方法二：细菌基因组DNA的微量提取法
本方法通过SDS裂解细胞，蛋白酶降解蛋白，CTAB去除多糖成分一：仪器：同方法一 二：试剂：TE、TAE缓冲液；10%SDS；５ＭNaCL；20mg/ml蛋白酶Ｋ；CTAB/NaCL溶液(10% CTAB，0.7M NaCL 4.1gNaCL 溶于80ml水中，缓慢加入10gCTAB，加热溶解)；25/24/1,酚/氯仿/异戊醇; 24/1,氯仿/异戊醇；异丙醇；７０％及100%乙醇三：操作 1.5ml 对数生长期细菌细胞 离心，5000rpm,1min 沉淀 ......阅读全文
定位全基因组范围DNA修复的新方法
北卡罗来纳大学的研究人员近日开发出一种全基因组范围的测序分析，可定位DNA切除修复。这种被称为切除修复测序（XR-seq）的方法发表在新一期的《Genes & Development》杂志上。 这项研究的通讯作者是北卡罗来纳大学医学院生物化学及生物物理系的Aziz Sancar以及芝加哥大学人
用于PCR的植物基因组DNA快速制备方法（一）
一种用于PCR的植物基因组DNA快速制备方法 来源：方统科技----------------------------------------------------------------------------------摘要： 本文介绍了一种用于PCR的植物基因组DNA的快速制备方法。该方法
DNA片段的回收实验——微量柱法
实验材料DNA片段试剂、试剂盒纯化试剂盒异丙醇仪器、耗材离心机电泳仪电泳槽取液器微量真空装置抽滤装置实验步骤1. 紫外灯下从胶上切下目的片段，放入一Epphendof管中。2. 离心管在－20℃冷却5~10分钟。3. 将微量柱下套上一Epphendof管，将冷却的胶条装进微量柱中，4℃12 0
细菌的分布（二）
呼吸道的细菌，鼻腔和咽部经常存在葡萄球菌、类白喉杆菌等。在咽喉及扁桃体粘膜上，主要是甲型链球菌和卡他球菌占优势，此外还经常存在着潜在致病性微生物如肺炎球菌、流感杆菌、乙型链球菌等。正常人支气管和肺泡是无菌的。 泌尿生殖道的细菌，正常情况下，仅在泌尿道外部有细菌存在，如男性生殖器有耻垢杆菌，尿道
细菌的结构（二）
2．革兰氏阳性菌细胞壁特殊组份细胞壁较厚，约20～80mm。肽聚糖含量丰富，有15～50层，每层厚度1nm,约占细胞壁干重的50～80%。此外，尚有大量特殊组份磷壁酸(Teichoic acid)。 （图2-6)磷壁酸是由核糖醇(Ribitol)或甘油(Glyocerol)残基经由磷酸二
水稻总DNA的快速少量抽提CTAB法
DNA分子是分子生物学研究的基本材料，依不同的实验目的可采取不同的抽提方法获取数量和质量不等的 DNA 。 实验目的：了解植物 DNA 抽提的主要方法，掌握 CTAB 法快速抽提水稻 DNA 。 实验材料及试剂： 水稻 叶片，1.5 × CTAB ，氯仿 / 异戊醇 (24:1) ，
通过PCR方法对微量DNA进行定量分析实验
基本方案 实验材料 DNA 试剂、试剂盒
通过PCR方法对微量DNA进行定量分析实验
实验材料 DNA试剂、试剂盒 蛋白酶消化缓冲液20 mg ml蛋白酶K (储于-20℃)用 50 mmol L Tris . Cl 10 mmol L EDTA pH 7.4 缓冲的酚（储于室温）24 ：1（V V)氯仿 异戊醇10 mol L乙酸按冰冷的100%乙醇70%乙醇TE缓冲液pH
通过PCR方法对微量DNA进行定量分析实验
PCR被用于从每样品的1〜20 000个分子中定量某一特定DNA序列的 数量。此外，它可辅助评估那些造成这类实验失败的污染序列的存在。来源：《精编分子生物学实验指南》第五版实验材料DNA试剂、试剂盒蛋白酶消化缓冲液20 mg ml蛋白酶K (储于-20℃)用 50 mmol L Tris . Cl
基因组DNA的快速纯化
第 1 天1. 大约 1.5 cm 长的尾部活检样品放在一个 1.5 ml 盛有 0.7 ml 尾部缓冲液的小离心管中，加 35 μl 10 mg/ml蛋白酶 K，在 55℃ 振摇温育过夜。尾部缓冲液（配 25 ml）50 mmol/L Tris，pH 8
