核提取物的制备实验
实验方法原理 通过向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后,可以降低蛋白质的溶解度,使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种作用叫作盐析,是物理变化,可复原。对于特定的蛋白质,影响蛋白质盐析的主要因素:无机盐的种类、浓度、温度和PH值。 实验材料 哺乳动物 试剂、试剂盒 PBS 低渗缓冲液 低盐缓冲液 透析缓冲液 仪器、耗材 转子 离心机 电导计 ......阅读全文
核提取物的制备实验
实验材料 哺乳动物试剂、试剂盒 PBS低渗缓冲液低盐缓冲液透析缓冲液仪器、耗材 转子离心机电导计透析膜匀浆机离心管实验步骤 1a. 收集转瓶培养的细胞:将浓度为5~10×108细胞/l 的培养液用1 L 的塑料瓶1 850 g 离心20 min,将细胞收入50 ml 锥形离心管中(每管收2~3 L
核提取物的制备实验
实验方法原理 通过向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后,可以降低蛋白质的溶解度,使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种作用叫作盐析,是物理变化,可复原。对于特定的蛋白质,影响蛋白质盐析的主要因素:无机盐的种类、浓度、温度和PH值。
核提取物的制备实验(二)
从培养细胞中分离的细胞核制备成的提取物在体外转录和mRNA加工中具有精确的功能,(1)纯化蛋白质(2)核提取物。实验材料细胞核试剂、试剂盒KCl高盐缓冲液仪器、耗材透析膜离心机实验步骤1. 按基本方案中歩骤1~7操作。 2. 将细胞核悬液分成5等份。在冷室内不断搅拌,按如下方法在每份悬液中加入1
核提取物的制备实验(一)
从培养细胞中分离的细胞核制备成的提取物在体外转录和mRNA加工中具有精确的功能,(1)纯化蛋白质(2)核提取物。实验方法原理通过向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后,可以降低蛋白质的溶解度,使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种作用叫作盐析,是物理变化,可复原。对于特定的蛋白质,影响蛋白质盐析的主要因素
哺乳动物细胞制备核和细胞质提取物—核提取物制备优化
实验材料转瓶或单层培养的哺乳动物细胞(如HeLa细胞)试剂、试剂盒高盐缓冲液分别含 0.8、1.0、1.2、1.4 及 1.6 mol L KCl仪器、耗材贝克曼 JS4. 2 转子或相当的转子50 mL 圆锥形刻度聚丙烯离心管(对较小体积的提取物也可用 15 mL 的离心管)Dounce 氏玻璃匀
从哺乳动物细胞中制备核和细胞质提取物—核提取物制备
实验材料转瓶或单层培养的哺乳动物细胞(如HeLa细胞)试剂、试剂盒PBS低渗缓冲液高盐缓冲液含1. 2 mol L KCl透析缓冲液液氮仪器、耗材贝克曼 JS4. 2 转子或相当的转子50 mL 圆锥形刻度聚丙烯离心管(对较小体积的提取物也可用 15 mL 的离心管)Dounce 氏玻璃匀浆器(B
HeLa-细胞核提取物的制备实验
在本实验中,基本上是按Dignam等(1983)所述的方法从HeLa细胞制备核提取物的。这一基本方法大概是制备体外转录和DNA结合实验用因子的最常用的方法。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒甘油液氮MgCl2•6 H2O硫酸铵HeLa 细胞磷酸缓冲盐溶液(PBS)缓冲液
抗核提取物抗体测定是什么
抗核提取物抗体测定指自身免疫性疾病筛选试验。抗核抗体(antinuclear antibody,ANA),又称抗核酸抗原抗体,是一组对细胞核内的DNA、RNA、蛋白或这些物质的分子复合物产生的自身抗体。按其核内各个分子的性能不同可将各ANA区分开来,如:抗DNA抗体;抗组蛋白抗体;抗非组蛋白抗体;抗
