细胞培养室建立的细节问题
前段时间,经历了几个月的时间,为实验室建了一个细胞培养间.目前这个细胞培养间运转良好,培养的神经元长了10来天,长势不错,已经可以认为细胞培养室建立成功.在建立细胞培养间的过程中,碰到了许多问题,逐一解决后,觉得大家如果要建立细胞培养间,肯定也会碰到许多相同的问题,所以将我碰到的问题整理出来.首先向大家推荐一本书,个人认为是比较经典的——《动物细胞培养-基本技术指南》科学出版社,英,R.I.弗雷谢尼.内容不多,但以下的资料大部分是书上找不到的.1.甲醛薰蒸:40％甲醛溶液(药用规格、福建三明化工总厂出品),用量30 ml／m3,室内温度21～24℃,相对湿度75％～85％,加热薰蒸使蒸汽弥漫全室,关闭门窗1 h. 甲醛水溶液为无色,具有强烈刺激性气味的液体,可杀灭多数微生物,价廉,熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等.市售的甲醛水溶液中一般含37－40%的甲醛.其主要用法为:①熏蒸消毒:对室内消毒其用量为20－25......阅读全文
体外抗药肿瘤细胞模型的建立实验_细胞培养技术
实验方法原理体外抗药肿瘤细胞模型的建立实验采取长时间药物处理、诱导抗性，最终筛选出具有一定抗性的细胞克隆。实验材料小鼠试剂、试剂盒小牛血清DMEMDOX仪器、耗材CO2培养箱无菌钢圈实验步骤一、培养条件用含10%小牛血清的DMEM培养液，5%CO2，37℃培养。二、实验步骤1. 将CHO细胞培养在
13家药商被处罚－84个细节问题暴露
11月7日，国家食药监局在官网“飞行检查”一栏里，挂出了两条“湖南省药监局流通飞检和处理情况”的公告。如下图： CFDA发布飞检通告 食药监总局的飞检通告，总是发布最新的讯息，以其权威性对行业有着重要的影响。每次公布的案例，既能给药企一定的警示，也是指引各地药监部门工作的风向标。 这两个通
制备“微生物”检测培养基细节问题
一、称取 用精确度1/100的电子天平称取培养基所需药品。先根据配方计算出配制一定量培养基所需各种成分药品的量，然后用天平准确称取。称量时用称量纸折叠成簸箕状盛放药品。称量纸折叠方法如图所示。 二、溶化 培养基放入烧杯或搪瓷缸中，慢慢加入少量所需水，边加入边用玻棒搅拌。如果培养基中不含有琼
制备“微生物”检测培养基细节问题
一、称取 用精确度1/100的电子天平称取培养基所需药品。先根据配方计算出配制一定量培养基所需各种成分药品的量，然后用天平准确称取。称量时用称量纸折叠成簸箕状盛放药品。称量纸折叠方法如图所示。 二、溶化 培养基放入烧杯或搪瓷缸中，慢慢加入少量所需水，边加入边用玻棒搅拌。如果
制备微生物检测培养基细节问题
一、称取 用度1/100的电子天平称取培养基所需药品。先根据配方计算出配制一定量培养基所需各种成分药品的量，然后用天平称取。称量时用称量纸折叠成簸箕状盛放药品。称量纸折叠方法如图所示。 二、溶化 培养基放入烧杯或搪瓷缸中，慢慢加入少量所需水，边加入边用玻棒搅拌。如果培养基中不含有琼脂，培养基
实验室设计不能忽视的细节，有哪些
不管从哪个角度来看，实验室设计的好坏于实验的结果以及工作人员的安全都是有着相关的影响的，不同的方案，对于操作来说，是不同的，下面一起来看看实验室设计不能忽视的细节有哪些 1.门的大小要尽可能大：实验室和普通办公室是不一样的，经常会有大型的仪器需要进进出出，所以实验室设计的时候就要确保这些设备和样
细胞培养相关问题及解答(一)
小牛血清和胎牛血清有何区别？应用注意事项？ 来源不同：胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清，新生牛（小牛）血清（Calf serum, CS）采自出生10至14 天的小牛。 组份与比例不同：两者所含的促细
注意！使用血细胞分析仪时的细节问题
血液分析仪是目前临床血液一般检查最常用的检测仪器，以往使用手工操作显微镜计数方法，由于操作过程的随机误差，实验器材的系统错误和检测方法的固有误差，使显微镜法细胞计数的实验结果准确性受到很大影响。20世纪40年代期，美国人库尔特先生发明并申请了粒子计数技术的设计ZL；50世纪初期，电子血细胞计数仪
温度传感器不应忽视的两个细节问题
温度传感器元件的正常工作是要满足其工作条件的，其中之一就是它的工作电流，由于温度传感器具有电阻值，当电流流过温度传感器元件时，会有功率损耗，就会发热，所以为了减小传感器本身的发热引起测温误差，所以要在满足传感器正常工作的条件下，尽量减少其本身的发热。这就是为什么温度传感器要在恒定小电流条件下使用的
