平滑肌细胞培养方法4
动脉平滑肌细胞培养的几个问题组织块大小边缘密度翻面时间观察时间对原代细胞萌发的影响对于贴块法的原代培养来源,由于细胞并非直接获得,而是从组织块边缘长出,其中有一“突破过程”,且细胞萌发后尚需一定的细胞密度才能使其存活、增殖,故组织块大小、边缘、密度均影响细胞萌出与否及细胞存活、增殖。公认的方法是将血管剪成1 mm2大小组织块[1~3]。张映娜等认为组织块0.5~2 mm2范围内,大小影响不大(可调整翻瓶时间以保证组织块贴壁)[4]。但如组织块超过2 mm2将增加细胞萌出的阻力。而组织块边缘整齐、光滑、密度亦对细胞生长起着重要作用。组织块边缘过度受损或毛糙不平及组织块密度过稀或重叠将使细胞很难萌出。作者认为剥除内膜、外膜时用力适中,避免机械拉伤,将镊子夹过处切去,剪切时力求一次剪断。切组织块时不要离开培养液操作,保持边缘湿润,组织块密度以中瓶(100 ml)铺放取自6~8只150~250 g大鼠胸主动脉剪碎组织为宜,而......阅读全文
干细胞培养传统方法受质疑
人类干细胞通常是在一层饲养细胞上培养的,据认为,这可为细胞提供必需的营养物质,并有助于防止细胞分化。最近,一项新的研究对这种根深蒂固的做法提出了挑战。延伸阅读:更安全的干细胞培养新方法。 众所周知,干细胞是很难维持和培养。像所有的真核细胞一样,它们对养分的有效性、pH值、温度、氧气和二氧化碳的
细胞培养污染拯救及预防方法
概论§ 污染是细胞培养的大敌。预防和避免污染是细胞培养成功的关键之一。§ 一开始就要十分重视,防止污染,否则会前功尽弃,不仅浪费时间,而且浪费人力、物力,甚至造成无法弥补的损失。(一)污染的类型§ 细胞培养过程中的污染不仅仅指微生物,而且还包括所有混入培养环境中的、对细胞生存有害或造成细胞不纯的物质
PC12细胞培养方法步骤
PC12细胞是大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株,具神经内分泌细胞的一般特征,因其具可传代特点,广泛应用于神经生理和神经药理学研究。1. PC12细胞有两种:未分化型和分化型。其中未分化型的PC12细胞贴壁能力强,传代时需要胰酶消化,形状不规则。分化型PC12细胞传代时不需要胰酶,直接可以吹下来,形
植物细胞培养的方法有哪些
植物组织培养一般分为以下几种:1、胚胎培养指以从胚珠中分离出来的成熟或未成熟胚为外植体的离体无菌培养。2、器官培养指以植物的根、茎、叶、花、果等器官为外植体的离体无菌培养,如根的根尖和切段,茎的茎尖、茎节和切段,叶的叶原基、叶片、叶柄、叶鞘和子叶,花器的花瓣、雄蕊(花药、花丝)、胚珠、子房、果实等的
细胞培养污染拯救及预防方法
(一)污染的类型细胞培养过程中的污染不仅仅指微生物,而且还包括所有混入培养环境中的、对细胞生存有害或造成细胞不纯的物质,包括生物和化学物质。1、细菌污染细菌污染是实验室细胞培养中常见的污染,即使在细胞培养液中加入了抗菌素,也可能因为操作不慎而引起污染。-常见的有革兰氏阳性菌,如枯草杆菌以及大肠杆菌、
细胞生物基本方法:肿瘤细胞培养
肿瘤细胞培养特殊之处在于成纤维细胞的排除(成纤维细胞常与肿瘤细胞同时混杂生长,致难以纯化肿瘤组织)。有以下一些方法:1.机械刮除法2.反复帖壁法3.消化排除法4.胶原酶消化法 1) 机械刮除法1.标记:镜下观察,用不脱色笔在培养瓶皿的背面圈下生长肿瘤细胞的部位。2.刮除:弃掉培养液,把无菌胶刮伸入
干细胞培养器皿的清洗方法
干细胞离体条件下,有害物质可直接与细胞接触,细胞对任何有害甚至有益的物质十分敏感,极少量残留物就会对细胞产生毒性作用。因此,新的或重新使用的器皿都必须认真清洗,使其达到不含任何残留物的要求。因不同培养器皿的材料、结构、使用方法不同,清洗的方法也有区别.现分别介绍如下。1.玻璃器皿的清洗,玻璃器皿的清
单细胞培养的方法有哪些
1.转瓶培养这个比较老的工艺,在逐步淘汰,不过投资少,技术含量低,人员经少量培训就可以操作。2.悬浮培养非贴壁依赖性细胞的一种培养方式。细胞悬浮于培养基中生长或维持。某些贴壁依赖性细胞经过适应和选择也可用此方法培养。增加悬浮培养规模相对比较简单,只要增加体积就可以子。深度超过5mm,需要搅动培养基,
