平滑肌细胞培养方法4

动脉平滑肌细胞培养的几个问题组织块大小边缘密度翻面时间观察时间对原代细胞萌发的影响对于贴块法的原代培养来源,由于细胞并非直接获得,而是从组织块边缘长出,其中有一“突破过程”,且细胞萌发后尚需一定的细胞密度才能使其存活、增殖,故组织块大小、边缘、密度均影响细胞萌出与否及细胞存活、增殖。公认的方法是将血管剪成1 mm2大小组织块[1~3]。张映娜等认为组织块0.5~2 mm2范围内,大小影响不大(可调整翻瓶时间以保证组织块贴壁)[4]。但如组织块超过2 mm2将增加细胞萌出的阻力。而组织块边缘整齐、光滑、密度亦对细胞生长起着重要作用。组织块边缘过度受损或毛糙不平及组织块密度过稀或重叠将使细胞很难萌出。作者认为剥除内膜、外膜时用力适中,避免机械拉伤,将镊子夹过处切去,剪切时力求一次剪断。切组织块时不要离开培养液操作,保持边缘湿润,组织块密度以中瓶(100 ml)铺放取自6~8只150~250 g大鼠胸主动脉剪碎组织为宜,而......阅读全文

细胞培养一般方法有哪些

细胞培养首先分为原代培养和传代培养.一、原代培养需要从组织中消化、分离、纯化出单细胞,然后继续进行传代、冻存;二、传代培养首先进行细胞复苏:1.应遵守慢冻快融的原则.先将水温锅调至37-38度,取出冻存的细胞迅速放入后交细胞面浸至水面以下不断摇动至融化.2.在无菌台内将完全培养基加入培养瓶内,然后用

细胞培养污染拯救及预防方法2

2、支原体污染的检测(1)相差显微镜观察直接取少许培养液滴在载物片上,再盖上盖片观察,支原体在镜下呈暗色微小颗粒,多位于细胞与细胞之间,有时可见类似于布朗运动的表现。应注意与细胞破碎溢出的内容物如线粒体等相区别。(2)荧光染色法观察用荧光染料Hoechst33258,此染料能与DNA特异地结合,可使

通道载玻片内细胞培养方法介绍

本应用简报说明了如何在细胞培养微通道内生长贴壁细胞。将描述细胞接种,培养基交换和光学性质。另外,显示了细胞培养通道和标准开放孔格式之间的主要差异。 为了显示细胞接种和μ-Slide处理,使用μ-Slide VI 0.4进行演示。像通常方法一样制备细胞悬液(例如3×105细胞/ ml)并将30μl加到

细胞培养传代培养的方法

1.悬浮生长细胞传代多采用离心法传代。1000转/分,20-30秒后去上清。沉淀细胞加新培养液后再混匀传代。亦有直接传代法,即悬浮细胞沉淀在瓶壁时,将上清培养液去除1/2-1/3,然后用吸管直接吹打形成细胞悬液再传代.2.半悬浮生长细胞传代(Hela细胞)此类细胞部分呈现贴壁生长现象,但贴壁不牢,可

细胞生物基本方法:上皮细胞培养

上皮细胞培养1)表皮细胞培养1.取材:取外科植皮或手术残余皮肤小块,以角化层薄者为佳,早产流产儿皮肤更好,切成0.5~1平方厘米小块。2.EDTA处理:先置入0.02%EDTA中室温置5分钟。3.冷消化:换入0.25%胰蛋白酶中,置4℃过夜。4.分离:取出皮肤,用血管钳或镊子把表皮与真皮层分开。5.

细胞培养常用器材及处理方法

一、玻璃器材   常用的玻璃器材有各种规格的玻璃瓶、培养瓶、培养皿、吸管、离心管等。   无论是初次使用还是培养后重复使用的玻璃器材均需要进行消毒处理。*使用的玻璃器材应先用自来水初步刷洗,然后用稀盐酸溶液(1%)浸泡过夜,再用自来水冲洗,后处理方法与重复使用的器皿的处理。重复使用的玻璃器皿的处理步

预防支原体污染的细胞培养方法

检查培养基是否污染由于支原体污染的主要来源之一是从实验室外带进来的细胞,建议使用可靠的细胞库提供的细胞。 如果存在应当隔离的支原体污染的细胞,而没有单独的细胞培养箱的情况下,在隔离期内,应使用有盖的塑料细胞培养瓶。不要使用培养板和未密封的培养皿。对怀疑有污染的培养的细胞,应在每天所有其他细胞培养工作

通道载玻片内细胞培养方法(二)

对于细胞接种,必须应用不同的细胞密度以在表面上获得相同量的细胞。在该示例中,目标是接种25个细胞/单位面积。由于μ-Slide 8孔内液体的高度是7.5倍,因此应用的细胞浓度必须低于相同的因子。  基于不同高度的液体内部μ-Slide VI 0.4和μ-Slide 8孔。在上面的例子中,相同的生长区

