时间分辨荧光技术原理

荧光和均相性分析理论上,荧光是最灵敏的检测手段。由于许多分子间和分子内的变化会改变标记物的荧光发射。因此,很早就把它作为均相分析技术可能的新的手段。偏振,淬灭,时间关联,荧光寿命改变以及荧光共振能量转移( FRET)已经被广泛应用在对分子间作用的研究中 1-5 。然而,在这些应用中,一些技术条件严重受限,包括低的调整幅度,来自于分析环境组分的的信号干扰,迅变的荧光背景,以及在分析环境中由蛋白、分子以及聚合物导致的光的散射。在这些技术中, FRET是项令人很感兴趣的技术。 Foster假定,能量传输速率是依赖于激发态供体与附近的受体分子间的距离 6 。对于已知的供受体对,距离 R 0 (传输效率为50%的距离)在1-7nm的宽度。利用这些特性,可以将FRET作为一个光学标尺,来衡量生物大分子间的关系,这一点已经通过Stryer等人的先驱性工作 14 以及随后开展起来的研究证实了它的可行性 8-10 。对于研究溶液中分子间距离和相互......阅读全文

荧光抗体技术检测基本原理

荧光抗体技术检测基本原理 某些荧光物质在一定条件下.羊源性成分核酸检测PCR-荧光探针试剂盒既能与抗原或抗体结合。又不影响抗原与抗体的特异性结合。用荧光抗原或荧光抗体对待检标本染色后,在荧光显微镜下观察,可看到发出荧光的抗原抗体复合物。作为蛋白质标记用的荧光物质需具备如下条件:①有与蛋白质分子形成稳

间接荧光抗体技术的原理和目的

中文名称间接荧光抗体技术英文名称indirect fluorescence antibody technique定  义一种免疫标记技术。即应用荧光标记的二抗,通过与第一抗体结合而检测未知抗原。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)

X荧光光谱仪技术原理

X荧光光谱仪(XRF)由激发源(X射线管)和探测系统构成。X射线管产生入射X射线(一次X射线),激发被测样品。受激发的样品中的每一种元素会放射出二次X射线,并且不同的元素所放射出的二次X射线具有特定的能量特性或波长特性。探测系统测量这些放射出来的二次X射线的能量及数量。然后,仪器软件将探测系统所收集

紫外分析仪荧光技术原理、用途

   紫外分析仪分为很多系列,有三用紫外分析仪、暗箱式紫外分析仪、可照相紫外分析仪等系列,不同的紫外分析仪有不同的用途。紫外分析仪采用不同波长引进电泳分析、检测,PCR产物检测,DNA指纹图谱分析,纸层分析或薄层分析等。图片仅介绍了三用紫外分析仪的外形。  紫外分析仪是荧光技术的应用,那么荧光技术是

实时荧光定量-PCR技术原理与应用

聚合酶链式反应 ( PCR) 可对特定核苷酸片断进行指数级的扩增 。在扩增反应结束之后,我们可以通过凝胶电泳的方法对扩增产物进行定性的分析,也可以通过 放射性核素掺入标记后的光密度扫描来进行定量的分析 。无论定性还是定量分析,分析的都是 PCR 终产物。但是在许多情况下,我们所感兴趣的是未经 PCR

荧光硫测定仪的技术原理

  荧光硫测定仪采用“紫外荧光法”测定原理。当样品被引入高温裂解炉后,经氧化裂解,其中的硫定量地转化为二氧化硫,反应气经干燥脱水后进入荧光室。在荧光室中,部分二氧化硫受紫外光照后转化为激发态的二氧化硫(SO2*),当SO2*跃迁到基态时发射出光子,光电子信号由光电倍增管接收放大。再经放大器放大,计算

荧光抗体技术检测基本原理

荧光抗体技术检测基本原理 某些荧光物质在一定条件下.羊源性成分核酸检测PCR-荧光探针试剂盒既能与抗原或抗体结合。又不影响抗原与抗体的特异性结合。用荧光抗原或荧光抗体对待检标本染色后,在荧光显微镜下观察,可看到发出荧光的抗原抗体复合物。作为蛋白质标记用的荧光物质需具备如下条件:①有与蛋白质分子形成稳

