Cell新技术:快速、准确改造人体细胞和实验室小鼠基因
美国Cedars-Sinai医疗中心领导的一个研究小组设计了一种快速改造实验室小鼠基因的方法,并利用该方法生成了个性化的儿童神经胶质瘤(一种侵袭性儿童恶性脑癌)动物模型。相关研究发表在最近一期的《Cell》杂志上。DOI:https://doi.org/10.1016/j.cell.2019.08.013 新方法命名为MADR(mosaic analysis with dual recombinase-mediated cassette exchange)。该方法克服了当前技术中的几个缺点,使实验室在修改用于研究的小鼠时,尤其是那些涉及多种遗传变异驱动的癌症小鼠时,更容易获得精确、可靠的结果。该方法还可用于修饰人源的细胞,以便在培养皿中研究疾病。MADR,图片来源:参考资料[1] Cedars-Sinai理事会再生医学研究所生物医学科学助理教授Joshua Breunig博士说:“我们的方法是一个不断发展的平台。我们希望......阅读全文
转基因食物或危害小鼠健康
法国卡昂大学的一个研究小组近日宣布,他们发现被终身喂食一种普通转基因玉米的小鼠易患上肿瘤,并且肝脏和肾脏也受到严重损害。目前,法国政府已经启动了对转基因玉米安全性的调查。 虽然之前的安全实验已经证实在食用90天之后,这种转基因玉米对动物没有不良影响,《每日邮报》相关报道称,新的实验被认为是首次对
小鼠肝基因组DNA制备
原理DNA 以核蛋白形式存在于细胞核中,制备 DNA 的原则是既要将 DNA 与蛋白质、脂类和糖类等分离,又要保持 DNA 分子的完整。蛋白酶K 及链霉蛋白酶 E 的应用使这两个原则得到了保证。蛋白酶K 或链霉蛋白酶 E 均为广谱蛋白酶,其重要特性是能在 SDS 和 EDTA 存在下保持很高的活性。
基因变异小鼠引发“僵尸”ZL战
像一只不断向前踢的“僵尸”一样,围绕阿尔茨海默氏症研究的变异小鼠的法律战争又一次发生了,此次法律事件距离上一轮相关法律诉讼刚过去4年。在最新的案件中,美国坦帕市南佛罗里达大学(USF)起诉美国国立卫生研究院(NIH)授权销售该领域使用的一种特殊小鼠。首次审前听证会已定于3月21日在联邦法院开审。
人类语言基因让小鼠变“聪明”
美欧研究人员15日发表的一项新研究表明,如果给小鼠引入人类版本的语言基因Foxp2,那么小鼠的学习能力将得到提高。这一成果有助于研究人类语言的出现和进化。 Foxp2语言基因是十多年前在英国一个存在严重语言障碍的家族中首先发现的,缺乏这种基因的人普遍存在学习障碍和语言组织障碍。这种基因并非人类
小鼠βactin基因的克隆表达(4)
实验步骤:(1)诱导靶蛋白表达分别挑取对照菌和重组菌1~2个菌落,接入5ml含Amp(30μg/ml)的LB培养液,37℃振荡培养过夜。取5ml过夜培养物接入500ml含Amp(30μg/ml)的LB培养液,37℃振荡培养2h以上,至对数中期(A550=0.5~1.0)。向诱导管中加入IPTG使其浓
虾青素开启小鼠长寿基因
夏威夷大学John A. Burns医学院和Cardax公司最近联合公布了一项动物研究的结果,他们对一种抗衰老药物的有效性进行了评估。 由Cardax公司开发的虾青素化合物CDX-085能够显著增强FOXO3基因的表达,之前有研究表明该基因与长寿有关。“每个人体内都有FOXO3基因,可以帮助人
基因敲除小鼠的原理和方法
1.利用基因同源重组进行基因敲除。基因敲除是80年代后半期应用DNA同源重组原理发展起来的。80年代初,胚胎干细胞(ES细胞)分离和体外培养的顺利奠定了基因敲除的技术基础。1985年,首次证实的哺乳动物细胞中同源重组的存在奠定了基因敲除的理论基础。到1987年,Thompsson首次建立了完整的ES
小鼠βactin基因的克隆表达(1)
动物组织RNA的提取实验目的:掌握由动物组织中提取总RNA的方法实验原理:Trizol试剂是一个包含酚、异硫氰酸胍和SDS的单相酸性溶液,其在裂解细胞的同时抑制RNase的活性,随后加入氯仿,酚会大量的溶解在氯仿中。由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同,造成DNA分布在下层的氯仿酚溶液中,RNA
小鼠βactin基因的克隆表达(3)
(2)质粒的提取及酶切鉴定分析 质粒的提取按照质粒提取试剂盒的操作步骤进行,然后进行双酶切鉴定。 管号 ① ② 质粒DNA
细胞系(Cell-Line)或细胞株(cell-strain)的建立
一、概念1、细胞系(Cell Line):原代培养舞经首次传代成功即成细胞系,由原先存在于原代培养物中的细胞世系(Lineage of Cells)所组成。2、细胞株(Cell Strain):通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物称为细胞株。细胞株的特殊性质或标志
人体的细胞是什么物质?
