常规聚丙烯酰胺凝胶电泳实验
制胶 样品的准备 电泳 检测 照相、凝胶干燥 定量测定 试剂、试剂盒 丙烯酰胺单体贮液 Tris-甘氨酸缓冲液贮液 电极缓冲液 样品缓冲液 过硫醆铵 浓缩胶缓冲液贮液 分离胶缓冲液贮液 实验步骤 一、垂直平板电泳的制胶用于垂直平板电泳的凝胶通常被灌注在两侧有隔片的两块玻璃板之间。模具垂直放置,周围用硅油(或其他密封物质)密封,或用夹子夹紧,以......阅读全文
常规聚丙烯酰胺凝胶电泳实验
制胶 样品的准备 电泳 检测 照相、凝胶干燥 定量测定 试剂、试剂盒
常规聚丙烯酰胺凝胶电泳实验
试剂、试剂盒 丙烯酰胺单体贮液Tris-甘氨酸缓冲液贮液电极缓冲液样品缓冲液过硫醆铵浓缩胶缓冲液贮液分离胶缓冲液贮液实验步骤 一、垂直平板电泳的制胶用于垂直平板电泳的凝胶通常被灌注在两侧有隔片的两块玻璃板之间。模具垂直放置,周围用硅油(或其他密封物质)密封,或用夹子夹紧,以免胶液泄漏。溶液从顶部灌注
常规聚丙烯酰胺凝胶电泳实验——电泳
试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液Tris-甘氨酸缓冲液贮液电极缓冲液样品缓冲液过硫醆铵浓缩胶缓冲液贮液分离胶缓冲液贮液实验步骤一、垂直电泳如果进行垂直电泳,按说明书先在电泳槽的下槽中装入电极缓冲液。将聚合后的凝胶连同玻璃板一起放入电泳槽中,在上槽中注入电极缓冲液,打开冷却循环系统,连接电源。一般起始电压
常规聚丙烯酰胺凝胶电泳实验——检测
实验方法原理常规聚丙烯酰胺凝胶电泳后的检测,对于不同的目的,应采用不同的检测方法。由于这种电泳方法不破坏蛋白质的生物活性,所以可选用的检测方法很多。试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液Tris-甘氨酸缓冲液贮液电极缓冲液样品缓冲液过硫醆铵浓缩胶缓冲液贮液分离胶缓冲液贮液实验步骤一、早期染色方法用染料和生物大
常规聚丙烯酰胺凝胶电泳实验——定量测定
试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液Tris-甘氨酸缓冲液贮液电极缓冲液样品缓冲液过硫醆铵浓缩胶缓冲液贮液分离胶缓冲液贮液实验步骤不管是使用凝胶扫描,还是摄录系统,凝胶电泳后通常要进行染色,才能进行定量测定。没有染色的凝胶只能用带有紫外光源的凝胶扫描仪才能定量。 如果电泳后要对样品组分进行定量测定,必须注意
常规聚丙烯酰胺凝胶电泳实验——样品的准备
试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液Tris-甘氨酸缓冲液贮液电极缓冲液样品缓冲液过硫醆铵浓缩胶缓冲液贮液分离胶缓冲液贮液实验步骤一、选择合适的样品缓冲液常规聚丙烯酰胺凝胶电泳的样品不需作特殊处理。最重要的是选择合适的 pH 和离子强度的缓冲液作为样品缓冲液,以保证样品的溶解性、稳定性和生物活性,通常使用与
常规聚丙烯酰胺凝胶电泳实验——照相、凝胶干燥
试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液Tris-甘氨酸缓冲液贮液电极缓冲液样品缓冲液过硫醆铵浓缩胶缓冲液贮液分离胶缓冲液贮液实验步骤为了发表文章和分析结果的保存,应将有价值的结果在干燥以前先进行照相,以免在干燥时降低分辨率,甚至失去弱带。凝胶可直接放在带有乳白色屏幕的发光板上,使用细颗粒的全色胶卷和一个中红滤
常规实验仪器有哪些?
常规实验仪器1、干燥箱2、电炉3、低温冰箱/保存箱4、摇床(振荡器)5、灭菌器6、恒温水浴/油浴7、超净工作台8、培养箱
常规实验仪器有哪些?
