免疫表型的分析程序
细胞表面抗原检测的染色方案 细胞胞质内及细胞核内抗原检测的染色方案 实验材料 单克隆抗体 抗凝血 试剂、试剂盒 溶血素 PBS 实验步骤 1. 取 20 单克隆抗体与 100 ul 抗凝血,共同混合置室温 20 min。2. 加溶血素 1500 ul,置室温避光 15 min,2500 r/min 离心 5 min。3. 弃上清,加 1500 ul PBS......阅读全文
免疫学技术:免疫血清制备方法
免疫血清的制备是一项常用的免疫学实验技术。高效价、高特异性的免疫血清可作为免疫学诊断的试剂(如用于制备免疫标记抗体等),也可供特异性免疫治疗用。免疫血清的效价高低取决于实验动物的免疫反应性及抗原的免疫原性。如以免疫原性强的抗原刺激高应答性的机体,常可获得高效价的免疫血清。而使用免疫原性弱的抗原免疫时
T细胞免疫疗法能缓解自体免疫疾病
英国《自然·医学》杂志发表了一篇健康论文,展示了5名系统性红斑狼疮患者在CAR-T细胞疗法之后,无药缓解达17个月。 系统性红斑狼疮(SLE)是一种自体免疫风湿性疾病,全球人口发病率约0.1%,于年轻女性中高发。这一终身疾病是由自身抗体(攻击自身细胞的免疫防御分子)造成的,影响关节和皮肤,可能导
免疫学检验中的酶免疫技术
20世纪中期,以放射免疫技术为代表的标记免疫技术相继问世,它将某种可微量或超微量测定的物质(如放射性核素、荧光素、酶、化学发光剂等)标记于抗原(抗体)上制成标记物,加入到抗原抗体的反应体系中与相应的抗体(抗原)反应,以检测标记物的有无及含量间接反映被测物的存在与多少。这些将标记技术与抗原抗体反应
伴随免疫须与带虫免疫的区别
伴随免疫须与带虫免疫相区别:所谓"带虫免疫",是指人感染疟原虫后产生的免疫力,能抵抗同种疟原虫的再感染,而同时其血液内又有低水平的原虫血症,此免疫状态称带虫免疫。
固有免疫与适应性免疫的关系
相同点固有免疫和适应性免疫是相辅相成的、密不可分的。固有免疫往往是适应性免疫的先决条件,如树突状细胞和吞噬细胞吞噬病原生物实际上是一个加工和提呈抗原的过程,为适应性免疫应答的识别准备了条件。适应性免疫应答的效应分子可大大促进固有免疫应答,如抗体可促进吞噬细胞的吞噬能力,称为调理吞噬,或促进NK细胞的
酶免疫分析及酶联免疫吸附实验
这篇简短的通讯回顾了了EIA和ELISA的历史背景,这两种分析方法是由瑞典斯德哥尔摩大学的Perlmann, Engvall教授以及荷兰的Schuurs和vanWeemen教授独立而同时创造完成的。 当今,在全球医学实验室里广泛应用的全自动分析仪每日可以检测大量的病人标本,其中很多仪器都是运用酶标记
免疫纯化实验
实验方法原理 制备免疫亲和柱要求抗体首先共价结合到介质上。另一方法是将抗体结合到蛋白 A 或 G 小珠上,再用交联剂固相化。后一方法由于蛋白 A 或 G 结合在杭体的 Fe 区, 所以结合抗原的部位获得充分暴露,从易于接近。免疫亲和柱制备完成后,抗原溶液即可以上样,接着洗去污染物,然后洗脱抗
免疫电泳
实验概要蛋白质是一种两性电解质,它同时具有游离氨基和羧基。每种蛋白质都有自己的等电点。在等电点时,蛋白质所带的正负电荷相等。在pH值大于等电点的溶液中,羧基解离多,此时蛋白质带负电荷,带负电荷的蛋白质在电场中向正极移动;在pH值小于等电点的溶液中,氨基解离多,此时蛋白质带正电荷,在电场中向负极移动。
癌症免疫药
英国和美国研究人员一项最新研究显示,从乳腺肿瘤的基因和分子构成中能够找到有效线索来判断乳腺癌的疾病走势,包括未来复发的可能性和复发时间,研究人员在此基础上有望开发出更高效的工具来预测这类疾病的病程。 英国癌症研究会剑桥研究所与美国斯坦福大学学者领衔的团队对近2000名患乳腺癌女性的肿瘤基因变化
