就这样做轻松搞定实时PCR探针设计
除了为克隆基因、预测编码蛋白而需要研究基因的构成外,当前在基因组学上的努力也包括对基因组构成的研究,以分析具有结构和调控因子插入的基因。近源物种分析成为比较基因组学的主要内容,被认为是研究进化、基因功能和人类疾病的重要方法。 利用该方法分析微生物,特别是细菌的基因组,早在 1996 年就已开始识别出细菌中的保守基因和与亚种相关的毒性基因(Fredricks and Reiman 1996)。这方面的进展促生了新的、大规模的检测和识别致病菌的方法。近源种 PCR 可以用来研究进化上相关的种,它们在基因组上有一 些共同的特点,这些保守的区域可被用于在基因组水平识别新种。还可以用该技术在尚未测序的物种的基因组中扩增同源基因。 设计策略 根据多元序列比较和引物设计的一般规律来设计近源种 PCR 引物。通过比较少数几个大的相近序列识别出保守区域,这些区域即是近源种引物的可能结合位点。近源种的比较需要对少数大的相近序列......阅读全文
Troubleshooting-for-PCR-and-multiplex-PCR
Troubleshooting discussion is based on the PCR protocol as described in the table below. All reactions are run for 30 cycles.COMPONENTVOLUMEFINALCONCE
PCR简介/PCR仪
PCR的要素基本的PCR须具备PCR仪图册1.要被复制的DNA模板 Template2.界定复制范围两端的引物Primers.3.DNA聚合酶Taq. Polymearse4.合成的原料(四种脱氧核苷酸)及水。 PCR仪工作原理利用升温使DNA变性,在聚合酶的作用下使单链复制成双链,进而达到基因复制
多重PCR(Multiplex-PCR)
一般PCR仅应用一对引物,通过PCR扩增产生一个核酸片段,主要用于单一致病因子等的鉴定.多重PCR(multiplex PCR),又称多重引物PCR或复合PCR,它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物,同时扩增出多个核酸片段的PCR反应,其反应原理,反应试剂和操作过程与一般PCR相同. 多
多重PCR(Multiplex-PCR)
一般PCR仅应用一对引物,通过PCR扩增产生一个核酸片段,主要用于单一致病因子等的鉴定.多重PCR(multiplex PCR),又称多重引物PCR或复合PCR,它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物,同时扩增出多个核酸片段的PCR反应,其反应原理,反应试剂和操作过程与一般PCR相同. 多
重叠PCR—overlap-PCR
1、简介 重叠PCR也是基本的PCR原理:变性-退火-延伸。不同的是在重叠PCR过程是两个或者几个片段重叠延伸之后,再进行指数扩增的PCR过程。 2、基本原理*步:PCR产生两个或者几个片段,这几个片段之间必须有重叠区。 第二步:以两个片段为例,见上图,*步产生的两个片段,A D链之间有互补,B
四探针-四探针测试仪-薄膜电阻测定仪
1.SZT-2A 主机采用的先进电路设计,所测数值更精、更快、更准(一代为传统式电路,缺点:体积大,速度慢,元器件繁多导致影响机器寿命)。2.屏幕采用液晶显示(一代为只有数码管显示)。3.匹配电脑接口及软件,让操作简便明了化(可直接连接电脑,电脑进行自动运算根据输入指定厚度,自动比照并修正系数,使被
荧光原位杂交探针和荧光探针有什么区别
荧光原位杂交探针和荧光探针有什么区别 荧光原位杂交技术问世于70年代后期,其曾多用于染色体异常的研究,近年来随着FISH所应用的探针钟类的不断增多,特别是全Cosmid探针及染色体原位抑制杂交技术的出现,使FISH技术不仅在细胞遗传学方面,而且还广泛应用于肿瘤学研究,如基因诊断基因定位等 。原
普通PCR梯度PCR-原位PCR-荧光定量PCR仪的区别
普通PCR仪: 一般把一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,称之为普通PCR仪,也就是传统的PCR仪。如果要用它做不同的退火温度则需要多次运行。如;(ABI 2720) 梯度PCR仪: 一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(通常12种温度梯度)的称
同比增长600%-达安基因公布2020年Q1财报
生殖健康与优生优育系列*人类免疫缺陷病毒1型 (HIV-1) 核酸测定试剂盒 (PCR-荧光探针法) 48反应/盒*人乳头瘤病毒 (6,11型) 核酸检测试剂盒 (PCR-荧光法) 20人份/盒*单纯疱疹病毒II型核酸定量检测试剂盒 (PCR-荧光探针法) 20人份/盒单纯疱疹病毒
反转录PCR(RTPCR,-Reversed-Transcript-PCR)
1 原理 RT—PCR是一种将cDNA合成与PCR技术结合分析基因表达的快速灵敏的方法,主要用于对表达信息进行检测或定量分析,还可以用来检测基因表达差异而不必构建cDNA文库克隆cDNA。RT-PCR的模板可以为总RNA或poly(A)+选择性RNA。逆转录反应可以使用逆转录酶,以随机引物、ol
副溶血性弧菌核酸检测试剂盒(一管式PCR荧光探针法)..
