如何正确利用MPN法计算菌落?

1915年,McCrady首次发表了用MPN(最可能数MostProbale Number,MPN)来估算细菌浓度,这是一种应用概率理论来估算细菌浓度的方法。目前,中国普遍将MPN法用于食品大肠菌群等的检测。由于对MPN计数法的理解不充分,导致很多检测人员在使用MPN法进行微生物定量检测的时候存在很多错误认识,从而导致检测结果的错误。正确理解MPN计数法对实验室的微生物检测及食品工业的微生物控制都有着重要的指导作用。以下对使用MPN计数法时容易出现的问题给予说明。 一、使用MPN计数法做检测时,操作中应确保以下三个方面: 1)样品均质和稀释均匀。 MPN计数法基于两点假设:1、微生物在完全混匀的稀释液里随机分布;2、只要接种的稀释液里含有微生物就一定在液体培养基里生长。若样品及稀释液混匀不充分,就满足不了MPN计数法统计的基础,从而不能获得准确的结果。因此,在检测过程中,必须按要求对样品进行均质......阅读全文

MPN法简介

The Most Probable Number Method  In the following example, a set of 3 tubes of an all purpose broth medium is inoculated from each of the ten-fold

大肠菌群检测MPN法与平板计数法比较!

   GB4789.3-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》中规定了大肠菌群计数的MPN法与平板计数法,那这两种方法怎么选择以及有什么区别呢?今天小编就跟大家普及一下~   图片   二者范围不同:   GB4789.3-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大

稀释培养测数法(MPN)

一、实验目的通过对好气性自生固氮菌的计数,了解稀释培养计数(MPN)的原理和方法。二、实验原理   最大或然数(most probable  number,MPN)计数又称稀释培养计数,适用于测定在一个混杂的微生物群落中虽不占优势,但却具有特殊生理功能的类群。其特点是利用待测微生物的特殊生理功能的选

稀释培养测数法(MPN)

一、实验目的通过对好气性自生固氮菌的计数,了解稀释培养计数(MPN)的原理和方法。二、实验原理        最大或然数(most probable  number,MPN)计数又称稀释培养计数,适用于测定在一个混杂的微生物群落中虽不占优势,但却具有特殊生理功能的类群。其特点是利用待测微生物的特殊生

MPN法测大肠菌群

  1、检样稀释:以无菌操作,将检样 25 g(或 25 mL)剪碎放于含有225 mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(内置适量玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1:10的均匀稀释液。固体样品在加入稀释液后,最好置均质器中以8 000 r/min~10 000 r/min的速度处理1

如何正确利用MPN法计算菌落?

  1915年,McCrady首次发表了用MPN(最可能数MostProbale Number,MPN)来估算细菌浓度,这是一种应用概率理论来估算细菌浓度的方法。目前,中国普遍将MPN法用于食品大肠菌群等的检测。由于对MPN计数法的理解不充分,导致很多检测人员在使用MPN法进行微生物定量检测的

大肠菌群检测知识及MPN法检测的注意要点

  一、大肠菌群的定义:  1、指一群在36℃条件下培养48h能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。  2、该菌群主要来源于人畜粪便, 作为粪便污染指标评价食品的卫生状况, 推断食品中肠道致病菌污染的可能。  3、大肠菌群不是细菌学上分类命名,而是一组与粪便污染有关的细菌。这群细

大肠杆菌的检测方法-滤膜法

  滤膜法是目前最为流行的检测水中大肠杆菌群的方法。滤膜法的具体步骤是首先将一定量的水体样本注入 0.45μm的滤膜过滤,经过抽滤,水中的细菌则被留在滤膜上,将滤膜贴于品红亚硫酸钠培养基上培养 24h,温度为恒温 37℃,这使得菌群因发酵乳糖而使得滤膜,出现紫红色,通过计算滤膜上的菌落进而计算出单位

微生物检查中的MPN-法和CFU-法

MPN (most probable number)法即最近似数法,也称为最大可能数法,是食品检验中常用的方法.其生化反应基础为乳糖发酵,革兰阴性菌的无芽胞杆菌,如大肠菌群,一般在 37℃、24h 发酵乳糖、产酸产气.利用此原理,将供试液加到发酵培养基中,37℃培养24h.若不产气,则报

微生物检查中的MPN-法和CFU-法

  MPN (most probable number)法即最近似数法,也称为最大可能数法,是食品检验中常用的方法.其生化反应基础为乳糖发酵,革兰阴性菌的无芽胞杆菌,如大肠菌群,一般在 37℃、24h 发酵乳糖、产酸产气.利用此原理,将供试液加到发酵培养基中,37℃培养24h.若不产气,则报告控制菌

