电子显微镜免疫细胞化学技术概述
第七章 电子显微镜免疫细胞化学技术第一节 电子显微镜免疫细胞化学技术概述免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献，但由于光学分辨率的限制，不可能从细胞超微结构水平观察和研究免疫反应。因此，Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白（ferritin）标记抗体的方法，为在细胞超微结构水平研究抗原抗体反应提供了可能。在此基础上，相继发展了杂交抗体技术、铁蛋白抗铁蛋白复合物技术、蛋白A-铁蛋白标记技术、免疫酶技术及胶体金技术等。电子显微镜免疫细胞化学技术（以下简称免疫电镜技术技术）区别于免疫细胞化学和常规电镜技术主要在以下几方面：一、组织固定与取材在这方面的要求是即要保存良好的细胞超微结构，又要注意保持组织的抗原性。因此，选用固定剂不宜过强。常用的免疫电镜固定剂有多聚甲醛―戊二醛混合液和过碘酸-赖氨酸―多聚甲醛液（Periodate―Lysine �Paraformaldehyde简称PLP液）。也有采用B......阅读全文
免疫细胞化学常用试剂介绍
一、固定剂 大多数神经激素、肽类物质为水溶性，在用于免疫细胞化学研究之前，常需固定。但肽类和蛋白质的物理、化学性质不同，因而对不同的固定方法或固定剂的反应也不尽相同。某些固定剂甚至可同时破坏和/或保护同一抗原的不同抗原决定簇。因此，在进行免疫细胞化学研究之前，很有必要了解所要研究的物质（蛋白质或肽
免疫细胞化学与图像分析
在细胞生物学中，一个常见的问题是如何获取与细胞功能相关的各种定量测量信息。在免疫细胞化学中也存在同样的问题。制作免疫细胞化学标本环节 较多，只要有一个环节 失误就会影响实验结果，除了需要精制的药品外，还需要熟练的技术。那么，做成了理想的标本后，如何进行观察，才能获得尽量多的的各种定量信息，而且使这些
扫描电子显微镜的应用概述
扫描电子显微镜 (scanning electron microscope, SEM) 是一种用于高分辨率微区形貌分析的大型精密仪器 [3] 。具有景深大、分辨率高, 成像直观、立体感强、放大倍数范围宽以及待测样品可在三维空间内进行旋转和倾斜等特点。另外具有可测样品种类丰富, 几乎不损伤和污染原
免疫细胞化学与图像分析2
六、实例介绍 因为将免疫细胞化学方法与图像分析结合起来进行研究的论文在国内国外都还不多。在第六届国际学术会议上发表的90多篇论文中只有1篇，因此在实例介绍中，包括一部分不是免疫细胞化学方法，而是用其他组织学方法与图像分析结合起来研究，但这种方法对研究免疫细胞化学标本也可借鉴，从中可得到一些启发的
免疫细胞化学染色操作规程
一、材料和试剂1、玻片：须用免疫组化专用玻片，或用2%多聚赖氨酸包被处理玻片。2、5-10%正常山羊血清封闭液，用PBS配。3、3%牛血清白蛋白（BSA），用PBS配。4、0.01M PH7.4 PBS5、1% BSA-PBS（含0.05% Tween20）6、AEC底物（1）底物缓冲液（20X
免疫细胞化学常用试剂介绍2
三、显色液 免疫细胞化学中，由于抗原-抗体反应所形成的复合物本身无色，无法直接观察，因而需借助于某些化学基团的呈色作用，使其得以显示，以利于在显微镜下观察。常用的显色液有： 1．DAB（Diaminobenzidine）显色液 DAB即3，3-二氨基苯联胺 试剂：DAB（常用四盐酸盐） 50
概述透射电子显微镜的应用
透射电子显微镜在材料科学、生物学上应用较多。由于电子易散射或被物体吸收，故穿透力低，样品的密度、厚度等都会影响到最后的成像质量，必须制备更薄的超薄切片，通常为50～100nm。所以用透射电子显微镜观察时的样品需要处理得很薄。常用的方法有：超薄切片法、冷冻超薄切片法、冷冻蚀刻法、冷冻断裂法等。对于
概述透射电子显微镜衍射模式
通过调整磁透镜使得成像的光圈处于透镜的后焦平面处而不是像平面上，就会产生衍射图样。对于单晶体样品，衍射图样表现为一组排列规则的点，对于多晶或无定形固体将会产生一组圆环。对于单晶体，衍射图样与电子束照射在样品的方向以及样品的原子结构有关。通常仅仅根据衍射图样上的点的位置与观测图像的对称性就可以分析
免疫细胞化学技术的新进展半抗原交联抗体法