细胞培养板的选择和常见问题
细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底（U型和V型）；培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384、1536 孔等；根据材质的不同有Terasaki板和普通细胞培养板。具体选择时根据培养细胞的类型、所需培养体积及不同的实验目的而定。 （1）平底和圆底（U型和V型）培养板的区别和选择：
细胞培养中的各种问题解答
在培养细胞的过程中，或许你会有一系列的问题想要问。今天为大家整理了一些关于细胞的常见问题解答。一、细胞成长曲线测守时为什么要做重复孔？答：测定细胞成长曲线细胞计数时挑选 3 个复孔，每孔分别计三次，取其平均值，目的是减小操作差错。二、为什么制作的细胞成长曲线没有到达平台期？答：可能有以下原因：一是细
细胞培养过程中常见的问题说明
通过多次与客户的了解和反馈，赛百慷的售后服务人员发现，客户在收到经过专业包装的细胞后，由于没有经过系统专业的检查和处理，就直接进行实验，以致于后期容易产生了一系列问题。鉴于客户对这一方面的知识有所欠缺薄弱，赛百慷的技术人员经过总结，对于在收到细胞怎样专业处理做了以下说明：一、问：细胞收到之后怎么处理
细胞培养常遇到的问题都在这了
养细胞是一件戳心戳肺的事。你要像照顾小孩一样仔细对待，爱护她，呵护她。上篇提到细胞培养的注意事项，反响热烈，这次就来讲讲细胞培养常见问题的原因及对策。1. 培养液 pH 值变化太快原因：CO2 张力不对培养瓶盖拧得太紧NaHCO3 缓冲系统缓冲力不足培养液中盐浓度不正确细菌、酵母或真菌污染对策：
水质量检测需要注意一些细节问题
水是人类赖以生存的资源，饮用水的质量当然就很重要。但随着社会的不断进步水污染却愈发的严重，这么一来水质量检测成为了我们必须要做的工作。本章水质在线监测仪厂家来和大家一起了解水质量检测需要注意的一些细节。具体情况如下：一、监测点的选择：选择在上有河道中取一水点，进行水质情况的采样工作，对于地下水监测需
化学实验室设计不能忽视的细节有哪些
不管从哪个角度来看，实验室设计的好坏于实验的结果以及工作人员的安全都是有着相关的影响的，不同的方案，对于操作来说，是不同的，下面一起来看看实验室设计不能忽视的细节有哪些 1.门的大小要尽可能大：实验室和普通办公室是不一样的，经常会有大型的仪器需要进进出出，所以实验室设计的时候就要确保这些设备和样
选择实验室通风橱需要考虑的几个细节
实验室通风橱是密闭罩的一种特殊形式，产生有害物的操作进程完全在罩内进行。通风柜一般设有可开闭的操作孔和观察孔，通过对通风柜进行抽风，使柜内形成负压，以防止通风柜内机械设备的扰动、化学反应或热源的热压，以及室内横向气流的干扰等原因引起有害物的逸出。 采用独特的侧配重结构和可拆卸的活动顶板和侧板，便于
细胞培养常见问题解答
1.如何选用特殊细胞系培养基？ 培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养是一个好的开始。 2.何时须更换培养基？ 视细胞生长密度而定， 或遵照细胞株基本数据上之更换时间，按时更
细胞培养常见问题与解答2
8.培养基中丙酮酸钠的作用是什么？丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源。尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源，但是，如果没有葡萄糖的话，细胞也可以代谢丙酮酸钠。9.为什么储存在冰箱中的胎牛血清会出现沉淀？GIBICO的胎牛血清 没有预老化，储存在2－8℃时，血清中的各种蛋白和脂蛋白（如冷凝集素、纤维蛋白
细胞培养常见问题与解答4
22.在High Five无血清培养基中去污剂的浓度是多少？ High Five无血清培养基中去污剂的浓度：0.025 g/L Tween-80，1.0 g/L Pluronic Poly-all。 23.High Five细胞用多大的密度冻存？ 3.0x10E6 ce
细胞培养常见问题与解答1
1.为什么要热灭活血清？加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。在进行免疫学研究、培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时，推荐使用热灭活血清。2.如何用台盼兰计数活细胞？用无血清培养基把细胞悬液稀释到200－2000个/毫升，在0
