RACE技术的原理和操作
近年来随着生物技术的不断发展，出现了许多克隆新基因的方法和手段，如图谱克隆技术、转座子标签技术、mRNA差异显示技术二基因组减法技术以及cDNA文库筛选技术等。但上述方法人多具有实验周期长、技术步骤烦琐且工作量大等特点。cDNA末端快速扩增技术（rapid amplification of cDNA ends，RACE）是一种基于PCR从低丰度的转录本中快速扩增cDNA的5'和3'末端的有效方法，以其简单、快速、廉价等优势而受到越来越多的重视。经典的RACE技术是由Frohman等（1988）发明的一项技术，主要通过RT-PCR技术由已知部分cDNA序列来得到完整的cDNA5'和3'端，包括单边PCR和锚定PCR。该技术提出以来经过不断发展和完善，克服了早期技术步骤多、时间长、特异性差的缺点（Frohman等，1995：Schaefer，l995： Chen，1998： Bespalo......阅读全文
CRISPR基因编辑技术的定义和技术原理
CRISPR（Clustered regularly interspaced short palindromic repeats）是生命进化历史上，细菌和病毒进行斗争产生的免疫武器，简单说就是病毒能把自己的基因整合到细菌，利用细菌的细胞工具为自己的基因复制服务，细菌为了将病毒的外来入侵基因清除，
Western－Blot－相关技术操作与原理2
一、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 30%丙烯酰胺-双丙烯酰胺溶液 4 × 浓缩胶缓冲液 (Stacking gel Buffer, pH 6.8) 4 × 分离胶缓冲液 (Resolving gel buffer pH 8.8) 10 × SDS-PAGE电泳缓冲液 10 × 蛋白电转移缓冲液
Western－Blot－相关技术操作与原理1
【实验原理】： Western Blot 印迹方法，又称为免疫印记，是将获得的蛋白质样品通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，对不同分子量的蛋白质进行分离，并通过转移电泳将凝胶上分离到的蛋白质转印至固相支持物（NC膜或PVDF膜）上，用抗靶蛋白的非标记抗体（一抗）与转印后膜上的靶蛋白进行特异性结合，再与经
5端RACE升级版
实验概要完成这个RACE需要全套反转录系统，当然选一个好的反转录酶（无RNase H），dUTP，taq酶，Uracil DNA glycosylase ，还有这几条引物： Adapter A AUCUCGAGUUCGCGCCGGAUCC(T) 25 VN cDNA synthesis and ad
细胞的分裂指数测定原理和操作步骤
一、原理体外培养细胞 生长、分裂繁殖的能力，可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的联系，如随着分裂指数的不断提高，细胞也就进入了指数生长期。分裂指数指细胞 群体中分裂细胞 所占的百分比，它是测定细胞 周期的一个重要指标，也是不同实验研究选择细胞的重要依据。二、仪器、用品与试剂1、仪器与用品：CO2
电阻炉的工作原理和操作步骤
电阻炉是以电流通过导体所产生的焦耳热为热源的电炉。 电阻炉以电为热源，通过电热元件将电能转化为热能，在炉内对金属进行加热。电阻炉和火焰比，热效率高，可达50－80℅，热工制度容易控制，劳动条件好，炉体寿命长，适用于要求较严的工件的加热，但耗电费用高。 按传热方式，电阻炉分为辐射式电阻炉和对流式电
重组DNA的转化实验原理和操作步骤
实验目的制备出感受态细胞，把体外重组的DNA引入受体细胞，使受体菌具有新遗传性，并从中选择出转化子。实验原理感受态就是细菌吸收转化因子的生理状态，只有发展为感受态的细胞才能稳定摄取外来的DNA分子。pUC18的LacZ基因区域当有DNA片段插入时，LacZ基因失活，转化进入大肠杆菌并在含有IPTG和
磁力搅拌器的原理和操作步骤
磁力搅拌器是用于液体混合的实验室仪器，主要用于搅拌或同时加热搅拌低粘稠度的液体或固液混合物。 其基本原理是利用磁场的同性相斥、异性相吸的原理，使用磁场推动放置在容器中带磁性的搅拌子进行圆周运转，从而达到搅拌液体的目的。配合加热温度控制系统，可以根据具体的实验要求加热并控制样本温度，维持实验条件所需的