免疫细胞化学技术在继续改进和完善中，新的技术方法不断出现。除目前国内已开始应用的免疫金技术和免疫金银技术外，80年代，新的免疫细胞化学技术还有半抗原交联抗体法和令人瞩目的分子杂交免疫细胞化学技术。免疫金银技术和分子杂交免疫细胞化学技术将分别以专章叙述，本节仅就半抗原交联抗体法作一简要介绍。【半抗原交
电子显微镜技术应用
电子显微镜技术应用 1、电子显微镜技术在肿瘤诊断中的应用 因此，透射电子显微镜突破了光学显微镜分辨率低的限制，成为了诊断疑难肿瘤的一种新的工具。有研究报道，无色素性肿瘤、嗜酸细胞瘤、肌原性肿瘤、软组织腺泡状肉瘤及神经内分泌肿瘤这些在光镜很难明确诊断的肿瘤，利用电子显微镜可以明确诊断电子显微镜主要
显微技术概述
显微技术概述在近代仪器发展史上，显微技术一直随着人类科技进步而不断的快速发展，科学研究及材料发展也随着新的显微技术的发明，而推至前所未有的微小世界。自从 1982 年Binning 与 Robher 等人共同发明扫描穿隧显微镜(scanning tunneling microscope, STM)之
PCR技术概述
聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）技术是基因扩增技术的一次重大革新，是分子生物学发展史中的一个重要里程碑。使用PCR扩增技术，可以将极微量的靶DNA片段特异地扩增上百万倍，大大提高了对DNA分子的分析和检测能力。PCR技术具有敏感度高、特异性强、快速简便等优
蓝牙技术概述
SIG组织于1999年7月26日推出了蓝牙技术规范1.0版本。蓝牙技术的系统结构分为三大部分：底层硬件模块、中间协议层和高层应用。 底层硬件部分包括无线跳频（RF）、基带（BB）和链路管理（LM）。无线跳频层通过2.4GHz无需授权的ISM频段的微波，实现数据位流的过滤和传输，本层协议主要定
色谱技术概述
色谱技术又称层析技术、色层技术，是生物大分子研究中必不可少的工具，已被普遍认为是当前分离生化样品最有效的手段。不管是哪一种色谱方法，其最基本的特征是具有一个固定相和一个流动相，各种物质得以分离的最基本原因就在于它们在这两个相间具有不同的分配系数。当两相作相对运动时，这些物质在两相间进行反复多次的分配
酶免疫细胞化学染色操作指南1
一、材料和试剂1、玻片：须用免疫组化专用玻片，或用2%多聚赖氨酸包被处理玻片。2、5-10%正常山羊血清封闭液，用PBS配。3、3%牛血清白蛋白（BSA），用PBS配。4、0.01M pH7.4 PBS5、1% BSA-PBS（含0.05% Tween20）6、AEC底物（1）底物缓冲液（20X）
神经内分泌肿瘤免疫细胞化学
人体存在两种形式分布的内分泌细胞，一种是内分泌细胞群集形成内分泌器官，如垂体等，另一种是内分泌细胞单个散在于其它组织细胞之间，形成弥散的内分泌系统（diffuse en－docrine system）。通过免疫细胞化学方法及超微结构观察，人们对内分泌细胞的分布形态与功能等不断有新的发现。1968年，
内分泌肿瘤免疫细胞化学(2)
（三）促甲状腺激素瘤 甚为少见，约占1%，常发生于长期甲状腺功能低下的病人，由于缺乏甲状腺素，通过负反馈作用刺激其细胞增生。光镜下常为嫌色性细胞腺瘤，胞浆含少量PAS阳性物质。电镜下分泌颗粒稀疏。 （四）促肾上腺皮质激素腺瘤 此瘤能合成促肾上腺皮质激素（ACTH）和其它肽类如内啡肽等，可引起
酶免疫细胞化学染色操作指南2
2、加3% H2O2，细胞片20ul/孔，培养板100ul/孔，使充分覆盖住细胞。3、室温10分钟后，甩掉 H2O2，用PBS轻轻淋洗2分钟。用滤纸吸干细胞周围水份，96孔在滤水纸上扣干，但注意保持细胞湿润。三、封闭细胞片用5-10%正常山羊血清（20ml/孔），细胞板用2-5%BSA（PBS配制）
免疫细胞化学和免疫荧光实验
载玻片/盖玻片处理聚醚酰亚胺或多聚赖氨酸在室温下包被盖玻片1小时。无菌水冲洗盖玻片（3次 ，每次5分钟）。可将盖玻片干完全干燥，并在紫外光下消毒至少4小时。在玻片上种植细胞，或准备细胞离心涂片器，或做好涂抹准备。磷酸盐缓冲液（ PBS ）进行简短的冲洗。第一步：细胞固定用预冷的甲醇、丙酮（ 1-10
概述透射电子显微镜的成像方式
