丹磺酰化法分析蛋白质N末端氨基酸实验
丹磺酰化法 实验方法原理 蛋白质的α-氨基与丹磺酰氯(DNS-Cl 是一种荧光物质) 反应, 生成DNS-蛋白质, 经水解可生成DNS-氨基酸。通过聚酰胺薄膜层析分析DNS-氨基酸, 可确定蛋白质的N-末端氨基酸。此法灵敏度高, 也可用于蛋白质的氨基酸组成的测定。聚酰胺对极性物质的吸附作用是: 它能和被吸附物质间形成氢键, 这种氢键的强弱决定了被分离物与聚酰胺薄膜之间吸附能力的大小。层析时展层剂与被分离物在聚酰胺膜表面竞争形成氢键。因此选择适当的展层剂使分离物在聚酰胺表面发生吸附、解吸附、再吸附和再解吸附的连续过程, 就能导致分离物达到分离的目的。 实验材料 ......阅读全文
丹磺酰化法分析蛋白质－N末端氨基酸实验
丹磺酰化法 实验方法原理 蛋白质的α-氨基与丹磺酰氯(DNS-Cl 是一种荧光物质) 反应, 生成DNS-蛋白质, 经水解可生成DNS-氨基酸。通过聚酰
丹磺酰化法分析蛋白质－N末端氨基酸实验
实验方法原理蛋白质的α-氨基与丹磺酰氯(DNS-Cl 是一种荧光物质) 反应, 生成DNS-蛋白质, 经水解可生成DNS-氨基酸。通过聚酰胺薄膜层析分析DNS-氨基酸, 可确定蛋白质的N-末端氨基酸。此法灵敏度高, 也可用于蛋白质的氨基酸组成的测定。聚酰胺对极性物质的吸附作用是: 它能和被吸附物质间
丹磺酰化法分析蛋白质－N末端氨基酸实验
实验方法原理 蛋白质的α-氨基与丹磺酰氯(DNS-Cl 是一种荧光物质) 反应, 生成DNS-蛋白质, 经水解可生成DNS-氨基酸。通过聚酰胺薄膜层析分析DNS-氨基酸, 可确定蛋白质的N-末端氨基酸。此法灵敏度高, 也可用于蛋白质的氨基酸组成的测定。聚酰胺对极性物质的吸附作用是: 它能和被
丹磺酰法的定义和作用
中文名称丹磺酰法英文名称dansyl method;DNS method定 义测定氨基酸的一种方法，主要用于蛋白质肽链N端氨基酸的测定。用1-二甲氨基-5萘磺酰氯与氨基酸的α氨基反应生成发荧光的丹磺酰氨基酸，可用电泳或层析法分离鉴定是何种氨基酸的衍生物。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方
酰化试剂（Bolton和Hunter试剂）法
1．原理 用酰化剂3--（4-羟苯基）丙酸—N琥珀酰胺酯（Bolton—Hunter试剂）做连接试剂，将125I标记在羟苯基的2，5位置上，再将琥珀酰胺酯水解，通过一个酰氨键将3--（4—羟基—5—125I—苯基）接在蛋白或多肽的末端氨基上。 2．方法 125I—Bolton—Hunter试剂可用
蛋白质乙酰化修饰的精细调控
近期，国际著名学术期刊《美国国家科学院院刊》在线发表了中国科学技术大学生命科学学院施蕴渝教授与姚雪彪教授研究组的合作成果，文章标题为EB1 acetylation by P300/CBP-associated factor (PCAF) ensures accurate kinetochore -m
蛋白质一级结构的测定方法（二）
2)末端分析 其方法较多，这里我们只介绍较常用的几种。 (1)N-末端测定 A.二硝基氟苯法(FDNB，DNFB)：1945年Sanger提出此方法，是他的重要贡献之一。 DNP-氨基酸用有机溶剂抽提后，通过层析位置可鉴定它是何种氨基酸。Sanger用此方法测定了胰岛素的N末端分别为甘
磺基水杨酸光度法
方法提要在pH8～11的氨性溶液中，铁(Ⅲ)与磺基水杨酸生成稳定的黄色配合物，在波长425nm处有最大吸收，颜色深度与含铁量呈正比，借以光度测定铁。方法适用于海洋沉积物、水系沉积物中三氧化二铁的测定。测定范围:w(Fe2O3)为0.5%～15%。仪器分光光度计。试剂盐酸。氢氧化铵。磺基水杨酸溶液(2
蛋白质印迹法的结果分析