吸收色谱法的原理和操作方式
吸附色谱利用固定相吸附中心对物质分子吸附能力的差异实现对混合物的分离，吸附色谱的色谱过程是流动相分子与物质分子竞争固定相吸附中心的过程。基本原理吸附剂1．物理吸附又称表面吸附，是因构成溶液的分子（含溶质及溶剂）与吸附剂表面分子的分子间力的相互作用所引起的。a) 基本规律：“相似者易于吸附”，固液吸附
返滴定法的原理和操作办法
返滴定法1. 原理在含有卤素离子的硝酸溶液里，加入一定量过量的硝酸银，用铁铵矾为指示剂，用标准溶液返滴定剩余的过量的硝酸银。滴定反应 ：(过量) +→AgX↓+ → AgSCN↓ (白色)终点反应：+→（淡棕红色）2. 滴定条件(1)滴定应在0.1--1 mol/L 的硝酸介质中进行，如果酸度太低，
质粒DNA的酶切原理和操作步骤
1．目的学会用限制性内切酶切割质粒DNA。2．原理II型限制性内切酶能识别双链DNA内部的特殊序列并在识别位点处将双链切断，形成粘性末端或齐平末端，通过电泳酶切后的DNA混合物能够确认和分离酶切片段。3．器材旋涡混合器，微量移液取样器，移液器吸头，1.5ml微量离心管，双面微量离心管架，水漂，恒温水
PCR扩增的原理和操作步骤－有哪些
PCR技术的基本原理 类似于DNA的 天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。 PCR是一种体外DNA 扩增技术，是在模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在的条件下，依赖于DNA聚合酶的酶促合反应，将待扩增的DNA片段与其两侧互补的寡核苷酸链引物经“高温变性——低温退火—
熔点仪的原理和操作规程说明
熔点仪的原理： 熔点是指物质在大气压力下固态与液态处于平衡时的温度。固体物质熔点的测定通常是将晶体物质加热到一定温度时，晶体就开始由固态转变为液态，测定此时的温度就是该晶体物质的熔点。 熔点测定是辨认物质本性的基本手段，也是纯度测定的重要方法之一。因此，在化学工业、医药研究中据有重要地位，是生
电泳仪的制作原理和操作使用
相信大多数学者，科研人员会使用各种电泳仪，但是，也相信很多人不知道电泳仪的主要技术指标，日常工作中，发现大多数电泳仪的客户对电泳仪的技术指标不是很清楚，其实电泳仪的主要技术指标主要有以下几项：1.输出电压；2.输出电流；3.输出功率；4.电压稳定度；5.电流稳定度；6.功率稳定度；7.输出组数；8.
DNA的酶切实验原理和操作步骤
一、实验目的 本实验学习、了解限制性内切酶的特性，学习根据具体目的设计适当的酶切体系并实施之。 二、实验原理 利用限制性内切酶切割DNA是DNA重组过程中的关键步骤之一。成功的酶切为后续工作提供了有效的实验材料。限制性内切酶是细菌体内限制修
电阻炉的工作原理和操作步骤
一、工作原理 电阻炉是以电流通过导体所产生的焦耳热为热源的电炉。 电阻炉以电为热源，通过电热元件将电能转化为热能，在炉内对金属进行加热。电阻炉和火焰比，热效率高，可达50－80℅，热工制度容易控制，劳动条件好，炉体寿命长，适用于要求较严的工件的加热，但耗电费用高。 按传热方式，电阻炉
霉菌的形态观察实验原理和操作步骤
一、实验目的1、学习自制水浸片观察微生物的形态；2、学习并掌握观察霉菌形态的基本方法，了解四类常见霉菌的基本形态特征。二、基本原理霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特征是识别不同种类霉
仪器|ICPMS的基础原理和操作
简单认识ICP-MS： ICP-MS全称为电感耦合等离子体质谱仪（inductively coupled plasma mass spectrometry）。是一种将ICP技术和质谱结合在一起的分析仪器。它能同时测定多种痕量无机元素。可以进行同位素分析，单元素和多元素分析以及复杂环境中金属元素
双向琼脂扩散技术的的技术特点和原理
