用基于荧光的方法来评价细胞的增殖
简介体外监测细胞的增殖对于基础研究和应用研究都极有价值并有潜力应用在临床领域。 3H-thymidine 或 5-bromo-deoxyuridine (BrdU, 胸苷的类似物 ) 掺入法是确定培养细胞的增值率的传统方法,这主要是因为几乎没有更方便的替代方法。因而人们投入了大量的精力来开发一种快速、可重复的用来检测细胞分裂的方法,多数研究最终集中在使用荧光化合物上。然而,现在还没有能够在细胞分裂过程中特异的掺入细胞,并能直接在单细胞水平上检测到的荧光物质。借助流式细胞仪利用荧光标记的抗 BrdU 的抗体来检测在 DNA 合成过程中掺入的 BrdU 的方法可以间接检测快速增值的细胞。 Hoechst 染料也可被用于检测 BrdU 的掺入,因为 BrdU 掺入的地方其荧光信号被淬灭。这种方法也可被用于细胞增值的研究,特别是细胞循环分析中。然而另一种基于 BrdU 的利用荧光监测细胞增殖的方法是通过光裂解法的链断裂诱导。在这个例子中......阅读全文
用酶标仪检测细胞荧光强度用什么板
一般来说,如果荧光信号比较强的话,建议用黑板。因为荧光需要光源去激发,会引起背景的非特异性激发,而黑色的板壁可以吸收所有折射和反射的杂光。而白色的情况正好相反,可以折射所有的杂光,除非你信号特别弱的时候可以用。如果你的背景激发不明显的话,黑板有时候和透明板的结果也差不多。而价格上,透明板可能比黑板便
用酶标仪检测细胞荧光强度用什么板
一般来说,如果荧光信号比较强的话,建议用黑板。因为荧光需要光源去激发,会引起背景的非特异性激发,而黑色的板壁可以吸收所有折射和反射的杂光。而白色的情况正好相反,可以折射所有的杂光,除非你信号特别弱的时候可以用。如果你的背景激发不明显的话,黑板有时候和透明板的结果也差不多。而价格上,透明板可能比黑板便
细胞增殖的密度限制实验
实验方法原理细胞在无限制培养基中培养,生长至包和密度。用放射自显影测定 3 H-胸腺嘧啶脱氧核苷标记细胞的百分比。实验材料传代用的细胞 试剂、试剂盒生长培养基
细胞增殖的密度限制实验
实验方法原理细胞在无限制培养基中培养,生长至包和密度。用放射自显影测定 3 H-胸腺嘧啶脱氧核苷标记细胞的百分比。实验材料传代用的细胞试剂、试剂盒生长培养基维持培养基D-PBSA胰蛋白酶仪器、耗材24 孔培养板培养皿实验步骤一、材料无菌1. 准备用于传代的细胞 2. 生长培养基 3. 维持培养基(无
关于细胞增殖分裂的介绍
有丝分裂是真核生物进行细胞分裂的主要方式。(右上角图就是常见有丝分裂的开始和结果)多细胞生物体以有丝分裂的方式增加体细胞的数量。体细胞进行有丝分裂是有周期性的,也就是具有细胞周期。 细胞周期 细胞周期是指连续分裂的细胞,从一次分裂完成时开始,到下一次分裂完成时为止,这是一个细胞周期。 一个细
细胞增殖的无丝分裂
细胞无丝分裂的过程比较简单,一般是细胞核先延长,从核的中部向内凹进,缢裂成为两个细胞核;接着,整个细胞从中部缢裂成两部分,形成两个子细胞。因为分裂过程中没有出现纺锤丝和染色体,所以叫做无丝分裂。(如蛙的红细胞)
细胞的增殖及调控介绍
细胞周期亦称有丝分裂周期(mitosis cycle),细胞生长到一定程度,不是繁殖就是死亡。细胞分裂后产生的新细胞生长增大,随后又平均地分裂成两个和原来母细胞“一样”的子细胞,细胞这种生长与分裂的循环称细胞周期。较为普遍的细胞分裂方式为有丝分裂和减数分裂,在生物的个体发育中,这两种分裂方式交替发生
细胞增殖的密度限制实验
实验方法原理 细胞在无限制培养基中培养,生长至包和密度。用放射自显影测定 3 H-胸腺嘧啶脱氧核苷标记细胞的百分比。实验材料 传代用的细胞试剂、试剂盒 生长培养基维持培养基D-PBSA胰蛋白酶仪器、耗材 24 孔培养板培养皿实验步骤 一、材料无菌1. 准备用于传代的细胞 2. 生长培养基 3. 维持
细胞增殖的意义和方式