细胞培养基的灭菌方法
培养基的灭菌方法主要有两种,高压除菌及过滤除菌。与过滤相比,高压灭菌的工作强度小,成本较低,但易造成营养成分的流失,而且在多次加样(无菌谷氨酰胺溶液,无菌碳酸氢钠溶液等)过程中容易造成二次污染。 大多数培养基采用0.1~0.2μm孔径的微孔滤膜进行过滤灭菌,并且已成为培养基除菌的发展方向,它可
4℃下菌种保藏方法
1、液体石蜡保存法先将液体石蜡灭菌,然后放于37℃恒温箱中,使水汽蒸发掉备用。再将需要保存的菌种在最适宜的斜面培养基中培养,用无菌吸管吸取已灭菌的液体石蜡,注入已长好的斜面培养基上,用量以高出斜面顶端1cm为准。试管需直立,置4℃或室温下保存,一般无芽胞细菌可保存1年左右。2、高层半固体琼脂石蜡保存
4℃下菌种保藏方法
1、液体石蜡保存法 先将液体石蜡灭菌,然后放于37℃恒温箱中,使水汽蒸发掉备用。再将需要保存的菌种在最适宜的斜面培养基中培养,用无菌吸管吸取已灭菌的液体石蜡,注入已长好的斜面培养基上,用量以高出斜面顶端1cm为准。试管需直立,置4℃或室温下保存,一般无芽胞细菌可保存1年左右。 2、高
关于右心房与下腔静脉平滑肌瘤的手术方法介绍
1、右心房与下腔静脉平滑肌瘤的一期根治术 适用于一般情况较好、循环障碍较轻的患者。气管插管全麻,采用胸骨切迹至耻骨上正中胸腹联合切口,显露心脏、下腔静脉、双髂静脉。在体外循环深低温、低流量循环或暂停循环下,切开下腔静脉,切开或不切开右心房,将肿物推至下腔静脉,由下腔静脉拉出肿瘤,找到附着点,连
胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法
胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法有贴块法(explant)和酶解离法(enzyme disperse)。下面一起来看下这两种方法。1、贴块法方法:动物经颈动脉放血后,在无菌操作下迅速取出胸腹主动脉段,置于含Hank's液的平皿中漂洗3次,将凝块洗干净后剥除外膜的纤维脂肪层,然后纵行切开血
皮肤血管平滑肌瘤病例分析
1 临床资料 患者女,53 岁,右手腕背侧小结节 5 年,于 2018 年 12 月 18 日来我科就诊。患者 5 年前右手腕 背侧无明显诱因出现 1 个米粒大小结节,缓慢生 长,逐渐至花生大小,无自觉症状,有轻微压痛。既 往史、个人史、家族史无特殊。体检:一般情况好,各 系统检查未见
抗平滑肌抗体的介绍
抗平滑肌抗体(SMA)是以机体平滑肌组织为抗原的一种自身抗体,无器官及种属特异性,主要为IgG和IgM类型。鼠肝、肾、人甲状腺和血小板等组织与平滑肌的肌动球蛋白具有共同的抗原性。因此用纯化的肌浆球蛋白为抗原可进行沉淀试验、间接血凝试验、放射免疫测定和酶免疫技术检测SMA。但目前最常用的是以平滑肌
下唇血管平滑肌瘤病例分析
1 临床资料 患者男, 26 岁,下唇结节半年。患者于半年前 发现下唇一约黄豆大小的皮色结节,稍隆起于皮面, 无自觉不适,未予诊治,皮损缓慢增大,来本科就诊。 患者既往体健,否认内科疾病病史、手术及外伤史, 家族中无类似病史。体检:一般情况可,全身浅表淋 巴结未触及,心肺腹未见异常。皮肤科情况:
抗平滑肌抗体的定义
是抗肌动球蛋白的自身抗体。一般采用IFA法,以大鼠胃作为抗原基质,阳性可见胃壁平滑肌呈现亮绿色荧光。ASMA是自身免疫性肝炎的血清学标志抗体。在其他肝病例如肝外胆汁淤滞、药物诱发性肝病、急性病毒性肝炎以及肝癌患者中检出率很低。其他疾病如传染性单核细胞增多症、SS、RA、支原体肺炎、肿瘤和病毒感染
抗平滑肌抗体的简介
抗平滑肌抗体(SMA)是以机体平滑肌组织为抗原的一种自身抗体,无器官及种属特异性,主要为IgG和IgM类型。鼠肝、肾、人甲状腺和血小板等组织与平滑肌的肌动球蛋白具有共同的抗原性。因此用纯化的肌浆球蛋白为抗原可进行沉淀试验、间接血凝试验、放射免疫测定和酶免疫技术检测SMA。但目前最常用的是以平滑肌
肝脏血管平滑肌瘤病例报告
血管平滑肌瘤是一种罕见的起源于静脉血管壁内肌组织的良性肿瘤,绝大部分发生于四肢(尤其是下肢);其次是头部,表现为皮肤或皮下结节;躯干及内脏器官发病极为罕见。发生于肝脏的血管平滑肌瘤,在PubMed数据库和维普期刊资源整合服务平台检索到的相关中英文文献仅有5例报道。现结合相关文献对收治的1例肝脏血管平