细胞膜:细胞最外层的薄膜。主要由脂类、蛋白质和糖类三种物质组成。以脂类和蛋白质为主,糖类只占少量。 细胞质:1.基质 2.细胞器:核糖体、内质网、线粒体、高尔基复合体、溶酶体、中心体、细胞的股价结构 3.包涵体 细胞核:核膜、核仁、核基质(核液)、染色质和染色体。
人体细胞增殖与死亡
细胞增殖 细胞增殖是机体生长发育的基础,是通过细胞分裂的形式实现的。人类的细胞分裂主要包括有丝分裂和减数分裂。有丝分裂是人类体细胞的主要分裂方式,减数分裂是人类生殖细胞的分裂方式。[4] 细胞衰老与死亡 细胞衰老主要表现为对环境变化适应能力的降低和维持细胞内环境恒定能力的降低不仅形态学结构
人体内细胞知多少
研究人员发现,成年男性体内平均有大约36万亿个细胞,而成年女性体内平均有28万亿个细胞。出乎意料的是,人体内小细胞(如血细胞)的质量与大细胞(如肌肉细胞)的质量大致相同,这一发现令研究人员感到困惑。9月18日,相关成果发表于美国《国家科学院院刊》。 为计算人体细胞的数量,德国马克斯·普朗克数学
人体细胞周期详解
人体有46条染色体,具体分析如下,减数分裂前期Ⅰ持续时间长,结构变化复杂,通常又可分为细线期、偶线期、粗线期、双线期和终变期。细线期:第一次分裂开始时,染色体浓缩为细长的细线,但相互间往往难以区分,虽然染色体已在减数分裂前的间期时复制,每一染色体应该已有两个染色单体,但在细线期的染色体上还看不到双重
人体细胞的结构特点
人体细胞是人体结构和生理功能的基本单位,是生长、发育的基础。人体细胞形态多样,有球形、方形、柱状形等。其大小差异很大,大多数细胞直径仅有几个微米,有的可达到100微米以上。尽管细胞的形态、大小各异,但其结构基本相同。 人体细胞约有40万亿—60万亿个,细胞的平均直径在5—200微米之间。除成熟的红
小鼠肝细胞培养实验
细胞培养技术 实验方法原理 直接从生物体内获取组织细胞进行的首次培养称为原代细胞培养。原代培养是建立各种细胞系的第一步,是从事培养工作的人员应熟悉和掌握的最基
如何测小鼠白细胞总数
动物细胞培养的原理是细胞增殖,即有丝分裂.在有丝分裂过程中DNA含量变化(以2N为例):(1)间期DNA复制,数目加倍(2N→4N);(2)前期、中期和后期,DNA含量不变(4N);(3)末期细胞分裂,DNA平均分配给两个子细胞,数目还原(2N).本题考查动物细胞和有丝分裂过程中DNA含量变化规律,
小鼠破骨细胞分化方案
破骨细胞是高度分化的多核巨细胞,主要来源于单核/巨噬细胞造血干细胞系,是一种具有骨吸收功能,在骨代谢方面起着关键性作用的细胞,因而机体对于破骨细胞的调控非常严格,在破骨细胞分化成熟的过程中,RANK /RANKL/OPG系统起着分化调控枢纽的作用,是调节破骨细胞分化成熟的关键信号途径。核因子κB
小鼠肝细胞原代培养
实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料 小鼠试剂、试剂盒 DMEM无血清DMEM培养基胰酶PBS仪器、耗材 饭盒纱布剪子镊子烧杯平皿研磨玻片滤网离心管6孔培养板吸管移液管手套微量加样器实验
小鼠肝细胞培养实验
实验方法原理 直接从生物体内获取组织细胞进行的首次培养称为原代细胞培养。原代培养是建立各种细胞系的第一步,是从事培养工作的人员应熟悉和掌握的最基本的技术。根据培养方法不同分为组织块培养法和单层细胞培养法。
小鼠精原干细胞移植