可能出现的问题如下。1．背景过高①封闭不充分，应更换封闭液或延长封闭时间；②抗体浓度过高，应适当增加抗体稀释倍数；③洗膜不充分，应增加洗涤次数或洗涤时间；④膜质量较差，应选择高质量的NC膜，并且整个实验过程中保持膜的湿润。1．背景高可能原因验证或解决办法膜没有完全均匀湿透使用100%甲醇浸膜5~10
质谱检测法与蛋白质分析
在生命科学研究工作中有一个重要问题，就是发现、鉴定蛋白质并弄清楚它们的一级结构。知道了蛋白质的氨基酸序列信息，我们就可以通过遗传密码将其与编码序列对应起来，从原则上来说，也就将细胞的生理学与遗传学联系起来了。发现、鉴定出了一个蛋白质就好像给我们打开了一扇窗，透过这个窗口，我们就能够对复杂的细胞调控网
质谱检测法与蛋白质分析
质谱分析法是蛋白质研究领域和生物大分子研究领域中最重要的分析技术。由于我们对蛋白质鉴定、定量和分析的要求越来越高，希望检测技术的灵敏度也越来越高，同时能够对更为复杂的样品进行分析处理，因此推动了质谱检测技术的发展，出现了一大批新兴的质谱分析方法和仪器。 在生命科学研究工作中有一个重要问
lowry法测蛋白质含量误差分析
可能存在干扰物质，如还原物质、酚类、枸橼酸、硫酸铵等，详见药典四部0731蛋白质含量测定Lowry法中第二种方法，通过将蛋白质沉淀来去除干扰。
lowry法测蛋白质含量误差分析
可能存在干扰物质，如还原物质、酚类、枸橼酸、硫酸铵等，详见药典四部0731蛋白质含量测定Lowry法中第二种方法，通过将蛋白质沉淀来去除干扰。
lowry法测蛋白质含量误差分析
可能存在干扰物质，如还原物质、酚类、枸橼酸、硫酸铵等，详见药典四部0731蛋白质含量测定Lowry法中第二种方法，通过将蛋白质沉淀来去除干扰。
烟草所首次揭示植物蛋白质的巴豆酰化修饰
近日，中国农业科学院烟草研究所烟草病虫害防控科研团队在烟草蛋白质翻译后修饰研究方面取得新进展，发现烟草蛋白质巴豆酰化参与细胞碳代谢等多种生物学进程。 科研团队利用高质量的巴豆酰化修饰泛抗体，将烟草细胞内发生巴豆酰化的蛋白质组进行富集，通过液相二级质谱（LC-MS/MS）共鉴定到637个发生巴豆
生物素酰化探针的制备实验——切口平移法
在标准的切口平移实验体系中，生物素-11-dNTP取代了dNTP，DNA酶I 的浓度调整到可生成长100~500个核苷酸的范围，其他生物素酰化的核苷酸也可代替生生物素-11-dNTP。实验材料DNA试剂、试剂盒DNA聚合酶dNTP2-疏基乙醇生物素甘油NaClEDTASDS无水乙醇仪器、耗材注射器电
质谱检测法与蛋白质分析（一）
质谱分析法是蛋白质研究领域和生物大分子研究领域中最重要的分析技术。由于我们对蛋白质鉴定、定量和分析的要求越来越高，希望检测技术的灵敏度也越来越高，同时能够对更为复杂的样品进行分析处理，因此推动了质谱检测技术的发展，出现了一大批新兴的质谱分析方法和仪器。本文将对近几年质谱技术的发展以及质谱技术在蛋
质谱检测法与蛋白质分析（二）
传统的和最新的蛋白质组学研究策略虽然到目前为止，还没有一种蛋白质组学研究策略能够对某个蛋白质组进行常规的、完整的分析，但是现在的技术已经非常强大，我们相信，很快就能进行全蛋白质组学研究了。而且，对某个亚蛋白质组（比如某个细胞器或亚细胞结构的蛋白质组）进行研究早就已经不是什么难题了，这已经成为了一种常
质谱检测法与蛋白质分析（三）
Protein(s)：待测蛋白质样品;Enz. Digestion：酶解;Pep. Mixture：裂解产物混合物; MS Analysis：质谱检测分析;DB Search：数据库比对搜索;Identities：鉴定; Prot.DB ：蛋白质数据库;Proteom
质谱检测法与蛋白质分析（二）
离子回旋加速器与轨道离子阱质谱仪 随着功能强大的带有外部离子源的傅里叶变换-离子回旋加速器(FT-ICR)质谱仪的出现以及商业化，我们在质谱仪的分辨率与准确性方面取得了质的飞跃。有了这种新型的质谱仪，我们现在可以对ppm级乃至亚ppm级的样品进行分析了。该质谱仪的高分辨率特性不仅提高了数