抗核提取物抗体测定是什么
抗核提取物抗体测定指自身免疫性疾病筛选试验。抗核抗体(antinuclear antibody,ANA),又称抗核酸抗原抗体,是一组对细胞核内的DNA、RNA、蛋白或这些物质的分子复合物产生的自身抗体。按其核内各个分子的性能不同可将各ANA区分开来,如:抗DNA抗体;抗组蛋白抗体;抗非组蛋白抗体;抗
HeLa-细胞核提取物的制备实验
试剂、试剂盒 甘油液氮MgCl2•6 H2O硫酸铵HeLa 细胞磷酸缓冲盐溶液(PBS) 缓冲液 G缓冲液 H 缓冲液 DTM 缓冲液+0.1 ml L KCl实验步骤 材料HeLa 细胞(培养和保存条件见下文。我们也成功地使用过 CellexBiosciences 公司制备并冷冻的 HeLa 细胞
抗核提取物(ENA)抗体检测的介绍
核抗原有三个部分组成:组蛋白,DNA,可溶性核抗原。后者是一组可溶于磷酸缓冲液中的多肽抗原,故名可提取的核抗原。随着分子水平识别ENA多肽抗体研究的重大进展,现已发现有临床诊断价值的这类抗体有10余种,抗ENA为其总称。主要包括Sm、BNP、SSA、SSB、Jo-1、Scl-70抗原,不同的自身
抗核提取物(ENA)抗体检测的临床意义
BNP阳性:混合结缔组织病、SLE、硬皮病。 Sm阳性:Sm抗体为SLE的特异性抗体,其他疾病极少出现假阳性,但在SLE中阳性率不高。
HeLa-细胞核提取物的-Sephacryl-S300-HR-柱
HeLa 细胞核提取物的 Sephacryl S-300 HR 柱层析实验 试剂、试剂盒 HeLa 细胞核提取物
从哺乳动物细胞中制备核和细胞质提取物
实验方法原理 实验材料 转瓶或单层培养的哺乳动物细胞(如HeLa细胞)试剂、试剂盒 PBS低渗缓冲液高盐缓冲液含1. 2 mol L KCl透析缓冲液液氮仪器、耗材 贝克曼 JS4. 2 转子或相当的转子50 mL 圆锥形刻度聚丙烯离心管(对较小体积的提取物也可用 15 mL 的离心管)Doun
通过高等真核生物无细胞提取物分析mRNA的降解实验
细胞的环境、复制周期的状态和分化状态的改变会引起一些 mRNA 半衰期的改变。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方法原理细胞的环境、复制周期的状态和分化状态的改变会引起一些 mRNA 半衰期的改变。实验材料DEPC细胞多聚核糖体RNA底物试剂、试剂盒乙酸钾乙酸镁DTTTris-乙酸
从哺乳动物细胞中制备核和细胞质提取物
核提取物的制备核提取物制备优化细胞质(S-100)组分的制备实验方法原理实验材料转瓶或单层培养的哺乳动物细胞(如HeLa细胞) 试剂、试剂盒PBS
通过高等真核生物无细胞提取物分析mRNA的降解实验
实验方法原理 细胞的环境、复制周期的状态和分化状态的改变会引起一些 mRNA 半衰期的改变。 实验材料 DEPC 细胞
HeLa-细胞核提取物的-Sephacryl-S300-HR-柱层析实验
试剂、试剂盒 HeLa 细胞核提取物Sephacryl S-300 HR液氮TM 缓冲液+0.1mol LKCl仪器、耗材 XK26 40 柱实验步骤 材料与设备HeLa 细胞核提取物(从 12L 细胞培养物制得,见 pp.9l~93)(5-ml 样品)XK26/40 柱(PharmaciaBiot
HeLa-细胞核提取物的-Sephacryl-S300-HR-柱层析实验
HeLa 细胞核提取物Sephacryl S-300 HR液氮TM 缓冲液+0.1mol LKCl仪器、耗材XK26 40 柱实验步骤材料与设备HeLa 细胞核提取物(从 12L 细胞培养物制得,见 pp.9l~93)(5-ml 样品)XK26/40 柱(PharmaciaBiotech,Inc.)
