度较慢、数量较少。应用学科免疫学(一级学科),免疫病理、临床免疫(二级学科),移植免疫及其他(三级学科)

免疫荧光染色(间接法)

1、切片固定后用毛细滴管吸取经适当稀释的免疫血清滴加在其上,置于染色盒中保持一定的湿度,37℃作用30min。然后用0.01mol/l pH7.2PBS洗两次,10min,用吸水吸去或吹干余留的液体。 2、再滴加间接荧光抗体(如兔抗人 -球蛋白荧光抗体等),同上步骤,染色30min,37℃,缓冲盐水

皮肤间接免疫荧光试验

  免疫荧光技术的原理是不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。间接免疫荧光试验是将荧光素标记的抗体先与特异性抗体抗原复合物反应,形成抗原-抗体-抗抗体复合物体系。染色程序分为两步,第一步:用未知未标记的抗体(待检标本

免疫酶标技术——间接法

实验方法原理将酶标记在第二抗体上,再与已形成的抗原抗体复合物中的第一抗体反应。目前广泛应用的PAP法、ABC法是在间接法的原理和技术的基础上发展起来的。实验材料抗体试剂、试剂盒PBSH2O2血清仪器、耗材显微镜实验步骤1.  标本固定;2.  PBS洗涤2×3 分钟;3.  1 %H2O2(或1 %

免疫荧光技术——间接法

实验方法原理基本原理是先用特异性抗体与细胞内相应抗原结合,再用荧光素标记的二抗与特异性抗体相结合,形成抗原-特异性抗体-标记荧光抗体的复合物。因为在复合物上带有比直接法更多的荧光标记物,所以比直接法更敏感。实验材料抗体试剂、试剂盒PBS伊文氏兰仪器、耗材显微镜实验步骤1.  标本固定后,PBS洗涤3

间接免疫吸附测定的定义

    一种酶联免疫吸附测定法,即将已知的抗原吸附到固相载体表面洗涤去除游离成分,再用酶标记的第二抗体参与反应,最后通过酶作用于底物显色来判断结果,用于定量检测未知抗体。

间接免疫荧光法原理

间接免疫荧光试验是用特异性抗体与标本中相应抗原反应后,再用荧光素标记的第二抗体(抗抗体)与抗原-抗体复合物中第一抗体结合,洗涤后在荧光显微镜下观察特异性荧光,以检测未知抗原或抗体。本法比直接法敏感度提高5-10倍,且一种荧光二抗可检测多种抗原抗体系统,缺点是易产生非特异性荧光。

免疫学实验间接免疫荧光试验介绍

间接免疫荧光试验介绍:  间接免疫荧光试验是用对应某一种抗原的抗体(这里被称为一抗)与细胞孵育结合,在采用对应一抗(也就是抗一抗)的抗体(这里被称为二抗,二抗上偶联有荧光素分子)与细胞孵育结合后在荧光显微镜下观察。间接免疫荧光试验正常值:  

活细胞间接免疫荧光法

一.实验器材:1.  器材:40孔塑料板、40孔板离心机、微量加样器、振荡器、盖玻片、荧光显微镜等2.  试剂:单抗隆抗体(单抗)、荧光标记抗鼠免疫球蛋白、PBS(pH7.2-7.4)、甘油、叠氮钠(NaN3)等二.方法(微量法)1.  将分离好的单个核细胞用PBS洗2次,1000rpm每次10分钟

间接免疫荧光术的技术特点

中文名称间接免疫荧光英文名称indirect immunofluorescence定  义直接免疫荧光技术的改进。待检细胞首先用未标记的抗体处理,使之与特异的抗原形成复合物,然后再用抗抗体的荧光标记抗体着色,即可检测出特异抗原在细胞中的存在部位,具有荧光增强效应。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞

间接免疫荧光试验检查过程

  (1) 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。  (2) 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其完全覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。  (3) 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS

抗核抗体与间接免疫荧光技术

在自身免疫性疾病中,人体组织细胞细胞核的核膜、核内的染色质、非组蛋白,以及核糖核酸(RNA)和相关的蛋白质等都可成为自身免疫反应攻击的靶子,产生抗核抗体(ANA)。其中有不少抗体因对疾病的诊断有高度的特异性,已成为诊断某一类疾病的血清标志性抗体,如抗双链DNA抗体、抗Sm抗体之于SLE,抗SSB抗体

间接免疫荧光试验的注意事项

检查前: 抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食 物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。体检前一天 的晚八时以后,应禁食,以免影响第二天空腹血糖等指标的检测。 检查时: 应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩、增加采血的困难 不适宜人群:没有

间接免疫荧光法检测自身抗体

    自身抗体诊断的标准技术是间接免疫荧光法,其特点是特异性强,阳性与阴性样品的信号强度对比明显,通过显微镜观测能够精确地判断组织或细胞内荧光的分布。自身抗原的位置决定了其相应抗体的典型的荧光模式,所有与此典型模式不相关区域的染色被认为是非特异性染色。即使偶尔伴有强的非特异性染色,但弱的特异性信号