平滑肌瘤的检查方式介绍
平滑肌瘤可做病理组织学检查,组织病理检查可见平滑肌细胞呈长梭形或略显波纹状常平行排列。 1、血管平滑肌瘤 起源于静脉壁肌肉,位于皮下,有完整包膜的瘤。组织内有许多静脉管壁、平滑肌细胞及胶原增生。管腔狭窄或压缩成星状,无内弹力膜和外膜,多见透明样变和黏液样变,平滑肌细胞与周围瘤组织无明显境界,
关于平滑肌细胞的简介
平滑肌细胞是指构成平滑肌的组织。平滑肌即无纹肌的通称,是被视为较横纹肌原始的一种肌肉。平滑肌除作为无脊椎动物的躯体肌而有广泛分布外,在脊椎动物除心肌之外而大部分内脏肌也是由平滑肌组成的。
乳晕处平滑肌瘤病例分析
1 临床资料 患者女, 27 岁,右侧乳房肤色结节12 年。12 年 前患者右侧乳房乳晕部位无明显诱因出现一芝麻大 小肤色结节,无自觉症状,未予重视,以后皮损缓慢 增大,未予治疗。近2 年来皮损增大较明显,无明显 疼痛,逐来本院就诊。追问病史,患者近2 年来有反 复挤压皮损习惯。患者既往体健
青皮对平滑肌的作用
青皮注射液能降低离体豚鼠胃、肠、胆囊及小鼠子宫的紧张性收缩,并使膀胱平滑肌兴奋。对乙酰胆碱引起的豚鼠离体胃、肠及家兔在体胃平滑肌以及氨甲酰胆碱引起的胆囊收缩,有显著的解痉作用。对组胺引起的豚鼠离体肠和水杨酸毒扁豆碱引起的家兔在体肠紧张性收缩,有显著的抑制作用。能对抗脑垂体后叶素引起的小鼠子宫紧张
鼻部血管平滑肌瘤临床分析
病例 一临床资料男,52 岁。因鼻尖出现结节 3 年,于 2013 年 5 月 23 日就诊。3 年前,无明显诱因患者鼻尖部出现一蚕豆大小淡青色结节,无明显自觉症状, 近3个月结节部位偶有肿胀感。否认局部有外伤病史。 既往史及个人史无特殊,否认家族中有类似疾病者。 体格检查:系统检查未见异常。皮肤科
支原体污染细胞培养的检测方法
由于支原体种类不同,应采取不同的方法进行检测,常用的方法有如下几种。1、观察细胞的形态和生长特征支原体污染比较严重时可出现生长减慢,有的培养基pH明显变酸,并出现细胞病变,其病变特征与病毒感染相似,因此不能准确诊断。2、分离培养法大多数支原体可出现特有的典型菌落。该方法准确、可靠,但时间长,敏感性不
人类干细胞培养又有新方法
人类多能干细胞(hPSCs)能够自我更新并转换成为体内其他任何类型的细胞,使其成为细胞移植疗法、药物开发、细胞分化和发育研究的一种很有前途的材料来源。然而,众所周知,干细胞是很难维持和培养。像所有的真核细胞一样,它们对养分的有效性、pH值、温度、氧气和二氧化碳的含量都很敏感,而且它们也易于分化,
减少造成细胞培养失败的处理方法
微生物污染是造成细胞培养失败的主要原因 (一)物理消毒法 1.紫外线消毒:紫外线是一种低能量的电磁辐射,可杀死多种微生物。革兰阴性菌最为敏感,其次是阳性菌,再次为芽孢,真菌孢子的抵抗力最强。紫外线的直接作用是通过破坏微生物的核酸及蛋白质等而使其灭活,间接作用是通过紫外线照射产生的臭氧杀死微生
细胞培养污染拯救及预防方法1
概论污染是细胞培养的大敌。预防和避免污染是细胞培养成功的关键之一。一开始就要十分重视,防止污染,否则会前功尽弃,不仅浪费时间,而且浪费人力、物力,甚至造成无法弥补的损失。(一)污染的类型细胞培养过程中的污染不仅仅指微生物,而且还包括所有混入培养环境中的、对细胞生存有害或造成细胞不纯的物质,包括生物和
动物细胞培养的概念和方法
动物细胞培养:从动物机体中取出相关的组织,将它们分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,生长,增殖。1、细胞或组织。2、常用方法物理:剪刀剪碎,化学法:胰蛋白酶,胶原蛋白酶3、制作细胞悬浮液,方法:加培养液。形成细胞悬浮液4、培养细胞株,原代培养,传代培养5、形成细胞系,传代培养,遗传物质的改变。
细胞培养细胞成长曲线制作方法
细胞成长曲线还有其他办法制作,除此以外还有相对计数的办法,该类办法首先要制作规范曲线,标定细胞数和某个变量的函数,然后我们只需要测定每天这个变量的值便能够核算出细胞数。常用的是 MTT、CCK8 等比色的办法。