食品微生物检验中的MPN-法和CFU-法

MPN (most probable number)法即最近似数法,也称为最大可能数法,是食品检验中常用的方法.其生化反应基础为乳糖发酵,革兰阴性菌的无芽胞杆菌,如大肠菌群,一般在 37℃、24h 发酵乳糖、产酸产气.利用此原理,将供试液加到发酵培养基中,37℃培养24h.若不产气,则报

大肠杆菌的检测方法--平板计数法

  该方法是统计物品含菌数的有效方法,操作的顺序是首先将样本进行适当稀释,使其中的微生物充分分散成单个细胞,取定量的稀释液进行培养使其逐渐生长成肉眼可观察的菌落,然后通过稀释度和样本数量来计算菌数。但是,由于待测样品往往不宜完全分散成单个细胞,所以,长成的一个单菌落也可能来自样品中的 2~3或更多

关于大肠杆菌的发酵法检测介绍

  这种方法主要是在44.5℃下的培养基上进行大肠杆菌的培养,该培养基含有荧光底物,需要培养 24 h。然后对荧光底物进行释放,需要采用葡萄糖醛酸进行,让培养基能够在紫外光的照射下发出荧光。采用这样的方式方法,还可以进行统计学估计原来样品中的菌落。主要步骤包括发酵、分离培养、二次发酵、显微镜观察等。

关于大肠杆菌的平板计数法检测

  用无菌吸管吸取稀释度样品1 mL,该样品与乳糖胆盐发酵类似,然后将其放入无菌培养皿中,再加入温度于 45℃下的 CDLJ JD 显色培养基中10 mL的量,并进行培养皿中溶液均匀混合,可以通过快速转动培养皿的方式,等溶液凝固以后,加入5 mL左右 [3] ,然后快速摇晃培养基,使其可以均匀覆盖平

大肠杆菌的检测方法酶底物法

  酶底物法已被列为国家标准(GB/T4789.32-2002),用酶底物法来检测大肠杆菌的主要原理是:大肠杆菌细菌能够产生 β-半乳糖苷酶(β-D-galactosidase),它能够分解 ONPG(Ortho-nitro phenyl-β-D-galactopyr-anoside),从而使得培养

液体稀择最大或然数法(-MPN)测数

  取定量( 1 ml)的单细胞微生物悬液,用培养液作定量10 倍系列稀释,重复3 ~5 次,将不同稀释度的系列稀释管置适宣温度下培养。在稀释度合适的前提下,在菌浓度相对较高的稀释管内均出现菌生长,而自某个稀释度较高的稀释管开始至稀释度更高的稀释管中均不出现菌生长,按稀释度自低到高的顺序,把最后3

大肠杆菌的检测方法多管发酵法简介

  多管发酵法是根据大肠菌群能发酵乳糖产酸产气的特征,检测水样中大肠菌群的方法。多管发酵的大肠菌群阳性,如果在 44.5℃的培养基上进行 24h的培养,能释放出荧光产物而使培养基在紫外光源的照射下呈现荧光反应,此种方法即可检测出样本中是否含有大肠杆菌,具体步骤:取一定量水样于乳糖蛋白胨培养液中进行初

MPN法应用过程中容易出现的问题

  由于对MPN法的理解不充分,很多检测人员在使用MPN法进行微生物定量检测的时候存在很多错误认识,从而极易导致检测结果的错误。在这里对MPN法应用过程中容易出现的问题做一些解释。   1.样品均质和系列稀释必须保证均匀   MPN法样品均质和稀释液混匀非常重要。MPN法的两点假设之一是

关于大肠杆菌的免疫磁珠法检测介绍

  该分离技术的主要原理是以磁珠为载体和抗体,进行抗体和磁珠的结合,然后通过磁力技术完成力学的移动,进而分离大肠杆菌。与其他分离细菌的方式相比,这样的方式方法具有一定的优点,该技术可以提升样本中病原性弧菌的检测成功率,并且免疫磁珠技术可以于不同菌种中对不同的微生物进行处理,进而在很大程度上提高检测效

关于大肠杆菌的自动化仪器检测法简介

  主要是运用免疫自动化分析仪,该技术产生并运用于1970年。随着科技的发展和进步,自动化仪器检测技术应用非常广泛,并且操作起来非常方便,可以节约很多时间,其受干扰的程度较小,可以节省人力物力的投入,也可以提高检测的精确度。在现阶段的发展过程中,自动酶的免疫检测体系的应用非常广泛。