中文名称双向琼脂扩散英文名称double immunodiffusion定 义将抗原与抗体分别加入琼脂凝胶的小孔中，两者自由向四周扩散并相遇，在比例合适处形成沉淀线。应用学科免疫学（一级学科），应用免疫（二级学科），免疫学检测和诊断（三级学科）
生物反应技术的原理和应用
生物反应器，是指利用自然存在的微生物或具有特殊降解能力的微生物接种至液相或固相的反应系统。研究得最多的两种反应器是“升降机型反应器”和“土壤泥浆反应器”。升降机型反应器是通过水相的流动来提供适当的营养、碳源和氧气，从而达到降解土壤中污染物质的目的。与固相系统相比，生物反应器能够在更短的时间内将污染物
阵列构筑技术的原理和特点
基于氧化铝模板，通过气相法、电沉积、原位溶胶－凝胶等技术，构筑了各种纳米线、纳米管、异质结纳米线等的有序排列的阵列体系。发展了催化诱导CVD技术，在孔内预先置入金属纳米颗粒作为催化剂，通过CVD过程沿孔内生长出单晶Si，GaN,等纳米线阵列体系；发展了基于模板的电沉积技术，成功地获得了一系列铁磁－非
分子杂交的原理和技术特点
不同的DNA片段之间，DNA片段与RNA片段之间，如果彼此间的核苷酸排列顺序互补也可以复性，形成新的双螺旋结构。这种按照互补碱基配对而使不完全互补的两条多核苷酸相互结合的过程称为分子杂交。分子杂交（molecular hybridization）确定单链核酸碱基序列的技术。其基本原理是待测单链核酸与
荧光抗体技术的原理和特点
荧光抗体技术，用荧光物标记抗体来检测细胞或组织中相应抗原或抗体的技术。荧光物种类一般有异硫氰酸荧光素、罗丹明荧光素、二氯三嗪基氨基荧光素等。一般是将待测标本固定于玻片表面，滴加已知荧光抗体后再以缓冲液冲洗，干燥后于荧光显微镜下观察阳性是可见带荧光的抗原抗体复合物; 阴性无荧光(因为带荧光的抗体不能与
基因转移技术的原理和应用
基因转移指应用物理、 化学或生物学方法将目的基因转移入受体细胞内的过程。基因转移技术在基因工程、生物医学研究、基因治疗、植物农作物品种改 造等领域被广泛应用。通过基因转移将遗传信息从一个基因组向另一个基因组转移，使 转移的遗传信息在受者生物表达。
指纹技术的原理和应用特点
中文名称指纹技术英文名称fingerprinting定 义将待检测分子进行部分分解或扩增(如蛋白质的酶解、DNA的聚合酶链反应扩增等)，然后进行层析、电泳等分离，获得特征性分离图谱(指纹)的方法。用以辨别样品之间的差异。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
锁模技术的原理和目的
锁模技术就是采用一定的调制方法，使激光振荡不同频率各纵模之间有确定的相位关系，即各纵模相邻频率间隔相等并固定为 △ν=c/2nL ，故锁模也称为锁相。目的：获得窄脉宽、高峰值功率的超短脉冲激光。
数字PCR技术的发展和原理
数字PCR即Digital PCR（dPCR)，它是一种核酸分子绝对定量技术。相较于qPCR，数字PCR可让你能够直接数出DNA分子的个数，是对起始样品的绝对定量。在定量PCR时，我们常常纠结一个问题，究竟是相对定量还是绝对定量呢？如今，你无需纠结了，因为数字PCR（digital PCR）来了。尽
基因敲除技术的原理和方法
1.利用基因同源重组进行基因敲除基因敲除是80年代后半期应用DNA同源重组原理发展起来的。80年代初，胚胎干细胞(ES细胞)分离和体外培养的成功奠定了基因敲除的技术基础。1985年，首次证实的哺乳动物细胞中同源重组的存在奠定了基因敲除的理论基础。到1987年，Thompsson首次建立了完整的ES细
DNA芯片技术的原理和应用
DNA芯片技术就是指在固相支持物上原位合成寡核苷酸或者直接将大量的DNA探针以显微打印的方式有序地固化于支持物表面，然后与标记的样品杂交，通过对杂交信号的检测分析，即可获得样品的遗传信息。是伴随“人类基因组计划”的研究进展而快速发展起来的一门高新技术。通俗地说，基因芯片是通过微加工技术，将数以万计、
分子印记技术的原理和应用
中文名称分子印记技术英文名称molecular imprinting technique;MIT定 义制备对某一特定分子具有空间结构选择性识别能力聚合物的技术。得到的聚合物称“分子印记聚合物(molecular imprinting polymer, MIP)”，主要用于蛋白质等特定分子的高效分离