Cosmid提取技术
Day OneStart overnight cultures of Cosmid in fresh L-Broth + 25 ug/ml kanamycin. 4 x 250 ml each, inoculate each with metal loop from frozen glycerol stocks.Grow cultures for 12 hours(do not let go for more than 14 hrs.)Day TwoSpin down cultures in 250 ml bottles in Beckman JA-17 rotor at 6,000 rpm for 15 min.Pour off sups, freeze pellets at -20°C for 10 min.Resuspend in 10 ml GET solution + 1 mg/ml lysozyme each, tr......阅读全文
蛋白质提取与纯化技术
实验概要大肠杆菌表达蛋白以可溶和不溶两种形式存在,需要不同的纯化策略。现在,许多蛋白质正在被发现而事先并不知道它们的功能,这些自然需要将蛋白质分离出来后,进行进一步的研究来获得。分析蛋白质的方法学现已极大的简化和改进。必须承认,蛋白质纯化比起DNA克隆和操作来是更具有艺术性的,尽管DNA序列具有异乎
免疫球蛋白提取技术(二)
4、禽血清IgG的分离与提纯(Na2SO4法)(1)试剂①5%葡聚糖硫酸盐②0.02Mol/L MnCl2溶液③无水硫酸钠④pH8.2硼酸盐缓冲液⑤0.06Mol/L pH7.4PB液(2)操作方法①取禽血清10ml加5%葡聚糖硫酸盐液,0.40ml和0.025Mol/L MnCl21.00ml充分
蛋白质提取与纯化技术
以蛋白质和结构与功能为基础,从分子水平上认识生命现象,已经成为现代生物学发展的主要方向,研究蛋白质,首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识,但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别,把它们分配到可用机械方法分离的两个或几个
中药萃取技术提取草本绞股蓝工艺
绞股蓝提取物是从绞股蓝这种植物中分离出50余种绞股蓝皂甙,和人参皂甙一样,同属于四环三萜类玛皂甙。中医学认为,绞股蓝味苦、性寒,具清热解毒、补气、止咳、祛痰之功能。随着离心萃取技术的飞跃发展,离心萃取技术溶剂萃取法已经普遍应用到中药提取行业。中药萃取技术是融合现代制药新技术的新型中药技术,它是通过对
免疫球蛋白提取技术(一)
免疫球蛋白(Immunoglobulin Ig)的含量代表着机体体液免疫的水平,并进一步代表着B细胞的功能,因此测定血清Ig含量可以推知机体的体液免疫功能和诊断某些疾病引起的Ig的过高和过低。随着免疫学的发展和需要,免疫球蛋白的纯化和其成分的提纯成为必不可少的手段。纯化的方法很多,有单一法,但大多数
DNA提取纯化新技术浅谈——核酸电泳纯化技术
核酸的提取和纯化是法医DNA物证检验的关键技术之一,目前实验室最常用的方法包括核酸纯化柱(Spin column)磁珠法和clean-up系统,磁珠法由于操作简便、快速,能够提取到高纯度的核酸DNA,并且可以自动化,因此成为目前法医DNA实验室核酸提取纯化的主要手段。但磁珠法由于磁珠吸附DN
粘粒
Preparation of Cosmid DNAPreparation of Cosmid DNA from 50 ml Cultures (Donis Keller Lab)Cosmid vectors containing foreign DNA inserts are known to re
粘粒
Preparation of Cosmid DNAPreparation of Cosmid DNA from 50 ml Cultures (Donis Keller Lab)Cosmid vectors containing foreign DNA inserts are known to re
单细胞提取与质谱联用的新型无损提取检测技术(一)