植物基因组DNA的RFLP
实验概要本实验介绍了植物基因组DNA的RFLP多态性分析的原理及操作步骤。通过本实验可了解不同植物或同一植物不同个体之间基因组DNA顺序的差异性，掌握DNA限制性酶切片段长度多态性研究的基本方法。实验原理DNA多态性是指DNA碱基顺序的差异性。这种差异性不仅存在于不同的植物之间，也存在于同一种植物的
拟南芥基因组DNA的提取
实验概要本实验介绍了用CTAB法提取拟南芥基因组DNA。主要试剂CTAB提取液(2%CTAB，50mMEDTA，50mM Tris-HCl，PH 8.0，0.84M NaCI，0.05%巯基乙醇)，氯仿，无水酒精，70%的酒精主要设备1.5 mL离心管，65℃水浴锅，高速离心机，研钵实验材料拟南芥叶
从全血中纯化基因组－DNA－实验方法
试剂、试剂盒 乙醇异丙醇RNA 酶 A全血仪器、耗材 琼脂糖凝胶电泳离心管Wizard 基因组 DNA 纯化试剂盒实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂乙醇，70%，室温异丙醇, 室温RNA 酶 A将 RNA 酶 A 溶解于 DNA 再水合液中至终浓度为 4 mg/ml, 煮沸 10min 以去
从全血中纯化基因组－DNA－实验方法
用于从全血（10 ml) 中分离基因组 DNA 的 Wizard 基因组 DNA 纯化试剂盒建立在一个四步程序基础上的。纯化程序的第一步包括血红细胞的裂解、可溶部分的弃除，随后是白细胞及其细胞核的裂解。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。试剂、试剂盒乙醇异丙醇RNA 酶 A
从全血中纯化基因组－DNA－实验方法
试剂、试剂盒 乙醇 异丙醇 RNA 酶 A 全血 仪器、耗材 琼脂糖凝胶电泳
Chelex100法提取微量DNA
Chelex-100法提取微量DNA1. Add 1/50 volume of Proteinase K (10 mg/mL) and incubate the sample at 65°C for 2 hrs to overnight.2. 200 uL 5% Chexlex-100,add 10
乙醇固定样品DNA－抽提和直接PCR
实验概要本实验从乙醇浸泡的鱼苗中提取DNA，并利用直接PCR进行了鉴定。实验原理在实际的研究工作中，野外取样的地点一旦较为偏远，受条件的限制，很难保证得到的样品活体或能够快速冷冻；另外，对一些稀有物种和濒危种，鲜活样品的采集十分困难，一般为了解决这些问题，常采用乙醇和甲醛固定的方法来处理样品，再对样
DNA新“写法”提振合成生物学
虽然科学家能以更快的速度阅读DNA序列，但其编写DNA的能力并未跟上。那些想要的用于诸如合成生物学等领域的“定制”DNA，只能勉强对付在缓慢且昂贵的化学过程中被合成的短链。 这种情况似乎即将改变。近日，来自法国一家生物技术初创公司的研究人员在于美国旧金山举行的合成生物学会议上宣布，利用生物体内
高通量的PCR模板植物基因组DNA制备方法（三）
将纯化定量的水稻品种(93-11)基因组DNA标准样品(0.5~8 ng)与1.0 µL本方法制备的水稻品种(02428)基因组DNA混合作为模板，用InDel 标记引物(表1)进行PCR扩增和PAGE检测。箭头指某反应(或2个反应之间)其02428与93-11条带的信号值大致相等(即DNA
高通量的PCR模板植物基因组DNA制备方法（一）
摘 要：制备大量生物样品的模板DNA用于PCR检测是费时费人工的工作。本文介绍一种高通量的植物基因组DNA(gDNA)快速制备及其用于PCR基因型检测的操作方法。将一小段单子叶植物苗叶片(长度约30 mm或40 mm，与96方孔板的孔深大致相同) 或一小块(约2~4 mg)双子叶植物叶片放入9