免疫PCR实验
实验方法原理 免疫PCR主要由两个部分组成,第一部分的免疫反应类似于普通的酶联免疫吸附试验(ELISA)的测定过程;第二部分即通常的PCR检测,抗原分子的量最终由PCR产物的多少来反映。第一步中,首先用待测抗原(如牛血清白蛋白(ESA))包被微滴板孔,再加入相应的特异抗体,于是抗体就与固相上的抗原结
免疫荧光
Immunofluorescence Technique (Spector Lab)protocol for immunofluorescence on cells Immunofluorescence Protocol (Walter Steffen)Methanol fixationForma
荧光免疫技术
荧光免疫技术是标记免疫技术中发展最早的一种。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantibod
荧光免疫分析
免疫分析是基于蛋白抗原和抗体之间、或者小分子半抗原与抗体之间的特异反应的分析方法,是生物分析化学的重要内容之一。其中,用荧光物质作为标记的免疫分析即为荧光免疫分析。作为荧光标记物,应具有高的荧光强度,其发射的荧光与背景荧光有明显区别;它与抗原或抗体的结合不破坏其免疫活性,标记过程要简单、快速;水溶性
免疫纯化实验
在蛋白质纯化方法中抗体亲和纯化是非常有效的方法之一。仅此一步常可获得 1000~10 000 倍的纯化。如果抗体与目的蛋白的结合的特异性得到证明,并且洗脱的目的蛋白没有受到不可逆的损伤,那么可以认为免疫纯化是极好的蛋白质纯化方法,特别是用在纯化过程的最后步骤。实验方法原理制备免疫亲和柱要求抗体首先共
免疫细胞简介
免疫细胞(immune cell)是白细胞的俗称,包括淋巴细胞和各种吞噬细胞等,也特指能识别抗原、产生特异性免疫应答的淋巴细胞等。淋巴细胞是免疫系统的基本成分,在体内分布很广泛,主要是T淋巴细胞、B淋巴细胞受抗原刺激而被活化(activation),分裂增殖、发生特异性免疫应答。除T淋巴细胞和B
免疫共沉淀
实验概要本实验以植物叶片为试材介绍了免疫共沉淀的基本方法。主要试剂50uM雌激素,液氮,提取缓冲液TBS(50mM Tris-Cl,0.15M NaCl,pH 7.4,1mM PMSF,5mM Benzamidine),glycine-HCl,TBS,洗脱缓冲液(TBS,0.5mg/mL 3
免疫金染色
中文名称免疫金染色英文名称immuno-gold staining定 义将用胶体金(直径大于20 nm)标记的间接抗体或A蛋白再与特异性抗体结合,在光镜下就可见红色的反应物出现,不需进行呈色反应的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
动物免疫实验
实验概要将某种蛋白注射新西兰大耳兔产生免疫反应,通过ELISA检测免疫产生的抗体。实验原理将抗原吸附在固相载体表面,加入抗血清,抗体和抗原在载体表面形成抗原-抗体复合物,洗去未结合抗体,然后加入辣根过氧化物酶标记的二抗(抗体的抗体),二抗与抗体结合,洗去未结合二抗,加底物显色剂显色,在一定波长下测定
免疫电泳
实验概要本实验介绍了免疫电泳(immunoelectrophoresis,IE)实验原理及操作流程。蛋白质是一种两性电解质,它同时具有游离氨基和羧基。每种蛋白质都有自己的等电点。在等电点时,蛋白质所带的正负电荷相等。在pH值大于等电点的溶液中,羧基解离多,此时蛋白质带负电荷,带负电荷的蛋白质在电场中
免疫纯化实验
实验方法原理 制备免疫亲和柱要求抗体首先共价结合到介质上。另一方法是将抗体结合到蛋白 A 或 G 小珠上,再用交联剂固相化。后一方法由于蛋白 A 或 G 结合在杭体的 Fe 区, 所以结合抗原的部位获得充分暴露,从易于接近。免疫亲和柱
