用基于荧光的方法来评价细胞的增殖

简介体外监测细胞的增殖对于基础研究和应用研究都极有价值并有潜力应用在临床领域。 3H-thymidine 或 5-bromo-deoxyuridine (BrdU, 胸苷的类似物 ) 掺入法是确定培养细胞的增值率的传统方法,这主要是因为几乎没有更方便的替代方法。因而人们投入了大量的精力来开发一种快速、可重复的用来检测细胞分裂的方法,多数研究最终集中在使用荧光化合物上。然而,现在还没有能够在细胞分裂过程中特异的掺入细胞,并能直接在单细胞水平上检测到的荧光物质。借助流式细胞仪利用荧光标记的抗 BrdU 的抗体来检测在 DNA 合成过程中掺入的 BrdU 的方法可以间接检测快速增值的细胞。 Hoechst 染料也可被用于检测 BrdU 的掺入,因为 BrdU 掺入的地方其荧光信号被淬灭。这种方法也可被用于细胞增值的研究,特别是细胞循环分析中。然而另一种基于 BrdU 的利用荧光监测细胞增殖的方法是通过光裂解法的链断裂诱导。在这个例子中......阅读全文

什么是细胞增殖?

细胞增殖是细胞生长和分裂产生两个子细胞的过程。细胞增殖导致细胞数量呈指数增长,因此是组织生长的快速机制。细胞增殖需要细胞生长和细胞分裂同时发生,以使细胞的平均大小在群体中保持不变。细胞分裂可以在没有细胞生长的情况下发生,产生许多逐渐变小的细胞(如合子的分裂)),而细胞生长可以在没有细胞分裂的情况下产

细胞增殖检测:BrdU

5-brdu 的分子量为307.1,将100mg分为三份30.7mg(0.1mmol),溶于1ml三蒸水,分装-20度保存。用的时候再稀释100倍,如在1ml 溶液里加入10ul即可。尽量分装为小剂量,如100ul,避免反复冻融使其活性降低。 1、BudR贮存液的配制 BudR 5mg(先用0.5m

绘制细胞增殖曲线

实验概要为了掌握细胞的增殖速率,常用的方法有不同时间点细胞数目统计、MTT法绘制增殖曲线等。下面以MTT法为例,简述绘制增殖曲线的方法。实验原理活细胞线粒体中的脱氢酶能够还原黄色的MTT为蓝紫色的不溶于水的甲瓉(formazan),甲瓉的多少可通过酶标仪测定其在490nm处的光密度(Optical

流式细胞计量术(基于荧光的蛋白质分析)实验2

活细胞表面抗原的荧光染色(间接免疫荧光)实验材料细胞试剂、试剂盒PBS 溶液叠氮化钠实验步骤1. 在培养皿中加入 1 mmol/L EDTA/1 mmol/L EGTA 的 PBS 溶液,收获细胞。此程序比通常的胰蛋白酶消化时间长。4℃ 1000 g 离心 5 分钟。操作始终在冰上进行。2. 用 4

基于膜透过荧光蛋白的邻近细胞标记技术获进展

  1月3日,国际学术期刊PNAS发表了中国科学院分子细胞科学卓越创新中心(生物化学与细胞生物学研究所)周斌组和复旦大学附属中山医院王立新教授合作的研究成果“Genetic dissection of intercellular interactions in vivo by membrane-pe

用什么染料可以实现全细胞荧光

顾名思义,就是整个细胞都可以荧光。染料:亲脂性羰花青染料或吖啶橙就可以原理:当用一种波长的光(如紫外光)照射某种物质时,这种物质会在极短的时问内发射出较照射波长为长的光(可见的光),这种光就称为荧光。有些生物材料受到紫外线照射后能直接发出荧光称自发荧光(或直接荧光);有的生物材料受紫外线照射后并不发

基于X射线荧光的指纹元素成像

中国科学院高能物理研究所王萌研究员  中国科学院高能物理研究所王萌研究员发表主题为“基于X射线荧光的指纹元素成像”的精彩报告。指纹中化学元素可为科学研究和应用提供丰富信息。应用同步辐射X射线荧光仪可分析指纹元素,生成元素成像图。课题组分析了在不同基底上的防晒霜指纹,得到了钛和锌的指纹成像图以及元素比

