WIKI资讯
WIKI资讯
3 竞争抑制ELISA方法的建立3.1 抗体的酶标记及质量鉴定本试验采用改良过碘酸钠法将辣根过氧化物酶标记在抗体上[1]，标记完后取上清用Sephedex G200 凝胶层析进行纯化，洗脱液为0.2mol/L pH7.4的PBS，流速为15ml/h，分步收集，每支3ml，以紫外分光光度计测A280吸光度值，以洗脱体积为横坐标，吸光值为纵坐标做图，收集第一峰即为酶标抗体峰。标记完后用紫外分光光度计在分别在280nm、及403nm处测定酶标记物的A值，计算免疫球蛋白量、摩尔比值、酶结合率以及标记率。3.2 包被用缓冲液及最适包被抗原浓度的优化3.2.1 包被缓冲液的优化包被抗原时，为了得到最佳的包被效果，我们采用了碳酸盐缓冲液（50mM ph9.6 ）、磷酸盐缓冲液（50mM ph7.6）、以及TRIS盐酸缓冲液（50 mM ph7.6）三种缓冲液作为包被液，抗原包被浓度为5ug/ml，及2.5ug/ml,酶标抗体工作浓度为1：40......阅读全文
1 引 言 电化学发光免疫分析（ECLIA）将电化学、光谱学和免疫学紧密结合，具有电化学电位的可控性、发光分析的高灵敏度及免疫反应的特异性，在医疗诊断具有良好的应用前景[1]。磁悬浮免疫分析（MSIA）不仅保持了悬浮分析的所有优点，利用磁性免疫复合物在近似均相的条件下实现快速的免疫