免疫PCR技术
(一)材料与方法1. 生物素标记特异性抗体的制备 免疫球蛋白(如IgG、IgM)的Fc片段上有糖基存在,因而可用能与糖基结合的Biotin-hydrazide作生物素标记。(1) 将纯化的抗体(IgM或IgG, 0.1~1.0ml)在标记缓冲液(0.1Mol/L NaAc,pH值5.5, 0.1M
动物免疫实验
实验概要将某种蛋白注射新西兰大耳兔产生免疫反应,通过ELISA检测免疫产生的抗体。实验原理将抗原吸附在固相载体表面,加入抗血清,抗体和抗原在载体表面形成抗原-抗体复合物,洗去未结合抗体,然后加入辣根过氧化物酶标记的二抗(抗体的抗体),二抗与抗体结合,洗去未结合二抗,加底物显色剂显色,在一定波长下测定
免疫器官概述
免疫器官包括中枢免疫器官和外周免疫器官。在哺乳类动物,中枢免疫器官包括胸腺和骨髓;在禽类,中枢免疫器官包括胸腺和法氏囊。外周免疫器官有淋巴结、脾脏等。胸腺(Thymus)胸腺位于胸腔纵隔上部,胸骨后方。胸腺在胚胎期及出生后2 岁内生长很快,体积较大;2 岁后到青春期发育仍很快;但青春期后开始萎缩
免疫PCR技术
(一)材料与方法1. 生物素标记特异性抗体的制备免疫球蛋白(如IgG、IgM)的Fc片段上有糖基存在,因而可用能与糖基结合的Biotin-hydrazide作生物素标记。(1) 将纯化的抗体(IgM或IgG, 0.1~1.0ml)在标记缓冲液(0.1Mol/L NaAc,pH值5.5, 0.1Mol
免疫沉淀
免疫沉淀是利用特异性抗体识别并分离抗原的方法。材料:上样buffer的配方(用前现配):2ul 1.25M Tris-HCL , pH 6.835ul distilled water2.5ul 2-mercaptoethanol12.5ul 10%SD
免疫电泳
一、操作步骤1.取一块干净的玻璃板,用少量75%乙醇冲洗,晾干后置于水平台,将1%琼脂糖融化,56℃水浴中保温。2.将琼脂糖铺于玻璃板上,厚度约为1㎜。凝固后,打孔。3.在孔内加入抗原,其中一孔内加电泳指示剂。4.将凝胶板放在电泳槽中进行电泳,确定电泳时间。5.电泳后在凝胶板上沿电泳方向平行挖2㎜宽
核酸免疫实验
基 本 方 案 1 小 鼠 注 射 接 种DNA在免疫前应先阅读动物处理(附 录 2C) 和 接 种 的(附 录 2E) 指导说明。在正式实验之前需先进行肌肉和皮下注射练习; D N A 的精准注射对于免疫成功起关键作用。可以 用 India ink (或相同的染料)来定位注射的部位是否正确。材料2
自身免疫应答
免疫,是指机体免疫系统识别自身与异己物质,并通过免疫应答排除抗原性异物,以维持机体生理平衡的功能。但免疫系统对外来和自我的区分并不是绝对的,在某些情况下,可能会发生自身免疫(autoimmunity),即指机体免疫系统对自身免疫成分发生免疫应答的现象。机体免疫系统对自身抗原发生免疫应答而导致的疾病状
小鼠免疫程序
一、抗原的准备 1、收到抗原时,首先要了解抗原的种类、性质和浓度,以便采取不同的处理方法。 2、多肽抗原,一般分多肽―偶联KLH和多肽―偶联BSA(或GGG)或裸多肽三种。多肽―偶联KLH一般用于免疫,而多肽―偶联BSA或裸肽一般用于检测,在免疫时注意区分使用。 3、分装 (1)收到抗原后,应及时
免疫记忆概述
用同一抗原再次免疫时,可引起比初次更强的抗体产生,称之为再次免疫应答或免疫记忆,无论在体液免疫或细胞免疫均可发生免疫记忆现象。在体液免疫时,对TD抗原的再次应答可表现为抗体滴度明显上升,免疫球蛋白类别可由IgM转换为IgG,而且抗体亲和力增强。提示再次应答不仅发生抗体量的变化,而且也发生了质的