说明致病菌检测系列可针对食品、饲料等样品中的致病微生物的特异核酸片段进行扩增,仪器实时监测扩增过程中的荧光信号变化,自动判读结果。本产品用于副溶血性弧菌的检测。检出限为103 CFU/ml。◆ 产品组成(96测试) 011032LⅡ
鸭源性核酸PCR荧光探针试剂盒未使用完的96孔板作何处理
鸭源性核酸PCR-荧光探针试剂盒包装规格的大小取决于试剂盒里面酶标板的规格大小,常见的有96T(12孔乘以8条)跟48T(12孔乘以4条)两种。所以当您在选择ELISA试剂盒的时候zui好考虑自己样本的收集量再做选择,以免造成浪费。也许您会想剩余没用完的板可以再保存等下次实验重新使用。我司技术却不赞
鸭源性核酸PCR荧光探针试剂盒未使用完的96孔板作何处理
鸭源性核酸PCR-荧光探针试剂盒包装规格的大小取决于试剂盒里面酶标板的规格大小,常见的有96T(12孔乘以8条)跟48T(12孔乘以4条)两种。所以当您在选择ELISA试剂盒的时候zui好考虑自己样本的收集量再做选择,以免造成浪费。也许您会想剩余没用完的板可以再保存等下次实验重新使用。我司技术却不赞
实时荧光定量PCR的分类和原理
根据所使用的技术不同,实时荧光定量PCR可以分为:荧光探针和荧光染料两种方法。现将其原理简述如下: 1. TaqMan荧光探针 TaqMan探针法是高度特异的定量PCR技术,其核心是利用Taq酶的3'→5'外切核酸酶活性,切断探针,产生荧光信号。PCR扩增时在加入一对引物
北京离子探针中心离子探针质谱仪器研发进入攻坚阶段
2010年1月16-17日,由北京离子探针中心主办的“2009北京SHRIMP成果报告会”在京隆重举行。中国科学院多位院士、政府相关部门负责人以及来自全国各地的地学界同仁等约100人出席了开幕式。自2002年起,一年一度的“北京SHRIMP成果交流会”已经成为中国地学界同仁们进行学术交
开尔文探针力显微镜的开尔文探针力显微镜
原子力显微镜(atomic force microscope,简称AFM),也称扫描力显微镜(scanning force microscope,SFM)是一种纳米级高分辨的扫描探针显微镜,优于光学衍射极限1000倍。原子力显微镜的前身是扫描隧道显微镜,是由IBM苏黎士研究实验室的海因里希·罗雷
反向PCR(inverse-PCR)简介
反向PCR是一种多聚合酶链式反应(PCR)应用的方法,可使已知序列的核心区边侧的未知DNA成几何级数扩增。用适当的限制性内切裂解含核心区的DNA,以产生适合于PCR扩增大小的片段,然后片段的末端再连接形成环状分子。PCR的引物同源于环上核心区的末端序列,但其方向可使链的延长经过环上的未知区而不是分开
直接原位PCR(In-situ-PCR)
原位PCR是原位杂交细胞定位和PCR的高灵敏度相结合的技术,使得靶基因检测有了极大的改进。此技术是在细胞(爬片、甩片或涂片)或组织(石蜡、冰冻切片)上直接对靶基因片段进行扩增,通过掺入标记基团直接显色或结合原位杂交进行检测的方法。一、组织切片和细胞样品的制备试剂与配置10%福尔马林;二甲苯;PBS操
直接原位PCR(In-situ-PCR)
原位PCR是原位杂交细胞定位和PCR的高灵敏度相结合的技术,使得靶基因检测有了极大的改进。此技术是在细胞(爬片、甩片或涂片)或组织(石蜡、冰冻切片)上直接对靶基因片段进行扩增,通过掺入标记基团直接显色或结合原位杂交进行检测的方法。一、组织切片和细胞样品的制备试剂与配置10%福尔马林;二甲苯;PBS操
反向PCR-(inversePCR)
利用反向PCR可对未知序列扩增后进行分析,探索邻接已知DNA片段的序列,并可将仅知部分序列的全长cDNA进行分子克隆,建立全长的DNA探针。可用于:(1)基因游走研究;(2)转位因子研究;(3)已知序列DNA旁侧病毒整合位点分析等研究。实验方法原理反向PCR可用于研究与已知DNA区段相连接的未知染色
菌落PCR(Colony-PCR)方法