意义:细胞增殖是生活细胞的重要生理功能之一,是生物体的重要生命特征。细胞的增殖是生物体生长、发育、繁殖以及遗传的基础。方式:真核生物的分裂依据过程不同有三种方式,有有丝分裂,无丝分裂,减数分裂。其中有丝分裂是人、动物、植物、真菌等一切真核生物中的一种最为普遍的分裂方式,是真核细胞增殖的主要方式。减数
血细胞的增殖方式介绍
血细胞的增殖是以分裂的方式进行的,但只有幼稚细胞才有分裂能力,一旦发育成熟到一定阶段后.增殖便告停止。一般细胞分裂的形式有两种:(1)有丝分裂(间接分裂)在细胞分裂时,有特殊的丝体出现,故称为有丝分裂。有丝分裂是血细胞增殖的主要形式。正常人循环血中不出现有丝分裂细胞。有丝分裂细胞在造血组织中的数量,
干细胞的增殖和分化
干细胞的增殖和分化需要诱导相应的增殖和诱导因子。这一领域的研究进展迅速。科学家已经掌握了大量的细胞增殖和分化因子,并能够制造它们。干细胞很容易分化成其他细胞,如何在体外扩增过程中保持未分化的细胞?已经做出了许多努力,例如添加白血病抑制因子等,以抑制干细胞的分化,但仍需要进一步研究抑制干细胞分化的各种
细胞增殖分裂末期的介绍
当这两套染色体别到达细胞的两极以后,每条染色体的形态发生变化,又逐渐变成细长而盘曲的丝。同时,纺锤丝逐渐消失,出现新的核膜和核仁。核膜把染色体包围起来,形成了两个新的细胞核。这个时候,在赤道板的位置出现了一个细胞板,细胞板由细胞的中央向四周扩展,逐渐形成了新的细胞壁。最后,一个细胞分裂成为两个子
血细胞的增殖和成熟
生物的成长伴随着细胞的增殖,这是生命重要的基本特征之一。“增殖”是细胞通过有丝分裂进行复制的过程,其结果是细胞数量的增加。有丝分裂是血细胞增殖的主要形式。“分化”是细胞在基因的调控下,从一般向特殊演变,在此过程中,细胞内部结构的变化而失去某些潜力但同时又获得新的功能。“成熟”是包含在整个发育过程中,
t细胞增殖试验的原理
又称T细胞转化试验。T细胞在体外经某种物质刺激,细胞代谢和形态相继变化,在24~48h细胞内蛋白质和核酸的合成增加,产生一系列增殖的变化,如细胞变化、细胞浆扩大、出现空泡、核仁明显、核染色质疏松等,由淋巴细胞转变为淋巴母细胞。因此,这种淋巴细胞增殖又叫淋巴细胞转化。据此可判断出淋巴细胞对有关刺激
浆细胞的增殖方式介绍
浆细胞(plasmacell)B淋巴细胞在抗原刺激下分化增殖而形成的一种不再具有分化增殖能力的终末细胞。在分化过程中获得特有的浆细胞抗原,这是浆细胞区别于淋巴细胞的主要膜标志。浆细胞在体内的分布与淋巴细胞大致相似,主要分布在淋巴结和脾脏。B细胞接受抗原信息刺激后,最初形成体积较大的浆母细胞。在浆母细
流式细胞计量术(基于荧光的蛋白质分析)实验
活细胞表面抗原的荧光染色(直接免疫荧光) 活细胞表面抗原的荧光染色(间接免疫荧光) 实验材料 细胞
流式细胞计量术(基于荧光的蛋白质分析)实验
活细胞表面抗原的荧光染色(直接免疫荧光)实验材料细胞初始抗体试剂、试剂盒PBS 溶液叠氮化钠实验步骤1. 在培养皿中加入 1 mmol/L EDTA/1 mmol/L EGTA 的 PBS 溶液,轻摇,收获细胞。4℃ 1000 g 离心 5 分钟。2. 用 4 ml PBS+0.1% 叠氮化钠和 1
流式细胞计量术(基于荧光的蛋白质分析)实验
活细胞表面抗原的荧光染色(直接免疫荧光) 活细胞表面抗原的荧光染色(间接免疫荧光) 实验材料 细胞
细胞调亡的研究方法:用荧光激活的细胞分类仪
用荧光激活的细胞分类仪检测调亡细胞1)原位缺口翻译检测裂解的DNA片段1.取106经促调亡物质处理的细胞,用1% BSA-PBS洗涤细胞后加入0.1ml FITC标记的抗CD4或抗CD8单克隆抗体,4℃ 20分钟。用1% BSA-PBS洗涤细胞。置冰上。2.加入0.1ml 1%多聚甲醛,置冰上5分钟
人体细胞的细胞增殖与死亡
细胞增殖细胞增殖是机体生长发育的基础,是通过细胞分裂的形式实现的。人类的细胞分裂主要包括有丝分裂和减数分裂。有丝分裂是人类体细胞的主要分裂方式,减数分裂是人类生殖细胞的分裂方式。 细胞衰老与死亡细胞衰老主要表现为对环境变化适应能力的降低和维持细胞内环境恒定能力的降低不仅形态学结构发生改变,分子水平