几个问题帮你了解细胞培养FAQ
1.细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除DMSO？ 除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外，绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞），在解冻之后，应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中，待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可，如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。 2.可否使用与
细胞培养常见问题与解答3
15.如何检测内毒素(热源)水平？ LAL（Limulus Amebocyte Lysate）试验是可用的最敏感和特异的检测细菌内毒素的方法。Levin和Bang 发现细菌可引起鲎（Limulus polyphemus）血管内的凝集作用。内毒素启动一个细胞内酶原系统（丝氨酸蛋白酶级
介绍下使用血细胞分析仪时的细节问题
血液分析仪是目前临床血液一般检查常用的检测仪器，以往使用手工操作显微镜计数方法，由于操作过程的随机误差，实验器材的系统错误和检测方法的固有误差，使显微镜法细胞计数的实验结果准确性受到很大影响。 现在的血细胞分析仪一般能为临床疾病诊断、鉴别诊断、治疗和疗效观察提供十几项至几十项检
细胞培养室的操作环境很重要
细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响，要求工作环境清洁，空气清新，干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧，常规操作和封闭培养于一室，而洗刷消毒在另一室。一、常用设施及设备 1.超净工作台：也称净化工作台，分为侧流式，直流式和外流式三大类
血细胞参考测量实验室的建立
血细胞分析是一种通过一些仪器的检测对红细胞、白细胞等项目进行分析的技术，血细胞分析仪是医院临床检验应用非常广泛的仪器之一，通过血细胞计数分析可以了解患者血液的基本信息。根据国际血液学标准化委员会(International Council for Standardization in Heama
血栓病实验室的建立与仪器
近年来，随着生物化学、免疫学及分子生物学研究的不断深入，推动着血栓与止血实验检测技术的迅速发展，出现了许多新的实验检测方法及检测仪器。 血栓与止血实验检测项目极多，最主要的是血液的检测，因此做为最初的也是最重要的手段之一的采血不容忽视。 血栓与止血的实验检测项目对血液标本要求
细胞培养板的选择和使用问题集锦1
细胞培养板作为培养细胞的一种常用和重要的工具，形状、规格、用途多样，你是否也为如何选择适合的培养板而迷茫？你是否正为如何方便、正确的使用培养板而苦恼？你对如何处理培养板是否也有困惑？对不同的培养板各有什么妙用你又有何体会？细胞培养板的选择：细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底（U型和V型）；培
NK细胞培养存在的问题与解决方法
自然杀伤细胞(natural killer cell，NK)是机体重要的免疫细胞，不仅与抗肿瘤、 抗病毒感染和免疫调节有关，而且在某些情况下参与超敏反应和自身免疫性疾病的发生。目前，NK细胞培养存在两种培养方式：1、滋养层细胞（人肿瘤细胞，即人白血病K562细胞）培养方式。首先获得具有不分裂不增殖但
细胞培养板的选择和使用问题集锦2
【操作步骤】1．加样品：将标本稀释液100ul（或2滴）加到包被板内（预留阴阳性及空白对照2－5孔），将待检血清用PBS或生理盐水按1：20稀释后取 10ul加入反应孔内。2．加对照：加入阴性对照1－3孔，阳性对照1孔，各100ul对照血清。空白对照1孔空置。3．温育：将反应板震荡使样品混匀后，置3
实验室“军事化”管理，细节不可少
实验室所谓的实验室规范化管理涉及到的方方面面的内容太多，执行起来还是有一定难度，或者说，几年如一日的执行有难度。细节不可少，也不可忽视，到底模范实验室应该做到哪几点？今天就为大家进行总结 。实验室规范化管理基本要求⑴ 建立严格的实验室管理制度，明确责任和要求，防止操作人员违规操作；⑵ 保持实验室环境