原代心肌细胞培养方法探讨

摘要 探讨培养Wister新生大鼠心肌细胞的可靠方法。采用心肌组织块差别消化结合化学纯化的培养方法,通过倒置显微镜、HE染色、透射电镜、台盼篮、免疫细胞化学,鉴定心肌细胞生长情况及纯度。结果细胞生长迅速、自行搏动,细胞形态完整,细胞内肌丝、线粒体清晰;细胞成活率达94.6%;肌动蛋白(HHF35)经

培养基神经胶质细胞培养方法

 神经细胞(神经元〕不易培养基,只有在适宜情况下,如接种在胶原底层上,或加入神经生长因子和胶质细胞因子时,可出现一定程度的分化,长出突起等现象,但很难使之增值。而神经胶质细胞是神经组织中比较容易培养的成分。培养方法如下:1、从手术室无菌取脑髓灰质或白质后,仔细剥除脑膜、血管和纤维成分,置Hanks液

脐静脉内皮细胞培养方法2

(2)术前准备取一根脐带(离体3个小时内,平均1小时,剪去夹伤部位)2个50ML注射器,1个30ML注射器和1个10ML注射器1个止血钳,2根插管,14号线2CM长,消毒巾,消毒手术刀和无菌手套手术区域准备:一块床单和无菌手套封套3 脐带手术操作和培养(1)用手术刀整齐切断脐带两端(2)静脉(口径最

通道载玻片内细胞培养方法介绍

本应用简报说明了如何在细胞培养微通道内生长贴壁细胞。将描述细胞接种,培养基交换和光学性质。另外,显示了细胞培养通道和标准开放孔格式之间的主要差异。 为了显示细胞接种和μ-Slide处理,使用μ-Slide VI 0.4进行演示。像通常方法一样制备细胞悬液(例如3×105细胞/ ml)并将30μl加到

通道载玻片内细胞培养方法(一)

本应用简报说明了如何在细胞培养微通道内生长贴壁细胞。将描述细胞接种,培养基交换和光学性质。另外,显示了细胞培养通道和标准开放孔格式之间的主要差异。 为了显示细胞接种和μ-Slide处理,使用μ-Slide VI 0.4进行演示。像通常方法一样制备细胞悬液(例如3×105细胞/ ml)并将30μl加到

脐静脉内皮细胞培养方法1

一、试剂和缓冲液配制1、胎牛血清(氯化十六烷基吡啶)(1)解冻胎牛血清(2)在56℃加热30分钟(脱补体作用,盖上瓶)(3)取25ml上述液体放在无菌的50ml的falcon里分馏(4)在-20℃冰冻馏份2、磷酸盐缓冲液(PBS)(1)无钙镁离子的100ML的PBS(10×)(生命技术)(2)900

植物基因转化常用方法4

1.2 其它的基因附加工程在水稻、棉花、马铃薯、番茄和其它作物上也进行了δ-内毒素工程,获得昆虫抗性也不仅仅是指有着一种方法。蛋白酶抑制剂也是较好的选择,它可以一只昆虫肠道内的蛋白酶活性,阻止或减缓害虫生长,许多植物能产生蛋白酶抑制剂,如豇豆和common bean, 他们的基因已经被成功的转移到其

如何巧妙利用血清培养细胞

在细胞培养实验室中,血清是常见的科研试剂之一,常见的血清种属有人的和动物两种,而动物的又分为牛、猪、鸡、羊等,根据客户对产品种属与来源的选择,价格也是不同的。对于实验新手来说,稍有不慎就会影响到实验结果,甚至让花费几千元买来的血清失去效果。那么我们要如何正确的使用与操作呢?今天上海文韧与您探讨“如何

细胞培养实验——悬浮细胞培养

实验材料冻存 HeLa S3 细胞试剂、试剂盒70% 乙醇完全 MEM-10胰酶/EDTA仪器、耗材旋转瓶完全培养基-525 cm2 组织培养瓶C02 培养箱Sorvall H-6000A 转子100 ml 或 200 ml 通气旋转瓶和带滤膜的瓶盖实验步骤1. 将含有冻存 HeLa S3 细胞的安

食管平滑肌瘤的临床表现

  约半数平滑肌瘤患者完全没有症状,因其他疾病行胸部X线检查或胃肠道造影而被发现。即使有症状也多轻微,最常见的是轻度下咽不畅,很少影响正常饮食。病程可达数月至十多年,即使肿瘤已相当大,因其发展很慢,梗阻症状也不重。进食哽咽可能是间歇性的,其严重程度与肿瘤大小和部位并不完全平行,主要取决于肿瘤环绕管腔

血清抗平滑肌抗体的概述

  抗平滑肌抗体(SMA)是以机体平滑肌组织为抗原的一种自身抗体,无器官及种属特异性,主要为IgG和IgM类型。鼠肝、肾、人甲状腺和血小板等组织与平滑肌的肌动球蛋白具有共同的抗原性。因此用纯化的肌浆球蛋白为抗原可进行沉淀试验、间接血凝试验、放射免疫测定和酶免疫技术检测SMA。但目前最常用