检测treg细胞检测直接用荧光一抗好还是用荧光二抗好

一抗确实要依照你所用的抗体而言,建议是在1:100-1:500之间,在稀释的我就没用过了。其实我大部分抗体的浓度多是在1:100 左右浮动。二抗我都是用的1:50-1:100.再稀释的比率效果不是很好。

小鼠多能ES细胞的增殖实验

            试剂、试剂盒 PBS 胰酶溶液 仪器、耗材 MEF 滋养板 巴斯德吸管 ES 生

细胞增殖检测:适合才是最好的

  细胞增殖检测的应用相当广泛,不论是测试药物试剂还是生长因子的效果,不论是评估细胞毒性还是分析细胞活性状态,您都可能会用到它。细胞增殖检测一般是检测分裂中的细胞数量或者细胞群体发生的变化。细胞增殖检测主要分为四类:DNA合成检测、代谢活性检测、细胞增殖相关抗原检测和ATP浓度检测。在这些方法中作何

血细胞的增殖如何进行?

  有丝分裂是血细胞分裂的主要形式。在这种增殖中,母细胞有丝分裂后形成的子细胞同时都趋向分化成熟。  巨核细胞则是以连续双倍增殖DNA的方式,即细胞核成倍增殖,每增殖一次,核即增大一倍,而胞浆并不分裂,故巨核细胞体积逐渐增大,属多倍体细胞。

简述细胞增殖的基本概念

  意义:细胞增殖是生活细胞的重要生理功能之一,是生物体的重要生命特征。细胞的增殖是生物体生长、发育、繁殖以及遗传的基础。  方式:真核生物的分裂依据过程不同有三种方式,有有丝分裂,无丝分裂,减数分裂。其中有丝分裂是人、动物、植物、真菌等一切真核生物中的一种最为普遍的分裂方式,是真核细胞增殖的主要方

干细胞增殖和分化的特征

干细胞,起源细胞,是具有增殖和分化潜能的细胞,具有自我更新复制的能力,能够产生高度分化的功能细胞。简单来讲,它是一类具有多向分化潜能和自我复制能力的原始未分化细胞,是形成哺乳类动物的各组织器官的原始细胞。干细胞具有经培养不定期地分化并产生特化细胞的能力。在正常的人体发育环境中,它们得到了最好的诠释。

小鼠多能ES细胞的增殖实验

            试剂、试剂盒 PBS 胰酶溶液 仪器、耗材 MEF 滋养板 巴斯德吸管 ES 生

简述效应B细胞的增殖方式

  浆细胞(plasmacell)B淋巴细胞在抗原刺激下分化增殖而形成的一种不再具有分化增殖能力的终末细胞。在分化过程中获得特有的浆细胞抗原,这是浆细胞区别于淋巴细胞的主要膜标志。浆细胞在体内的分布与淋巴细胞大致相似,主要分布在淋巴结和脾脏。B细胞接受抗原信息刺激后,最初形成体积较大的浆母细胞。在浆

MTS法测定细胞增殖的原理

MTS法原理:被测物质溶液的颜色或加入显色剂后生成的有色溶液的颜色,颜色深度和物质含量成正比,则根据光被有色溶液吸收的强度,即可测定溶液中物质的含量。跟MTT法区别如下:一、指代不同1、MTT法:利用有色物质对特定波长光的吸收特性来进行定性分析的一种方法。2、MTS法:是一种检测细胞存活和生长的方法

轻松解决细胞增殖的检测方法

无论单细胞还是多细胞都是以细胞分裂的方式产生新的细胞,进行增殖,用来补充体内衰老或死亡的细胞。 细胞增殖的研究方法有很多,主要包括:BrdU,EdU,CCK8等方法。其中EdU检测方法是最新的细胞增殖检测方法。 ①试剂盒检测细胞代谢活性(基于mtt、cck-8等) mtt(噻唑蓝):通过添加四咪唑盐

细胞增殖的减数分裂

  是一种特殊方式有丝分裂,它与有性生殖细胞的形成有关。它是进行有性生殖的生物,在原始的生殖细胞(如动物的精原细胞或卵原细胞)发展为成熟的生殖细胞(精子或卵细胞)的过程中,要经过减数分裂。在整个减数分裂过程中,染色体只复制一次,而细胞连续分裂两次。减数分裂的结果是,新产生的生殖细胞中的染色体数目,比

卵原细胞的特点和增殖过程

对于人类来说,卵原细胞的增殖期到胚胎发育结束时已完成。胚胎在母体子宫内发育到约第三个月时,胚胎的卵巢中卵原细胞开始进行细胞分裂,并生长增大,发育成初级卵母细胞。因此,女性生殖周期中能够分化成卵的所有卵原细胞在诞生之前就已经形成了。