实验概要小鼠精原干细胞移植主要试剂75%乙醇、台盼蓝、白消安、水合氯醛主要设备外科手术刀、外科手术剪、玻璃针(内径约40μm)、显微镊、实体解剖镜、相差显微镜、显微操作仪实验步骤(1)白消安处理受体鼠取6~8周龄的小鼠,按照40~60 mg/kg腹腔注射白消安,小鼠在注射白消安4~6周后,可以用来移
小鼠肝细胞培养实验
实验方法原理 通过光镜观察细胞形态、电镜观察超微结构及检测培养上清白蛋白水平证实培养细胞为肝细胞,持续培养结果显示原代培养第6~12 d 左右为肝细胞功能最佳观察和实验阶段。实验材料 小鼠试剂、试剂盒 DMEMDMEM胰酶PBS仪器、耗材 饭盒纱布小剪子小镊子大镊子大烧杯平皿研磨玻片滤网离心管6 孔
小鼠白细胞分化抗原
大多数白细胞分化抗原在生物进化过程中具有保守性,这是不同种的动物执行相同或相似生物学功能的需要。小鼠是免疫学常用的实验动物,而且对某些人白细胞分化抗原的结构和功能的了解首先是从小鼠或小鼠源性的细胞实验模型得知的,表1-3列举了部分与人CD抗原类同的小鼠造血细胞表面抗原,以供参考。表1-3 与人CD抗
小鼠腹腔巨噬细胞培养
实验方法原理 取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2 培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬百分率和吞噬指数。实验材料 小鼠试剂、试剂盒 1640 培养基小牛血清双抗台盼兰仪器、耗材 手术器械一次性注射器眼科镊眼科剪96 孔板CO2培养箱实验步骤 一
研究热点常用明星小鼠资料分享Fgf21基因敲除小鼠
赛业生物CRISPR-AI敲除小鼠精子库推出两年多来,已推动2000+个课题组加速研究进展,帮助300+家企业在药物研发上争分夺秒。我们统计分析了最畅销的十种CRISPR-AI敲除小鼠品系,或许这反映了目前的一些研究热点。这些品系涵盖了代谢疾病、神经科学、免疫和炎症、肿瘤、m6A甲基化修饰及相关
研究热点常用明星小鼠资料分享Fgf21基因敲除小鼠
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Cell:基因定位的重大影响
莱斯大学、加州大学和休斯顿大学的研究团队发现,两个关键基因的染色体定位,决定着枯草芽胞杆菌形成芽孢的时机。这项研究于七月九日发表在顶级期刊Cell杂志上。 枯草芽胞杆菌是一种单细胞微生物,它们一生唯一的目标就是繁殖。不过有时候,生存并不是一件容易的事。在食物匮乏的条件下,枯草芽胞杆菌面临着至关
Cell:基因表达分析的反思
在最新一期(10月26日)的《细胞》(Cell)杂志上,来自怀特黑德研究所的研究人员报告称在生成和注释来自全基因表达(global gene expression)分析的数据时所采用的一种常用假设可以造成当前广泛的生物学研究中关于基因活性与细胞行为的结论出现严重错误。 怀特黑德研究所成员Richa
Cell:“垃圾”基因也可致癌
在过去几年里,科学家们在长非编码RNA功能研究方面取得了显著进展,lncRNA作为多种生物学过程的重要调控因子,目前已经发现其在多种疾病过程如癌症的发展过程中具有重要作用。 近日,来自美国哈佛大学医学院的研究人员在著名国际学术期刊cell在线发表了他们的最新研究进展,他们发现lncRNA的一个
Cell子刊:基因测序揭示血癌致病基因
由圣犹他儿童研究医院-华盛顿大学儿科癌症基因组计划领导的一项研究证实一种融合基因导致了一种预后极差的罕见儿童白血病亚型30%的病例。 研究结果提供了首个证据表明一种错误导致了显著比例的儿童急性巨核细胞白血病(AMKL)。AMKL约占儿童急性髓系白血病(AML)的10%。这一发现为推动迫切所