实时荧光定量-PCR技术原理与应用

聚合酶链式反应 ( PCR) 可对特定核苷酸片断进行指数级的扩增 。在扩增反应结束之后,我们可以通过凝胶电泳的方法对扩增产物进行定性的分析,也可以通过 放射性核素掺入标记后的光密度扫描来进行定量的分析 。无论定性还是定量分析,分析的都是 PCR 终产物。但是在许多情况下,我们所感兴趣的是未经

X射线荧光光谱技术的原理

  所有XRF仪器都拥有两个主要成分,一个是X射线源,一般采用X射线管,另一个则是探头。X射线源会发出初级X射线到样品表面,有时会通过滤光器对X射线束进行调整。在光束击打样品原子时,会产生次级X射线,这些次级X射线会被探头收集并处理。  比较稳定的原子是由原子核及绕核旋转的电子构成,电子按照能量层级

荧光抗体技术的原理和作用机制

免疫荧光技术(Immunofluorescence technique )又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。

荧光抗体技术的原理和使方法

荧光抗体技术,用荧光物标记抗体来检测细胞或组织中相应抗原或抗体的技术。荧光物种类一般有异硫氰酸荧光素、罗丹明荧光素、二氯三嗪基氨基荧光素等。一般是将待测标本固定于玻片表面,滴加已知荧光抗体后再以缓冲液冲洗,干燥后于荧光显微镜下观察阳性是可见带荧光的抗原抗体复合物; 阴性无荧光(因为带荧光的抗体不能与

实时荧光定量PCR仪的技术原理

  所谓real-time Q-PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基因,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。在 real-time 技术的发展过程中,两个重要的发现起着关键的作用:(1)在90年代早期,TaqDNA多聚酶的5′核酸外切酶活性的

Qubit3.0荧光定量仪技术原理

Qubit 3.0荧光定量仪技术原理技术原理:Qubit 3.0荧光定量仪结合Qubit定量试剂盒,采用专门研制的荧光染料,对生物分子进行精确定量,包括DNA,RNA,和ProteinQubit 3.0荧光定量仪特定荧光染料选择性地特异性靶 分子结合,发射荧光信号1、荧光染料不会接结合杂质,如游离核

免疫荧光技术的起源和原理

免疫荧光(immunofluorescence technic)Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantibodytechnique)。用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已知的荧

简述荧光原位杂交的技术原理

  荧光原位杂交技术技术原理是将荧光素直接或间接标记的核酸探针[或生物素、地高辛、dinit rophenyl(I)NP)、aminoacetylAAFfluorine(AAF)等标记的核酸探针与待测样本中的核酸序列按照碱基互补配对的原则进行杂交,经洗涤后直接在荧光显微镜下观察。 [2]  荧光原位

高分辨飞行时间气质联用仪概述

  具备台式正交加速飞行时间质谱仪,为GC/MS提供高灵敏度、高分辨率、质量精确的测量。  MS检测器串联高分辨率的毛细管GC使用,具有快速数据采集、全自动工作流程等特点。配置不同的GC进样口、离子源或软件选项,可适应不同领域的分析要求。包括从食物中污染物的定性分析、环境样品分析到代谢物组学研究等。

飞行时间高分辨液质联用仪

  飞行时间高分辨液质联用仪是一种用于化学领域的分析仪器,于2016年1月8日启用。  技术指标  ★非轴线型的气体辅助喷雾,可承受流速高达1ml/min和从100%水平到100%有机相,便于分析方法优化 ★可与各种HPLC包括超高效快速液相色谱UHPLC、液相色谱HPLC、毛细管液相、纳升液相等联

叶绿素荧光测量的最好时间

在测量叶绿素荧光参数时,要选择晴朗的晚上测量,温度变化较低,湿度变化较低,植物健康,并使用高精度的仪器,以减少测量误差,从而更准确地测量叶绿素的含量。

时间分辨荧光免疫TrFIA分析(以血清中T3和T4检测为例)

时间分辨荧光免疫分析(time resolved luoro-immunoassay,TrFIA)技术出现于20世纪80年代初期,是在免疫荧光分析的基础上发展的一种新型超微量物质免疫分析方法。 TrFIA采用镧系稀土元素标记抗体,利用荧光发射体的荧光寿命差别将波长相同的荧光分开,排除样品中的非特异荧