采用Agilent－Femto－Pulse系统对不同基因组DNA提取进...（二）
Femto Pulse 系统使用基因组 DNA 165 kb扩展法来分离大于 80 kb 的提取 gDNA（图 1）。使用 Agilent ProSize 数据分析软件上的 Smear Analysis 选项卡分析 gDNA 的分子量分布。弥散条带分子量分布包含整个弥散条带范围内的浓度分布。
动物组织基因组DNA提取试剂盒使用说明（二）
六、方案1. 动物组织DNA提取该方案适合于从1~20mg动物组织，如肝脏、脾脏、肾脏、老鼠尾巴等组织样品中提取DNA，以下离心操作都在室温进行。把1~20 mg组织样品(或10 mg肝脏、肺或脾脏)剪切成尽量小的碎片，并转移至1.5ml离心管中。加入230µl Buffer MTL和20µl
DNA的定量（二）
2. EB荧光分析法（1）琼脂糖凝胶的制备。（2）样品的准备。把待测DNA样品进行1：2连续稀释，并准备一份DNA标准液作对照。（3）上样。稀释样品与上样缓冲液按1：5混合均匀后上样。（4）电泳。用100V稳压电泳至溴酚蓝指示剂迁移到凝胶的3/4处停止电泳。（5）取出凝胶，入EB荧光染液中作用20m
索氏提取法食品脂肪质量时如何判断抽提是否完全
索氏抽提取器是由回流冷凝管、提脂管、提脂烧瓶三部分所组成，抽提脂肪之前应将各部分洗涤干净并干燥，提脂烧瓶需烘干并称至恒量④抽提将滤纸筒放入索氏抽提器中，连接已干燥至恒重的脂肪接收瓶，由冷凝管上端加入无水乙醚或石油醚至接收瓶体积的2/3，在水浴上加热，使乙醚或石油醚不断的回流，一般抽提6~8h，至抽提
索氏提取法食品脂肪质量时如何判断抽提是否完全
索氏抽提取器是由回流冷凝管、提脂管、提脂烧瓶三部分所组成，抽提脂肪之前应将各部分洗涤干净并干燥，提脂烧瓶需烘干并称至恒量④抽提将滤纸筒放入索氏抽提器中，连接已干燥至恒重的脂肪接收瓶，由冷凝管上端加入无水乙醚或石油醚至接收瓶体积的2/3，在水浴上加热，使乙醚或石油醚不断的回流，一般抽提6~8h，至抽提
索氏提取法食品脂肪质量时如何判断抽提是否完全
索氏抽提取器是由回流冷凝管、提脂管、提脂烧瓶三部分所组成，抽提脂肪之前应将各部分洗涤干净并干燥，提脂烧瓶需烘干并称至恒量④抽提将滤纸筒放入索氏抽提器中，连接已干燥至恒重的脂肪接收瓶，由冷凝管上端加入无水乙醚或石油醚至接收瓶体积的2/3，在水浴上加热，使乙醚或石油醚不断的回流，一般抽提6~8h，至抽提
煮沸裂解法制备质粒DNA实验——煮沸裂解法大量制备质粒DNA
实验方法原理经 Triton X-100、溶菌酶和加热处理可从大量（500 ml ) 细菌培养物中分离质粒 DNA，所获得的质粒通过柱层析或 CsCl-溴化乙锭梯度离心可进一步纯化。试剂、试剂盒抗生素乙醇异丙醇乙酸钠STETTE溶菌酶仪器、耗材LB、YT 或 Terrific 培养液沸水浴实验步骤一
细菌细胞的制备实验实验——细胞抽提物的制备
实验材料细胞试剂、试剂盒弗氏破碎缓冲液匀浆缓冲液仪器、耗材弗氏破碎器实验步骤1. 将 5~10 g 新鲜或冻存的细胞沉淀物垂悬于弗氏破碎缓冲液中或者适当的匀浆缓冲液中。通常 4L 的大肠杆菌培养物可以获得大约 7.5 g 的细胞沉淀。2. 悬液中加入无 RNase 的 DNase 至终浓度为 2 μ
细菌总DNA的提取和鉴定
【目的和要求】1.学会CTAB法提取细菌总DNA。2.掌握DNA的琼脂糖凝胶电泳法。【实验原理】DNA在生物体内是与蛋白质形成复合物的形式存在的，因此提取出脱氧核糖核蛋白复合物后，必须将其中蛋白质去除。CTAB（溴代十六烷基三甲胺）是一种去污剂，它能与核酸形成复合物，在高盐溶液中可溶并且稳定存在，若
细菌质粒－DNA－的小量制备实验
细菌质粒的发现是微生物学对现代分子生物学发展的重要贡献之一。特别是自 70 年代末以来，根据质粒分子生物学特性而构建的一系列克隆和表达载体更是现代分子生物学发展、改良生物品种和获得基因工程产品不可缺少的分子载体，发展十分迅速，而质粒的分离和提取则是最常用和最基本的实验技术，其方法很多。仅大肠杆菌质粒