电子束穿过样品时会携带有样品的信息，TEM的成像设备使用这些信息来成像。投射透镜将处于正确位置的电子波分布投射在观察系统上。观察到的图像强度，I，在假定成像设备质量很高的情况下，近似的与电子波函数的时间平均幅度成正比。若将从样品射出的电子波函数表示为Ψ，则 不同的成像方法试图通过修改样品射出的
概述透射电子显微镜的真空系统
电镜镜筒内的电子束通道对真空度要求很高，电镜工作必须保持在10-3～10Pa以上的真空度（高性能的电镜对真空度的要求更达10Pa以上），因为镜筒中的残留气体分子如果与高速电子碰撞，就会产生电离放电和散射电子，从而引起电子束不稳定，增加像差，污染样品，并且残留气体将加速高热灯丝的氧化，缩短灯丝寿命
概述透射电子显微镜的操作步骤
开循环水。由于新电镜循环水不关，这步可省。但要注意水温是否正常。打开电源开关。IN/OUT。从来都是开着的，这步也可省。打开荧屏电源；检查荧屏第一页：确认①电压是否在120KV。②确认样品位置“specimen position”为原点：=0，0，0，如果不是原点，使用观察窗左侧“SPEC CO
实用电子显微镜技术
第一章 电子显微镜技术发展简史第一节 电子显微镜发展简史一、国外电子显微镜生产简况二、国内电子显微镜生产简况三、电子显微镜的发展第二节 电子显微镜技术的发展与应用一、电子显微镜技术的发展二、电子显微镜技术的应用第三节 其他显微技术的发展第四节 电子显微学主要学术组织和刊物一、国内电子显微学学术组织及
电子显微镜的技术缺陷
1.在电子显微镜中样本必须在真空中观察，因此无法观察活样本。随着技术的进步，环境扫描电镜将逐渐实现直接对活样本的观察；2.在处理样本时可能会产生样本本来没有的结构，这加剧了此后分析图像的难度；3.由于电子散射能力极 强，容易发生二次衍射等；4.由于为三维物体的二维平面投影像，有时像不唯 一；5.由于
电子显微镜的技术缺陷
1.在电子显微镜中样本必须在真空中观察，因此无法观察活样本。随着技术的进步，环境扫描电镜将逐渐实现直接对活样本的观察；2.在处理样本时可能会产生样本本来没有的结构，这加剧了此后分析图像的难度；3.由于电子散射能力极 强，容易发生二次衍射等；4.由于为三维物体的二维平面投影像，有时像不唯 一；5.由于
电子显微镜的技术缺陷
1.在电子显微镜中样本必须在真空中观察，因此无法观察活样本。随着技术的进步，环境扫描电镜将逐渐实现直接对活样本的观察；2.在处理样本时可能会产生样本本来没有的结构，这加剧了此后分析图像的难度；3.由于电子散射能力极 强，容易发生二次衍射等；4.由于为三维物体的二维平面投影像，有时像不唯 一；5.由于
水处理技术概述
我国地域辽阔，水资源丰富，水质因地域的不同而差异很大。如果原水是井水，则有机物负荷不会很大；如果是地表水(湖水、河水)，可能含有较高水平的有机物，并且有机物的组成和数量可能受季节变化影响；市政供水(自来水)通常是经过氯处理的，在去除氯之前，其中微生物的含量是比较低的，并且其生长通常是受到抑制的。通常
凝胶色谱技术概述
凝胶色谱法凝胶色谱技术是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离分技术，由于设备简单、操作方便，不需要有机溶剂，对高分子物质有很高的分离效果。目前已经被生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学以及医学等有关领域广泛采用，不但应用于科学实验研究，而且已经大规模地用于工业生产。一、基本理论
电泳技术概述
电泳是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物分子，如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可电离基团，它们在某个特定的pH值下可以带正电或负电，在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷极性相反的电极方向移动。电泳技术就是利用在电场的作用下，由于待分离样品中各种分子带电性质以
海洋声学技术概述
海洋研究和开发所用的水声技术，如回声探测、被动探测、水声通讯、水声遥测和水声遥控等。 回声探测 利用一组换能器发射声信号，通过另一组换能器接收从目标反射的回声信号，再由处理后的信号判断目标的参数和性质。 回声测深仪 它向海底发射一束较窄的声脉冲，测量此信号由海底反射并回到水听器的时间，在