时间分辨荧光免疫分析在乙肝病毒血清学标志物检测应用

乙肝病毒 (Hepatits B veius HBV) 感染是我国最常见的感染性疾病之一,而应用免疫技术测定 HBV 特异性抗原抗体是 HBV 感染诊断的主要手段。由于免疫学技术的不断发展,抗原抗体检测灵敏度明显提高,使低水平 HBV 感染得以检出,对临床诊断及流行病学有重要意义 [1] 。另外

解读2014Nobel化学奖:超分辨率荧光显微技术

【摘要】2014年诺贝尔化学奖授予Eric Betzig,Stefan W. Hell和William E. Moerner3位科学家,以表彰他们在超分辨率荧光显微成像技术方面的重大贡献。本文从显微镜分辨率的起因入手,对超分辨荧光显微技术进行了深入阐述。此外,对光学显微技术的发展前景进行展望。201

超分辨率显微镜发展历程和技术原理

超分辨率显微镜发展历程 毫无疑问,自16世纪以来,光学显微镜已经历漫长的旅程。首次被知晓的复合显微镜是由Zacharias和Hans Janssen构造的。尽管这些显微镜没有保存下来,但人们确信这些显微镜已能够将放大倍率从3倍提高到9倍。17世纪末期,Leeuwenhoek首次将放大倍率和分辨率提高

实时荧光定量PCR仪简介及技术原理

实时荧光定量PCR仪适用于临床及科研以聚合酶链式反应为特征的、以实时荧光定量检测分析DNA/RNA为目的的病原体检测及基因分析。临床疾病诊断:各型肝炎、艾滋病、禽流感、结核、性病等传染病诊断和疗效评价;地中海贫血、血友病、性别发育异常、智力低下综合症、胎儿畸形等优生优育检测;肿瘤标志物及瘤基因检测实

荧光显微镜技术原理和方法

)训练目的    学习荧光显微镜的使用;了解荧光显微镜技术原理和方法。2)实验材料    生物素标记的一dUTP(Biotin-dUTP)或地高辛标记的duUTP(Digoxingening—11一dullP)1 nmol/μL,TdT酶(25 U/μL),反应缓冲液,洗涤缓冲液,异硫氰酸荧光素(F

X荧光光谱仪重要技术原理

X荧光光谱仪技术原理:  X荧光光谱仪(XRF)由激发源(X射线管)和探测系统构成。X射线管产生入射X射线(一次X射线),激发被测样品。受激发的样品中的每一种元素会放射出二次X射线,并且不同的元素所放射出的二次X射线具有特定的能量特性或波长特性。探测系统测量这些放射出来的二次X射线的能量及数量。然后

实时荧光定量PCR仪简介及技术原理

  实时荧光定量PCR仪适用于临床及科研以聚合酶链式反应为特征的、以实时荧光定量检测分析DNA/RNA为目的的病原体检测及基因分析。临床疾病诊断:各型肝炎、艾滋病、禽流感、结核、性病等传染病诊断和疗效评价;地中海贫血、血友病、性别发育异常、智力低下综合症、胎儿畸形等优生优育检测;肿瘤标志物及瘤基因检

荧光原位杂交技术原理和应用特点

荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是在20世纪80年代末在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术,以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法,探针首先与某种介导分子(reporter molecule)结

实时荧光定量-PCR技术原理与应用(二)

SYBR Green I 在核酸的实时检测方面有很多优点,由于它与所有的双链 DNA 相结合,不必因为模板不同而特别定制,因此设计的程序通用性好,且价格相对较低。利用荧光染料可以指示双链 DNA 熔点的性质,通过熔点曲线分析可以识别扩增产物和引物二聚体,因而可以、区分非特异扩增,进一步地还可

X荧光光谱仪的技术原理

X荧光光谱仪(XRF)由激发源(X射线管)和探测系统构成。X射线管产生入射X射线(一次X射线),激发被测样品。受激发的样品中的每一种元素会放射出二次X射线,并且不同的元素所放射出的二次X射线具有特定的能量特性或波长特性。探测系统测量这些放射出来的二次X射线的能量及数量。然后,仪器软件将探测系统所收集

荧光定量PCR技术的基本原理

PCR反应过程产生 DNA拷贝数,随反应循环数增加,以呈指数方式增加逐渐转入平台期。在传统PCR中,用终点法对PCR产物定量有不足之处;而RQ––PCR对整个PCR反应扩增过程进行实时检测,并连续分析与扩增相关荧光信号,随反应进行检测到荧光信号变化可绘成一条曲线。因此可在PCR反应处于指数期某一点检