菌落PCR(Colony PCR)可不必提取基因组DNA,不必酶切鉴定,而是直接以菌体热解后暴露的DNA为模板进行PCR扩增,省时少力。建议使用载体上的通用引物。通常利用此方法进行重组体的筛选或者DNA测序分析。最后的PCR产物大小是载体通用引物之间的插入片断大小。具体方法:1、PCR混合物的制备T
反向PCR-(inversePCR)
实验方法原理 反向PCR可用于研究与已知DNA区段相连接的未知染色体序列,因此又可称为染色体缓移或染色体步移。这时选择的引物虽然与核心DNA区两末端序列互补,但两引物3’端是相互反向的。扩增前先用限制性内切酶酶切样品DNA,然后用DNA连接
反向PCR-(inversePCR)
实验方法原理 反向PCR是克隆T-DNA插入位点侧翼DNA序列非常有效的方法。 1. 选择合适的限制性内切酶位点。并在T-DNA的边界(左边界、右边界均可)和酶切位点附近设计引物P1、P2;2. 回收DNA,T4连接酶连接,使酶切后的DNA片段环化;3. 回收连接后的DNA,用引物P1、P2做
PCR技术(十四):反向PCR
描述一种大聚合酶链反应(PCR)应用的方法,使在已知序列的核心区边侧的未知 DNA成几何级数扩增。用适当的限制性内切裂解含核心区的DNA,以产生适合于PCR扩 增大小的片段,然后片段的末端再连接形成环状分子。PCR的引物同源于环上核心区 的末端序列,但其方向性,使链的延长经过环上的未知区而不是分开引
实时荧光PCR检测技术
实时荧光PCR检测技术众所周知,PCR(聚合酶链反应)技术自从1985年问世以来,经过十几年的发展,已成为实验室的常规技术。它是现代分子生物学研究中不可缺少的手段,是一种极为敏感的放大系统。相比于传统的临床诊断方法,核酸诊断是分子水平上的诊断技术,可以弥补传统临床诊断方法的某些缺陷,比如,核酸诊断能
实时荧光PCR检测技术及其优势
众所周知,PCR(聚合酶链反应)技术自从1985年问世以来,经过十几年的发展,已成为实验室的常规技术。它是现代分子生物学研究中不可缺少的手段,是一种极为敏感的放大系统。相比于传统的临床诊断方法,核酸诊断是分子水平上的诊断技术,可以弥补传统临床诊断方法的某些缺陷,比如,核酸诊断能直接揭示病原体的存在,
定量PCR技术基本原理和方法以及PCR产物的检测与定量3
1) 特异性捕获检测法(非探针杂交捕获)本法是非特异性检测PCR产物的一种方法,用生物素标记引物和地高辛标记duTP或用生物素和地高辛分别标记其引物。经PCR扩增后,PCR产物中同时掺入了生物素和地高辛。用生物素包被孔捕获PCR产物,用酶(AKP)标抗地高辛和产物反应,加底物显色进行定量,此法是非序
FQPCR技术简述
FQ-PCR技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的,与变通PCR相比,FQ-PCR具有许多优点。其特点、原理和方法以及应用简述如下。1 原理和方法FQ-PCR的工作原理是利用Taq酶的5’→3’外切酶活性,在PCR反应系统中加入一个荧光标记探针。该探针可与引物包含序列内的DNA模
实时荧光PCR技术大简析
实时荧光PCR(real-time PCR)因其全封闭扩增,简单快速,重复性好,无扩增后处理以及易于自动化等优点,广受大家欢迎。在分子诊断领域中,实时荧光PCR方法涉及的领域包括感染性疾病、肿瘤、遗传病等多方面。那么实时荧光PCR技术是如诞生的呢?下面,由小编带领大家一起了解大牛们是如何经过
荧光定量PCR技术及其应用(一)
荧光定量PCR(也称TaqMan PCR,以下简称FQ-PCR)是美国PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术,该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的,与变通PCR相比,FQ-PCR具有许多优点。本文拟就该技术的特点、原理和方法以及应用作一简