血细胞的命名与血细胞的增殖
血细胞的命名 血细胞按所属系列分六大系统。即红细胞系、粒细胞系、单核细胞系、淋巴细胞系、浆细胞系和巨核细胞系。每一系统又依细胞成熟水平分为原始、幼稚和成熟三个阶段;红系和粒系的幼稚阶段又分为早幼、中幼和晚幼三个阶段;而粒细胞根据胞浆所含颗粒特点的不同,又分为中性、嗜酸性和嗜碱性粒细胞。 血细
血细胞的命名与血细胞的增殖
血细胞的命名 血细胞按所属系列分六大系统。即红细胞系、粒细胞系、单核细胞系、淋巴细胞系、浆细胞系和巨核细胞系。每一系统又依细胞成熟水平分为原始、幼稚和成熟三个阶段;红系和粒系的幼稚阶段又分为早幼、中幼和晚幼三个阶段;而粒细胞根据胞浆所含颗粒特点的不同,又分为中性、嗜酸性和嗜碱性粒细胞。 血细
细胞增殖的细胞分裂后期的简介
细胞分裂的后期,每一个着丝点分裂成两个,原来连接在同一个着丝点上的两条姐妹染色单体也随着分离开来,成为两条子染色体。纺锤丝牵引着子染色体分别向细胞的两极,使细胞的两极各有一套染色体。这两套染色体的形态和数目是完全相同的,每一套染色体与分裂以前的亲代细胞中的染色体的形态和数目是相同的。
细胞增殖的细胞分裂中期的简介
细胞分裂的中期,纺锤体清晰可见。这时候,每条染色体的着丝点的两侧,都有纺锤丝附着在上面,纺锤丝牵引着染色体运动,使每条染色体的着丝点排列在细胞中央的一个平面上。这个平面与纺锤体的中轴相垂直,类似于地球上赤道的位置,所以叫做赤道板。分裂中期的细胞,染色体的形态比较固定,数目比较清晰,便于观察清楚。
细胞增殖的前期分裂的简介
细胞分裂的前期,最明显的变化是细胞核中出现染色体。分裂间期复制的染色体,由于螺旋缠绕在一起,逐渐缩短变粗,形态越来越清楚。在光学显微镜下观察这个时期的细胞,可以看到每一条染色体实际上包括两条并列的姐妹染色单体,这两条并列的姐妹染色单体之间不是完全分离开的,而是由一个共同的着丝点连接着。在前期,核
细胞死亡的形态学评价实验_光学及荧光显微术
实验材料细胞悬液试剂、试剂盒LenkostatHoechst 33258吖啶橙 溴化乙锭仪器、耗材光学显微镜荧光显微镜实验步骤一、旋转细胞制备的 Lenkostat 染色1. 在转瓶小室中加入 100 μl 细胞悬液,500 r/min 离心 2 分钟。载玻片风干至少 5 分钟。2. 在 Lenko
什么是细胞增殖?
细胞增殖是生物体的重要生命特征,细胞以分裂的方式进行增殖。单细胞生物,以细胞分裂的方式产生新的个体。多细胞生物,以细胞分裂的方式产生新的细胞,用来补充体内衰老或死亡的细胞。多细胞生物可以由一个受精卵,经过细胞的分裂和分化,最终发育成一个新的多细胞个体。必须强调指出,通过细胞分裂,可以将复制的遗传物质
什么是细胞增殖?
细胞增殖是细胞生长和分裂产生两个子细胞的过程。细胞增殖导致细胞数量呈指数增长,因此是组织生长的快速机制。细胞增殖需要细胞生长和细胞分裂同时发生,以使细胞的平均大小在群体中保持不变。细胞分裂可以在没有细胞生长的情况下发生,产生许多逐渐变小的细胞(如合子的分裂)),而细胞生长可以在没有细胞分裂的情况下产
细胞增殖检测方法
一、胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)渗入法 胸腺嘧啶核苷(TdR)是DNA特有的碱基,也是DNA合成的必需物质。用同位素3H标记TdR即3H-TdR作为DNA合成的前体能掺入DAN合成代谢过程,通过测定细胞的放射性强度,可以反映细胞DAN的代谢及细胞增殖情况。但是具有放射性。 二、MTT检测法 MTT检
绘制细胞增殖曲线
实验概要为了掌握细胞的增殖速率,常用的方法有不同时间点细胞数目统计、MTT法绘制增殖曲线等。下面以MTT法为例,简述绘制增殖曲线的方法。实验原理活细胞线粒体中的脱氢酶能够还原黄色的MTT为蓝紫色的不溶于水的甲瓉(formazan),甲瓉的多少可通过酶标仪测定其在490nm处的光密度(Optical