质谱检测法与蛋白质分析（一）
质谱分析法是蛋白质研究领域和生物大分子研究领域中最重要的分析技术。由于我们对蛋白质鉴定、定量和分析的要求越来越高，希望检测技术的灵敏度也越来越高，同时能够对更为复杂的样品进行分析处理，因此推动了质谱检测技术的发展，出现了一大批新兴的质谱分析方法和仪器。本文将对近几年质谱技术的发展以及质谱技术在蛋白质
UV法蛋白质定量分析简述
这种方法是在280 nm波长，直接测试蛋白。选择 Warburg公式，光度计可以直接显示出样品的浓度，或者是选择相应的换算方法，将吸光值转换为样品浓度。 蛋白质测定过程非常简单，先测试空白液，然后直接测试蛋白质。由于缓冲液中存在一些杂质，一般要消除 320 nm的“背景”信息，设定此功能“开”
磺基水杨酸法尿蛋白定性
磺基水杨酸法：又称磺柳酸法。操作简便、反应灵敏、结果显示快，与清蛋白、球蛋白、糖蛋白和本周蛋白等均能发生反应；敏感度达0.05g/L，因而有一定的假阳性。被NCCLS作为干化学法检查尿蛋白的参考方法，并推荐为检查尿蛋白的确证试验。 根据反应的混浊程度，作出尿蛋白的定性或半定量判断： 阴性（－
组蛋白乙酰化定量分析
组蛋白乙酰化修饰是基因表观转录调控的重要机制.组蛋白翻译后修饰所引起的染色质结构重塑在真核生物基因表达调控中发挥着重要的作用.组蛋白乙酰化主要发生在H3、H4的N端比较保守的赖氨酸位置上，是由组蛋白乙酰转移酶和组蛋白去乙酰化酶协调进行。组蛋白乙酰化呈多样性，核小体上有多个位点可提供乙酰化位点，但特定
方案8－通过肽的半胱氨酰化捕获蛋白质
实验材料复杂蛋白混合物试剂、试剂盒生物素化试剂生物素化 胰酶消化缓冲变性缓冲液变性 还原缓冲液二硫苏糖醇（DTT)甲酸碘乙酰胺PBS胰酶仪器、耗材Centricon YM-3冷冻离心机免疫纯化的固定化抗生物素亲和柱Oasis HLB 抽提柱真空干燥器实验步骤一、变性、还原和缓冲液置换1.在真空干燥器
大活络丹的功能分析
方中以人参、白术、茯苓、甘草、当归、赤芍、熟地黄补气生血以培本，收扶正祛邪之效，为主药,辅以虎胫骨、何首乌、龟甲、骨碎补以补肝肾，强筋骨，利关节；麻黄、细辛、葛根、肉桂、草乌、附子既散在表之风邪，又逐在里之冷湿；威灵仙、羌活、防风、两头尖、白花蛇、乌梢蛇透骨搜风，通络止痛；乳香、没药、血竭、松脂
酰化的概念
如光化学烟雾形成过程中大气中的碳氢化合物经氧化、硝化化及酰化而生成过氧酰基硝酸酯，它们是大气氧化剂污染物。
什么是酰化？
酰化,又称酰基化,酰化作用。是指底物与酰化试剂在一定的条件下将酰基引入底物分子中的过程。酰化试剂的种类比较多,例如羧酸,羧酸酯,酸酐,酰氯等。根据酰化试剂酰化能力的大小选择不同的条件进行酰化反应。酰化之后的产物是酮（醛）、酰胺和酯等化合物,其机理包括双分子亲核取代反应和单分子亲核取代反应。常见的
蛋白质定量实验_考马斯亮蓝蛋白质浓度分析法
实验方法原理蛋白质分子中的芳香族氨基酸酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基，其化学结构中的共轭双键，具有吸收紫外光的特性，吸收高峰在280 nm处，蛋白质溶液的吸光度(A280)与蛋白质含量成正比关系，可作为样品中蛋白质定量测定。该方法简便、灵敏、快速，且样品用量少且可回收，低浓度的盐类也不干扰测定，但测定
生物素酰化探针的检测实验——化学发光法
实验材料DNA试剂、试剂盒生物素磷酸酶仪器、耗材紫外灯离心机实验步骤1. 用夹子固定已转印的尼龙膜的边角于一小片干的吸水纸上，样品面朝上，放进温箱内12~80℃放15~30 min 或温室晾干过夜。 2. 将带核酸的面朝上暴露于紫外灯下，用最适的时间交联。3. 用生物素探针与膜杂交，用适当强度