从哺乳动物细胞中制备核和细胞质提取物
核提取物的制备 核提取物制备优化 细胞质(S-100)组分的制备 实验方法原理 实验材料
通过高等真核生物无细胞提取物分析mRNA的降解实验
实验方法原理 细胞的环境、复制周期的状态和分化状态的改变会引起一些 mRNA 半衰期的改变。实验材料 DEPC细胞多聚核糖体RNA底物试剂、试剂盒 乙酸钾乙酸镁DTTTris-乙酸组织培养液无菌去离子水磷酸肌酸ATPGTP乙酸钾精胺RNase 抑制剂仪器、耗材 高温烤箱匀浆器研杵低速离心机超速离心机
抗核提取物(ENA)抗体检测的参考值及临床意义
参考值 对流电泳法 抗Sm(-) 抗RNP(-) 临床意义 BNP阳性:混合结缔组织病、SLE、硬皮病。 Sm阳性:Sm抗体为SLE的特异性抗体,其他疾病极少出现假阳性,但在SLE中阳性率不高。
制备体外剪接反应用HeLa细胞核和胞质S100提取物实验
胞核提取物可以用于前体 mRNA 的剪接,S100 提取物中虽然包括许多剪接因子,但它不具有剪接活性,因为它只含有剪接所必需的部分 SR 蛋白,不过该提取物中补充一种或多种 SR 蛋白后就可以进行有效的剪接。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方法原理胞核提取物可以用于前体 mRNA
制备体外剪接反应用HeLa细胞核和胞质S100提取物实验
实验方法原理 胞核提取物可以用于前体 mRNA 的剪接,S100 提取物中虽然包括许多剪接因子,但它不具有剪接活性,因为它只含有剪接所必需的部分 SR 蛋白,不过该提取物中补充一种或多种 SR 蛋白后就可以进行有效的剪接。
制备体外剪接反应用HeLa细胞核和胞质S100提取物实验
实验方法原理 胞核提取物可以用于前体 mRNA 的剪接,S100 提取物中虽然包括许多剪接因子,但它不具有剪接活性,因为它只含有剪接所必需的部分 SR 蛋白,不过该提取物中补充一种或多种 SR 蛋白后就可以进行有效的剪接。实验材料 HeLa 细胞试剂、试剂盒 DTT苯甲基磺酰氟PBS缓冲液仪器、耗材
哺乳动物细胞中制备核和细胞质提取物—细胞质组分制备
实验材料细胞质提取物试剂、试剂盒10× 细胞质提取缓冲液仪器、耗材Beckman 50型固定角转子或相当的转子实验步骤1) 仔细测量细胞质提取物的体积(见基本方案步骤 7 中的上清)。加入 0.11 倍体积的10×细胞质提取缓冲液,充分混合。2)100 000 g 离心 1 h。3)将上清(± 10
罂粟果提取物
性状本品为浅棕色粉末,臭特殊。鉴别(1)取本品约0.1g,加5%醋酸溶液5m,振摇2分钟,用氨水调pH值约为9,用三氯甲烷-乙醇(9:1)10ml提取1次,分取有机层,置蒸发皿中,水浴蒸干,残留物加稀铁氰化钾试液,即显蓝绿色(2)取本品约0.1g,加水2ml与氨试液数滴,用三氯甲烷l0ml,振摇10
罂粟果提取物
性状本品为浅棕色粉末,臭特殊。鉴别(1)取本品约0.1g,加5%醋酸溶液5m,振摇2分钟,用氨水调pH值约为9,用三氯甲烷-乙醇(9:1)10ml提取1次,分取有机层,置蒸发皿中,水浴蒸干,残留物加稀铁氰化钾试液,即显蓝绿色(2)取本品约0.1g,加水2ml与氨试液数滴,用三氯甲烷l0ml,振摇10
皂树皮提取物
(一)背景资料。皂树皮提取物是从皂树的树皮、树干或枝条中提取。国际食品法典委员会、欧盟委员会、美国食品药品管理局、澳大利亚和新西兰食品标准局、加拿大卫生部等批准其作为乳化剂用于食品,根据联合国粮农组织/世界卫生组织食品添加剂联合专家委员会评估结果,该物质的每日允许摄入量不超过1 mg/kg bw(以
核工展上聚焦“核”热点“核雾染”可信吗?
“核雾染”的说法是否可信?在内陆建核电厂会不会影响环境与公众健康?福岛核事故对核电发展有什么启示……正在此间举行的第十三届中国国际核工业展览会上,与“核”有关的热点话题引起了人们的关注。 “核雾染”可信吗? 近期,有文章称华北雾霾与内蒙古伴有铀类放射性元素的煤炭利用有关,认为雾霾是因