单细胞代谢组学分析能够为对细胞功能分析提供诸多帮助。但是受制于测试条件问题,所得到的结果一直并不理想。随着质谱与单细胞提取手段的发展,目前已经出现了多种不同的提取方法。本文就基于FluidFM提取技术和MALDITOF联用的新型无损提取测试技术进行简述。众所周知由于细胞异质性的存在,使得每个细胞的实
化繁为简!普敦新技术全自动提取仪,专用于小分子提取
分析测试百科网讯 2021年6月3日第十四届中国国际食品安全技术论坛(CBIFS2021)在杭州国际博览中心隆重召开。本次论坛邀请行业权威专家发表精彩演讲和经验分享,吸引了政府部门、检测机构、科研院所、高校和食品企业近千名专业人士参加。普敦携多款产品亮相本次展会。 普敦展台 全自动提取仪Au
蛋白质提取与纯化技术2
2、等电点沉淀法 蛋白质在静电状态时颗粒之间的静电斥力最小,因而溶解度也最小,各种蛋白质的等电点有差别,可利用调节溶液的pH达到某一蛋白质的等电点使之沉淀,但此法很少单独使用,可与盐析法结合用。 3、低温有机溶剂沉淀法 用与水可混溶的有机溶剂,甲醇,乙醇或丙酮,可使多数蛋白质溶解度降低并析出,此法分
碱裂解法提取质粒实验技术分析
碱裂解法提取质粒实验技术分析[实验原理]羊源性成分核酸检测PCR-荧光探针试剂盒碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们。在pH值介于12.0~12.5这个狭窄的范围内,线性的DNA双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒DNA的氢键会
蛋白质提取与纯化技术(一)
以蛋白质和结构与功能为基础,从分子水平上认识生命现象,已经成为现代生物学发展的主要方向,研究蛋白质,首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识,但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别,把它们分配到可用机械方法分离的两个或几个物相
蛋白质提取与纯化技术1
选择材料及预处理以蛋白质和结构与功能为基础,从分子水平上认识生命现象,已经成为现代生物学发展的主要方向,研究蛋白质,首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识,但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别,把它们分配到可用机械方法分离
脱落细胞发现提取技术及设备(二)
使用真空镀膜可显现布料上的抓、推痕迹,不但可实现接触DNA定位,且可对于判断案件性质发挥关键作用502熏显手印技术 502熏显柜广泛在国内公安单位使用,由于502熏显显现手印的原理是熏显胶中的氰基丙烯酸乙酯( ethyl - cyanoacrylate,ECA)与手印纹线发生聚合反映后生成乳白色聚合
四种活细胞提取技术概述
最新的贴壁活细胞提取技术——Cytosurge多功能单细胞显微操作系统FluidFM BOT 当今,对细胞内表达物的监控对于研究细胞分化、细胞衰老以及细胞病变、药物代谢等领域中发挥着越来越重要的作用。本文将对常用的几种活细胞提取技术进行概括为什么要进行活细胞提取?在传统的细胞提取技术中往往使用化学、
蛋白质提取与纯化技术(一)
选择材料及预处理以蛋白质和结构与功能为基础,从分子水平上认识生命现象,已经成为现代生物学发展的主要方向,研究蛋白质,首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识,但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别,把它们分配到可用机械方法分离
蛋白质提取与纯化技术(二)
二、蛋白质的分离纯化蛋白质的分离纯化方法很多,主要有:(一)根据蛋白质溶解度不同的分离方法1、蛋白质的盐析 中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响,一般在低盐浓度下随着盐浓度升高,蛋白质的溶解度增加,此称盐溶;当盐浓度继续升高时,蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出,这种现象称盐析,将大量盐加到蛋白质溶
蛋白质提取与纯化技术3