平滑肌瘤的诊断和治疗介绍

  诊断  临床出现单发或成簇的疼痛性丘疹或结节,若用一小块冰放在病变处数秒种,平滑肌即收缩,肌瘤表面可出现皱缩,应考虑平滑肌瘤的诊断。活检可确诊。  治疗  平滑肌瘤的治疗方法以手术切除为主。单个肿瘤者应完整切除,否则易复发。多发性肿瘤手术切除并植皮,对于多发性损害不便手术时为缓解疼痛可服用硝苯地

抗平滑肌抗体的基本介绍

  抗平滑肌抗体(SMA)是以机体平滑肌组织为抗原的一种自身抗体,无器官及种属特异性,主要为IgG和IgM类型。鼠肝、肾、人甲状腺和血小板等组织与平滑肌的肌动球蛋白具有共同的抗原性。因此用纯化的肌浆球蛋白为抗原可进行沉淀试验、间接血凝试验、放射免疫测定和酶免疫技术检测SMA。但目前最常用的是以平滑肌

平滑肌细胞的分离和培养

实验材料0.25%胰蛋白酶和EDTA混合液试剂、试剂盒平滑肌培养液仪器、耗材Petri培养皿手术刀和10号手术刀片解剖剪组织镊实验步骤1. 从小牛取胸主动脉。2. 将胸主动脉浸入 Hanks 液。3. 分离细胞之前将动脉放在冰上。4. 将动脉放入 150 mm × 25 mm Petri 培养皿。5

精囊原发性平滑肌瘤病例分析

患者男,46岁。“左下腹部隐痛不适4天”入院。患者4天前无明显诱因出现左下腹部隐痛不适。当地医院超声提示盆腔肿块。我院盆腔CT增强检查示(图1,2):盆腔左后方肿块,良性首先考虑,来源于精囊腺可能性大。门诊以“盆腔肿物待查”收入院。病程中患者无尿痛、肉眼血尿及脓尿。既往史:1996年“精囊炎”病史,

鸡爪黄连对平滑肌的作用

  小檗碱除对血管平滑肌起松弛作用外,对其他平滑肌如子宫、膀胱、支气管、肠胃道等都具有兴奋作用。对离体豚鼠及猫的子宫有显着的兴奋作用,甚至超过北美黄连碱,此点在妇产科应用上有意义。黄连煎剂对离体兔肠,低浓度使肠的紧张度上升,浓度过高反引起弛缓。

鞍区血管平滑肌瘤病例报告

血管平滑肌瘤(angioleiomyoma)为良性肿瘤,来源于血管及平滑肌组织丰富的间叶组织;往往发生于体部,尤其多见于四肢,罕见位于颅内,目前文献报道的病例数仅10余例。其中发生在蝶鞍区的血管平滑肌瘤更为罕见,临床上极易误诊为垂体腺瘤。现将首都医科大学附属北京天坛医院神经外科经病理学确诊的2例患者

照山白对平滑肌作用

  用不同浓度的莨菪亭与氨茶碱在离体豚鼠气管平滑肌上实验表明,当药物浓度在2~6×10-5,两者均能明显地对抗组织胺或乙酰胆碱引起的气管平滑肌痉挛。莨菪亭对乙醇胆碱2×10-5的拮抗作用强度约为氨茶碱的82~90%,而对组织胺2×10-5的拮抗作用则与氨茶碱相似或超过。

治疗食管平滑肌瘤的相关介绍

  食管平滑肌瘤虽为良性,但有恶变倾向,且肿瘤长期生长可压迫周围脏器。平滑肌瘤无症状并且生长缓慢,但长大后可有临床表现。故除体积小的肿瘤——直径在2厘米以下者、无任何症状,或患者因老弱、心肺功能低下等身体条件不适合手术者外,一经诊断均应手术治疗,术后复发罕见。  由于本病发展缓慢,虽有潜在恶性倾向,

平滑肌细胞的收缩原理介绍

  平滑肌纤维和横纹肌一样是以“肌丝滑动”原理进行收缩的。由于每个收缩单位是由粗肌丝(肌球蛋白)和细肌丝(肌动蛋白)组成,它们的一端借细肌丝附着于肌膜的内面,这些附着点呈螺旋形。肌丝单位大致与平滑肌长轴平行,但有一定的倾斜度。粗肌丝没M线,表面的横桥有半数沿着相反方向摆动,所以当肌纤维收缩时,不但细

过山风对平滑肌的影响

  救必应乙素对离体兔耳血管灌流,证明对血管平滑肌有收缩作用。其黄酮甙部分,对豚鼠离体回肠有松弛作用,且能拮抗乙酰胆碱引起的肠痉挛。

平滑肌细胞的分离和培养

实验材料0.25%胰蛋白酶和EDTA混合液                                                          试剂、试剂盒平滑肌培养液                                                          仪