常规实验仪器1、干燥箱2、电炉3、低温冰箱/保存箱4、摇床(振荡器)5、灭菌器6、恒温水浴/油浴7、超净工作台8、培养箱
实验动物编号的常规方法
常用的标记法有染色、耳缘剪孔、烙印、号牌等方法。(一)颜料涂染这种标记方法在实验室最常使用,也很方便。经常应用的涂染化学药品有:①、涂染红色:0.5%中性红或品红溶液。 ②、涂染黄色:3~5%苦味酸溶液。 ③、黑色:煤焦油的酒精溶液。 ④、涂染咖啡色:2%硝酸银溶液。标记时用毛笔或棉签蘸取上述
亲和层析实验:常规方法
实验步骤一、亲和介质的选择亲和纯化的成功取决于是否选择了合适的固相载体和配基。理想的亲和介质 (如吸附配基的固相载体)应该具备孔隙大、理化性质高度稳定的特征。亲和介质可以选择性的捕获相应耙标,既保证较弱的非特异性吸附,又可以在整个过程中维持良好的流动特征。优选介质应具备便宜、易获取和使用简便的特点。
常规实验仪器有哪些?
常规实验仪器1、干燥箱2、电炉3、低温冰箱/保存箱4、摇床(振荡器)5、灭菌器6、恒温水浴/油浴7、超净工作台8、培养箱
实验动物编号的常规方法
常用的标记法有染色、耳缘剪孔、烙印、号牌等方法。(一)颜料涂染这种标记方法在实验室最常使用,也很方便。经常应用的涂染化学药品有:①、涂染红色:0.5%中性红或品红溶液。 ②、涂染黄色:3~5%苦味酸溶液。 ③、黑色:煤焦油的酒精溶液。 ④、涂染咖啡色:2%硝酸银溶液。标记时用毛笔或棉签蘸取上述
亲和层析实验:常规方法
实验步骤 一、亲和介质的选择 亲和纯化的成功取决于是否选择了合适的固相载体和配基。理想的亲和介质 (如吸附配基的固相载体)应该具备孔隙大、理化性质高度稳定的特征。亲和介质可以选择性的捕获相应耙标,既保证较弱的非特异性吸附,又可以在整个过
DNA片段的回收实验——常规方法
实验材料NA片段试剂、试剂盒纯化试剂盒异丙醇仪器、耗材离心机电泳仪电泳槽取液器微量真空装置抽滤装置实验步骤1. PAGE电泳,如EB染色的则在紫外灯下切下目的片断,如龈染或其他非放染色的则在关下切下目的片断。2. 用少量脱缓冲液I将目的片断胶条洗至一Eppendorf管中,用玻棒将凝胶捣碎,用1
实验室常规检验用水规范
常规检验用水规范1.规范性引用文件:GBT 6682-2008 分析实验室用水规格和试验方法 2.常规检验用水应符合GBT 6682-2008中三级水标准PH范围(25℃):5.0~7.5 电导率(25℃)(mS/m):≤0.50 可氧化物质含量(以O计)/(mg/L):≤0.4
实验室常规检验用水规范
1.规范性引用文件:GBT 6682-2008 分析实验室用水规格和试验方法 2.常规检验用水应符合GBT 6682-2008中三级水标准PH范围(25℃):5.0~7.5 电导率(25℃)(mS/m):≤0.50 可氧化物质含量(以O计)/(mg/L):≤0.4 蒸发残渣(105
亲和层析实验:常规方法(三)
6.仿生配基大部分的亲和层析配基是天然存在的,其优点在于具有高度选择性和强结合能力,但也存在某些缺点。这种配基稳定性低,需要进行纯化,使用过程中批间差异大,易被其他生物分子污染,对灭菌方法敏感,并且成本高。为了克服这些局限性,加速亲和层析在治疗性蛋白质纯化中的应用, 仿生型配基 (biomime
亲和层析实验:常规方法(二)
二、配基的选择选择合适的配基,需要对配基和靶分子之间的天然相互作用有一定的认知及理解。靶分子与配基的相互作用必须是特异性结合,并且在不同的结合和洗脱条件下均应该稳定。此外,制订亲和纯化的方案时,需着重考虑能否购买到商品化配基,还是需要从头研制配基和介质。后者的成功在很大程度上取决于对蛋白质结构和相互
亲和层析实验:常规方法(四)
2.配基吸附对于多肽、蛋白质或核酸,通常采用的共价吸附是, 通过胺反应将配基上的氨基吸附在树脂表面。溴化氰活化表面与伯胺发生反应形成亚胺碳酸盐是最常见的胺反应吸附。最典型的伯胺是赖氨酸侧链(Hermanson,1992;PorathetaU1%7)(详见第 28 章)。这种活化形式的优点在于可以使用