1、减压加温蒸发浓缩 通过降低液面压力使液体沸点降低,减压的真空度愈高,液体沸点降得愈低,蒸发愈快,此法适用于一些不耐热的生物大分子的浓缩。 2、空气流动蒸发浓缩 空气的流动可使液体加速蒸发,铺成薄层的溶液,表面不断通过空气流;或将生物大分子溶液装入透析袋内置于冷室,用电扇对准吹风
索氏提取器技术和工作原理
一、索氏提取器工作原理: 索氏提取器是以索氏抽提、重量测定为基本原理来测定脂肪含量;即在溶剂的存在下,溶解脂肪,使脂肪随溶剂提炼出来,用抽提法使脂肪从溶剂中分离出来,烘干、称重、计算出脂肪含量。 二、索氏提取器技术指标: 1、提取范围:含粗脂肪量在≥0.5%范围内的粮食、饲料
蛋白质提取与纯化技术(三)
一、样品的浓缩生物大分子在制备过程中由于过柱纯化而样品变得很稀,为了保存和鉴定的目的,往往需要进行浓缩。常用的浓缩方法的:1、减压加温蒸发浓缩通过降低液面压力使液体沸点降低,减压的真空度愈高,液体沸点降得愈低,蒸发愈快,此法适用于一些不耐热的生物大分子的浓缩。2、空气流动蒸发浓缩 空气的流动可使液体
利用蒸发技术提取与制作大麻油
大麻中的精神药物成分THC会使人麻醉。除此之外,它还有许多治疗作用。目前,德国政府正在讨论如何将医用大麻合法化。大麻油萃取技术仍具有较大优化潜力。 图1 更多欲望——大麻中精神药物成分THC四氢大麻酚 加州Gold萃取技术公司是一家专门为美国加利福尼亚州生产医用四氢大麻酚油(T
超声波循环提取技术的应用
超声波循环提取技术在油料精深加工中亦具有诸多优势,在多种油料加工中可替代传统加工方式,降低加工成本,提高产品质量。 l、超声波循环提取在植物油提取上的应用 使用超声提取,超声波空化作用可产生微声流,能有效打破边界层,大大加快扩散速度,有效地提高提出速度2—10倍。方法简便、出油率高、油味纯正、
蛋白质提取与纯化技术(二)
2、等电点沉淀法 蛋白质在静电状态时颗粒之间的静电斥力最小,因而溶解度也最小,各种蛋白质的等电点有差别,可利用调节溶液的pH达到某一蛋白质的等电点使之沉淀,但此法很少单独使用,可与盐析法结合用。3、低温有机溶剂沉淀法 用与水可混溶的有机溶剂,甲醇,乙醇或丙酮,可使多数蛋白质溶解度降低并析出,此法分辨
核酸提取仪的技术背景是什么?
核酸提取仪是完成样本核酸提取工作的仪器,核酸的提取,广泛应用在疾病控制中心、临床疾病诊断、输血安全、法医学鉴定、环境微生物检测、食品安全检测、畜牧业和分子生物学研究等多种领域。所以生物检测越来越得到人们的重视,现阶段的核酸提取步骤繁琐,需要多种设备协同完成,核酸提取仪应运而生,但现阶段的核酸提取
免疫球蛋白提取分离纯化技术
实验概要免疫球蛋白(Immunoglobulin Ig)的含量代表着机体体液免疫的水平,并进一步代表着B细胞的功能,因此测定血清Ig含量可以推知机体的体液免疫功能和诊断某些疾病引起的Ig的过高和过低。本实验对禽血清IgG和IgA进行了分离纯化。实验原理免疫球蛋白包括IgG、IgM、IgA、IgE和I
脱落细胞发现提取技术及设备(一)
什么是脱落细胞DNA?脱落细胞DNA,也称为接触痕迹DNA,遵循“洛卡德物质交换理论”,是指由于人体接触物体后遗留在客体表面的痕迹,通过有效的提取方式得到人体上皮细胞,并针对这些细胞进行DNA检验。人体每天脱落约40万个上皮细胞,但这些上皮细胞是获得DNA分型成功率最低的人体组织,由于每个人的生活方
全自动磁珠提取纯化技术——Thermo-Scientific-kingfisher技术-一
技术原理:KingFisher系列产品是适于分离DNA/RNA、蛋白和细胞的全自动提取纯化系统,专为解决客户现在和未来的所有纯化问题而设计。创新的产品基于ZL的KingFisher技术(ZL号US 6447729, US 6448092),通过特制的磁棒吸附、转移和释放磁珠,从而实现磁珠/样
全自动磁珠提取纯化技术——Thermo-Scientific-kingfisher技术-二
食品安全领域的应用经过特殊处理的Dynal免疫磁珠可以快速的从食品样品、环境中富集致病菌,如沙门氏菌(Salmonella)、李斯特菌(Listeria)、军团菌(Legionella)、大肠杆菌O157(E. coli O157)、贾地鞭毛虫(Giardia cysts)和隐孢子虫 (Cryp
生物样品的前处理技术DNA的提取
DNA主要存在于细胞核中,绝大数以脱氧核糖核蛋白形式存在。以1mol/L氯化钠溶液提取,将得到的脱氧核苷酸核蛋白黏液与含少量辛醇和戊醇的氯仿一起摇荡,除去蛋白质。