间接免疫荧光法检测自身抗体

自身抗体诊断的标准技术是间接免疫荧光法,其特点是特异性强,阳性与阴性样品的信号强度对比明显,通过显微镜观测能够精确地判断组织或细胞内荧光的分布。自身抗原的位置决定了其相应抗体的典型的荧光模式,所有与此典型模式不相关区域的染色被认为是非特异性染色。即使偶尔伴有强的非特异性染色,但弱的特异性信号也能够被

皮肤间接免疫荧光试验临床意义

  鉴别诊断皮肤间接免疫荧光试验用以检测患者血清中的某种特异抗体或自身抗体。  1.血清中各种抗微生物抗体的测定  如梅毒螺旋体、支原体、衣原体、立克次体、疱疹病毒等。  2.血清中各种自身抗体的测定  (1)系统性红斑狼疮、皮肌炎、硬皮病、类风湿关节炎、混合结缔组织病、干燥综合征等:有不同类型的抗

直接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的异同

1、接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的不同:直接免疫荧光的实验方案通常较短,因为它只需要一个标记步骤。间接免疫荧光使用偶联二抗检测一抗会增加额外的操作步骤。直接免疫荧光方法的实验方案步骤较少,更简单。间接免疫荧光方法中必须选择适当的二抗,增加了复杂度。这种情况在需要使用多个二抗的多色实验中尤为突出,

间接免疫荧光和直接免疫荧光染色方法的异同

免疫荧光细胞化学方法的原理是根据抗原抗体反应的规律,把已知的抗原或抗体标记上荧光素,制成荧光抗原或抗体,然后以它作为探针来检测组织或细胞内的相应物质。方法具体种类有直接法、间接法、夹心法和补体法等。在荧光显微镜下,根据其形成复合物所发的荧光,来确定判断检测物的来源、性质和部位。 1、直接法:这是最早

直接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的异同

1、接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的不同:直接免疫荧光的实验方案通常较短,因为它只需要一个标记步骤。间接免疫荧光使用偶联二抗检测一抗会增加额外的操作步骤。直接免疫荧光方法的实验方案步骤较少,更简单。间接免疫荧光方法中必须选择适当的二抗,增加了复杂度。这种情况在需要使用多个二抗的多色实验中尤为突出,

直接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的异同

1、接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的不同:直接免疫荧光的实验方案通常较短,因为它只需要一个标记步骤。间接免疫荧光使用偶联二抗检测一抗会增加额外的操作步骤。直接免疫荧光方法的实验方案步骤较少,更简单。间接免疫荧光方法中必须选择适当的二抗,增加了复杂度。这种情况在需要使用多个二抗的多色实验中尤为突出,

直接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的异同

1、接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的不同:直接免疫荧光的实验方案通常较短,因为它只需要一个标记步骤。间接免疫荧光使用偶联二抗检测一抗会增加额外的操作步骤。直接免疫荧光方法的实验方案步骤较少,更简单。间接免疫荧光方法中必须选择适当的二抗,增加了复杂度。这种情况在需要使用多个二抗的多色实验中尤为突出,

利用间接放射免疫法检测样品的mTNF

实验概要本实验利用间接放射免疫法检测样品的mTNF。选用两种抗体,一抗为抗TNF抗体,可与细胞膜表面的mTNF特异性结合;二抗为抗一抗抗体,且标记放射性同位数125I,可与一抗特异性结合,通过测定其放射活性,并与标准品对照,即可间接测定细胞膜表面的TNF。实验原理肿瘤坏死因子(tumor nec

免疫荧光组织(细胞)化学染色方法:间接法

一、原理与意义 免疫荧光组织(细胞)化学染色方法——间接法,是一种荧光抗体染色法。该方法只需制备一种荧光抗体可以检出多种抗原,敏感性较高,操作方法较易掌握,而且能解决一些不易制备动物免疫血清的病原体(如麻疹)等的研究和检查,所以已被广泛应用于自身抗体和感染病人血清的试验。 二、操作流程 (一)双层法

关于疟疾间接免疫荧光试验的基本介绍

  疟疾的血清学诊断方法颇多,本节仅介绍常用的间接免疫荧光试验法。  异常结果:荧光抗体法的阳性检出率,一般均高于原虫检出率。对恶性疟疾患者抗体效价为1∶80或更高,可认为是带虫者或近期感染疟疾的标志。  需要检查的人群:有明显的寒战、全身发抖、面色苍白、口唇发绀、皮肤干热、烦躁不安疲乏、头疼、不适

利用间接放射免疫法检测样品的mTNF

实验概要本实验利用间接放射免疫法检测样品的mTNF。选用两种抗体,一抗为抗TNF抗体,可与细胞膜表面的mTNF特异性结合;二抗为抗一抗抗体,且标记放射性同位数125I,可与一抗特异性结合,通过测定其放射活性,并与标准品对照,即可间接测定细胞膜表面的TNF。实验原理肿瘤坏死因子(tumor nec

间接免疫荧光试验定义和注意事项

  间接免疫荧光试验是用特异性抗体与标本中相应抗原反应后,再用荧光素标记的第二抗体(抗抗体)与抗原-抗体复合物中第一抗体结合,洗涤后在荧光显微镜下观察特异性荧光,以检测未知抗原或抗体。本法比直接法敏感度提高5-10倍,且一种荧光二抗可检测多种抗原抗体系统,缺点是易产生非特异性荧光。  注意事项  检