我国快速建立肠出血性大肠杆菌检测法

  建立了覆盖近50种EHEC的诊断血清   近日,我国细菌学科学家、生物技术科学家联手,快速建立肠出血性大肠杆菌O104H4检测方法和鉴定方法,并已开始向全国推广。中国CDC(疾病预防控制中心)传染病预防控制所所长徐建国研究员日前在接受记者专访时称,该方法的建立,为我国各地及时捕捉可能入侵的这一

埃希氏大肠菌及检验

一、定义:  大肠埃希氏菌更习惯称为大肠杆菌,分类于肠杆菌科,归属于埃希氏菌属,并且大肠杆菌株ATCC  11775是该属的模式菌种。大肠杆菌的不同菌株间DNA相关性为80%,而与同科的志贺氏菌属(除鲍氏志贺氏菌外)的DNA相关性可达80-87%。与人类疾病有关的大肠杆菌,统称为致泻性大肠杆菌(此

埃希氏大肠菌及检验

一、定义:  大肠埃希氏菌更习惯称为大肠杆菌,分类于肠杆菌科,归属于埃希氏菌属,并且大肠杆菌株ATCC  11775是该属的模式菌种。大肠杆菌的不同菌株间DNA相关性为80%,而与同科的志贺氏菌属(除鲍氏志贺氏菌外)的DNA相关性可达80-87%。与人类疾病有关的大肠杆菌,统称为致泻性大肠杆菌(此

mpn是什么意思

mpn是骨髓增殖性肿瘤的英文缩写。是一类疾病的总称,包括原发性骨髓纤维化、真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、慢性髓系白血病以及慢性嗜酸性白血病等。这几种疾病的共同特点是疾病发展缓慢,主要表现为原发性或多发性骨髓细胞逐渐增多,大多数患者有一个或多个获得性基因突变。

TSS-法快速转化大肠杆菌

A.过夜培养物转种后27拚2度快摇约205hrs至O.D 值为0.3 左右。B.取1ml菌液离心收菌,加入0.1ml 冰浴的1 ′TSS 液轻轻吸打悬起细胞。(可以放-70 摄氏度冻存半年)B 、可以取0.1ml 菌液加入0.1ml 冰浴的2 ′TSS 混匀,该方法只适于做质粒转化,如做连接产物转化

食品检测技术食品大肠菌群检验方法

  由于大肠菌群指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌,即:需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。因此大肠菌群的检测一般都是按照它的定义进行。  目前国内采用的进出口食品大肠菌群检测方法主要有国家标准和原国家商检局制订的行业标准。两个标准方法在检测程序上略有不同。 

科学家开发出大肠杆菌超灵敏快速检测法

摘要: 美国佛罗里达大学科学家使用纳米粒子技术,开发出一种新的大肠杆菌检测法,即使样本里只有一个大肠杆菌也能检测出来,整个过程只需要20分钟. 美国佛罗里达大学科学家使用 纳米粒子 技术,开发出一种新的 大肠杆菌 检测法,即使样

关于大肠杆菌的滤膜法简介

  该方法主要过程:加入 10 mL 左右的无菌水于滤器中,然后掺入一些无菌水进行清洁滤器的内壁,再进行过滤,将滤膜放在 M-FC 培养基中,两者之间不能够有气泡,然后进行密封,存放温度为 44.5℃,存放时间约 24 h,直到大肠杆菌的菌群变成蓝色或蓝绿色。然后记录数据,估算每一单位的水溶液菌群数

大肠杆菌转化实验——热击法

大肠杆菌转化可以:(1)将重组DNA分子导入大肠杆菌受体细胞进行复制,增殖和表达,以获得目的基因;(2)验证大肠杆菌感受态细胞效果;(3)用于分子生物学其他研究。实验方法原理质粒DNA或重组DNA粘附在细菌细胞表面,经过42摄氏度短时间的热击处理,促进吸收DNA.然后在非选择培养基中培养一代,待质粒

大肠杆菌的检测方法

  随着人们生活水平的提高,食品安全问题受到越来越多的重视,在不断被报道的食品安全事故中,大肠杆菌是引起这些事件的主要的影响因素之一,是判断食品污染程度的一个重要参数,因此采用快速、可靠、简便的方法来准确检测食品中大肠杆菌数量是否超标是至关重要的。本文综述了大肠杆菌的传统检测方法以及最新的检测方法,