MTS法测定细胞增殖的原理

MTS法原理:被测物质溶液的颜色或加入显色剂后生成的有色溶液的颜色,颜色深度和物质含量成正比,则根据光被有色溶液吸收的强度,即可测定溶液中物质的含量。跟MTT法区别如下:一、指代不同1、MTT法:利用有色物质对特定波长光的吸收特性来进行定性分析的一种方法。2、MTS法:是一种检测细胞存活和生长的方法

淋巴细胞增殖功能的测定

淋巴细胞增殖和分化是机体免疫应答过程的一个重要阶段。因此,检测淋巴细胞增殖水平是细胞免疫研究和临床免疫功能检测的一种常用方法。  (一) 原理  T细胞、B细胞表面具有识别抗原的受体和有丝分裂原受体,在特异性抗原刺激下可使相应淋巴细胞克隆发生增殖。植物血凝素(PHA)、刀豆蛋白A(ConA),抗CD

生殖精原细胞增殖的生理意义

生殖精原细胞的增殖具有重要的生理意义。在增殖过程中,通过精原细胞的分裂和分化,由精原细胞产生精母细胞,进入成熟分裂,因而通过增殖可大大增加精母细胞的数量。按理论推算,一个精原细胞通过数次细胞分裂,可形成上百个初级精母细胞。但在生精过程早期,生精细胞很易发生变性,故实际上少于这个数字。在精原细胞的增殖

小鼠多能ES细胞的增殖实验

试剂、试剂盒PBS胰酶溶液仪器、耗材MEF 滋养板巴斯德吸管ES 生长培养基实验步骤1. 准备下列试剂和材料:60 mm MEF 滋养板(接种不能超过 7 天)带棉塞无菌巴斯德吸管无 Ca2+ 和 Mg2+ PBSES 生长培养基胰酶溶液2. PBS 冲洗 ES 细胞,巴斯德吸管加胰酶溶液覆盖培养皿

关于细胞增殖的研究方法的介绍

  细胞增殖的研究方法有很多,主要包括:BrdU,EdU,CCK8等方法。其中EdU检测方法是最新的细胞增殖检测方法。  EdU是一种胸腺嘧啶核苷类似物,能够在细胞增殖时期代替T渗入正在复制的DNA分子,通过基于EdU与Apollo®;荧光染料的特异性反应检测DNA复制活性,通过检测EdU标记

关于浆细胞的增殖方式的介绍

  浆细胞(plasmacell)B淋巴细胞在抗原刺激下分化增殖而形成的一种不再具有分化增殖能力的终末细胞。在分化过程中获得特有的浆细胞抗原,这是浆细胞区别于淋巴细胞的主要膜标志。浆细胞在体内的分布与淋巴细胞大致相似,主要分布在淋巴结和脾脏。B细胞接受抗原信息刺激后,最初形成体积较大的浆母细胞。在浆

荧光酶免疫测定的方法评价

  固相荧光酶免疫测定法,避免了血清和其他生物样品的背景荧光会干扰。

荧光偏振免疫测定的方法评价

  荧光偏振免疫测定样品用量少;  荧光素标记结合物稳定,使用寿命长;  方法重复性好;  快速,易自动化;  试剂盒专属性强,适于检测小分子和中等分子物质,不适宜测定大分子物质;  灵敏度较非均相荧光免疫测定法低。

细胞增殖新的工具以确定细胞分裂

 细胞增殖,可能会发生许多刺激如细胞因子的曝光或多种其他进程。BD有一个新的产品,以帮助研究人员研究细胞增殖。空?紫扩散染料450,用于检测细胞的增殖与紫色激光,这有利于使用较大的面板。这使得更多的数据从有限样本使用多色流式细胞仪测定。  VPD450是一个非荧光酯化染料。酯基使染料进入细胞。一旦染

细胞增殖检测:MTT法

细胞增殖检测:MTT法             实验方法原理 MTT 分析法以活细胞代谢物还原剂 3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-

细胞增殖检测:MTT法

MTT法,又称MTT比色法,可以用于:检测细胞存活和生长。实验方法原理MTT 分析法以活细胞代谢物还原剂 3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide, MTT 噻唑蓝为基础。MTT 为黄色化合物,是一种接受氢离子的染