亲和层析实验:常规方法(一)
一、亲和介质的选择亲和纯化的成功取决于是否选择了合适的固相载体和配基。理想的亲和介质 (如吸附配基的固相载体)应该具备孔隙大、理化性质高度稳定的特征。亲和介质可以选择性的捕获相应耙标,既保证较弱的非特异性吸附,又可以在整个过程中维持良好的流动特征。优选介质应具备便宜、易获取和使用简便的特点。亲和介质
单向聚丙烯酰胺凝胶电泳实验
实验材料 蛋白质溶液团粒状细胞蛋白试剂、试剂盒 4X浓缩胶缓冲4X分离胶缓冲10X电泳缓冲液2XSDS-PAGE上样缓冲液正丁醇甲醇SDS储存液仪器、耗材 离心机电泳装置凝胶上样吸头玻璃板加热器实验步骤 一、灌制平板胶1.清洗玻璃板。a.将玻璃板放人 2%PCC-54 清洗液中浸泡 3?24 h。b
单向聚丙烯酰胺凝胶电泳实验
蛋白质的SDS-PAGE实验 传统的考马斯亮蓝染色实验 快速考马斯亮蓝染色实验 InstaStain Blue 凝胶纸染色实验 InstaStain Blue 凝胶纸染色实验 SYPRO Ruby 荧光染色实验 SYPR
PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)实验
【实验原理】聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacryamide gel electropHoresis, PAGE)是由丙烯酰胺单体和交联剂甲叉双丙烯酰胺在催化作用下形成的三维网状结构物质。在不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳中,凝胶的制作是分层进行的,因此凝胶不仅有分子筛效应,还具有浓缩效应。和琼脂糖凝胶相
正常细胞常规核型的标本制备实验
微量全血培养 人淋巴细胞染色体标本制备 肿瘤细胞的染色体标本制备 人体染色体常规核型的分析 实验方法原理 采用微量全血培养人体外
正常细胞常规核型的标本制备实验
微量全血培养人淋巴细胞染色体标本制备肿瘤细胞的染色体标本制备人体染色体常规核型的分析实验方法原理采用微量全血培养人体外周血中淋巴细胞,在淋巴母细胞分裂高峰时加入秋水仙素,破坏细胞纺锤体的形成,使细胞停止在分裂中期。然后收集细胞,低渗处理,使细胞胀大,染色体伸展。接着进行固定并除去中期分裂相中残存的蛋
正常细胞常规核型的标本制备实验
微量全血培养 人淋巴细胞染色体标本制备 肿瘤细胞的染色体标本制备 人体染色体常规核型的分析 实验方法原理 采用微量全血培养人体外
常规动物实验模型制作(复制)方法(三)
六、Alzhermer病的动物模型SD大鼠200-250克。用3%戊巴比妥钠(35-40mg/kg体重)腹腔麻醉动物后,固定在脑立体定位仪上(参照大鼠全脑立体定位图谱),以前囟为零点,选出进刀坐标:前后坐标(AP)1.8mm,中线旁开(L)坐标1.0mm,腹侧坐标(v)4. 0mm。首先用牙科钻在上
实验室设备常规仪器有哪些
实验室设备常规仪器有哪些(一) 温度控制系统: 1. 液氮罐:有些实验材料、某些器官组织、细胞株、菌株及纯化的样品等,要求速冻和长期保存在超低温环境下,就需要一个液氮罐(-196℃)具有经济、省力和较好地保持细胞生物学特性的优点。 2.低温冰箱: 根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要,必须具备
常规动物实验模型制作(复制)方法(二)
四、呼吸系统疾病动物模型复制1、慢性支气管肺炎模型 常选用大鼠、豚鼠或猴吸入刺激性气体(如二氧化硫、氯、氨水、烟雾等)复制人类慢性气管炎。现发现猪粘膜下腺体与人类相似,且经常发生气管炎及肺炎,故认为是复制人类慢性气管炎较合适的动物。用去甲肾上腺素可以引起与人类相似的气管腺体肥大。2、肺气肿模型