冻存细胞的复苏
实验方法原理 冻存细胞应在流水中快速融化并加入生长培养液。实验者应配戴护目镜和手套,因为曾浸没在液氮中的冻存管中可能漏人液氮,而当融化冻存液时冻存管中的气体温度上升可导致爆炸。 实验材料 冻存细胞 试剂、试剂盒 乙醇 细胞培养液 仪器、耗材 冻存管、水浴锅 实验步骤 1) 调整水龙头温度为 40°C,在龙头下放置一广口烧杯......阅读全文
细胞冻存实验
实验方法原理细胞生长至对数晚期,以培养基制备高浓度细胞悬液,加入细胞保护剂,等份转移至冻存管中,缓慢冷冻(图 20.8)。细胞用胰酶消化后,加入含有细胞保护剂的培养基,分装至冻存管中,然后将其夹到铝条上,用纸质管包裹,放入隔热储存管中。将储存管及其内容物于-70℃或-80℃存放4h或过夜,最后将含有
细胞的冻存
细胞的冻存 实验方法原理 已长满的细胞经胰蛋白酶处理后,重悬于冻存液中。两种试剂即甘油和 DMSO 是常用的细胞保护剂,它们在细胞保存液中起到防止细胞内冰晶形
细胞的冻存
实验方法原理 已长满的细胞经胰蛋白酶处理后,重悬于冻存液中。两种试剂即甘油和 DMSO 是常用的细胞保护剂,它们在细胞保存液中起到防止细胞内冰晶形成的目的。血清的浓度经常增加至 20%。实验步骤 1) 吸干已长满细胞的细胞瓶内培养液。细胞不应在高密度状态下冻存,并应在冻存的 24 小时内换液。2)
细胞冻存实验
细胞冻存实验可以用于:(1)妥善贮存细胞;(2)维持细胞生存;(3)节约人力、物力、时间及减少污染机会;(4)维持细胞发生遗传性状的稳定。实验方法原理细胞生长至对数晚期,以培养基制备高浓度细胞悬液,加入细胞保护剂,等份转移至冻存管中,缓慢冷冻。细胞冻存时向培养基中加入保护剂,即终浓度5%.15%的甘
如何冻存细胞
一、材料 (一)仪器 1.净化工作台 2.离心机 3.恒温水浴箱 4.冰箱(4℃、-20℃、-70℃) 5.倒置相差显微镜 6.培养箱 7.液氮冰箱 (二)玻璃器皿 1.吸管(弯头、直头) 2.培养瓶 3.玻璃瓶(250ml、100ml) 4.废液缸 (三)塑料器皿 1
细胞冻存实验
方案20.1 冷冻细胞 实验方法原理 细胞生长至对数晚期,以培养基制备高浓度细胞悬液,加入细胞保护剂,等份转移至冻存管中,缓慢冷
细胞冻存实验
实验方法原理 在不附加任何条件下直接冻存细胞时,细胞内外环境中的水会结成冰晶,能导致细胞发生一系列变化,如机械损伤、电解质升高、渗透压改变、脱水、pH 改变、蛋白质变性等等,最终导致细胞死亡。但如向细胞培养液中加入保护剂甘油或二甲基亚砜(DMSO),可使冰点降低,在缓慢的冻结条件下,能使细胞内水分在
如何冻存细胞
一、材料 (一)仪器 1.净化工作台 2.离心机 3.恒温水浴箱 4.冰箱(4℃、-20℃、-70℃) 5.倒置相差显微镜 6.培养箱 7.液氮冰箱 (二)玻璃器皿 1.吸管(弯头、直头) 2.培养瓶 3.玻璃瓶(250ml、100ml) 4.废液缸 (三)塑料器皿 1
细胞的冻存
细胞的冻存实验主要用于:(1)长时间保存细胞系;(2)防止细胞保存液内产生冰晶。实验方法原理已长满的细胞经胰蛋白酶处理后,重悬于冻存液中。两种试剂即甘油和 DMSO 是常用的细胞保护剂,它们在细胞保存液中起到防止细胞内冰晶形成的目的。血清的浓度经常增加至 20%。实验材料细胞试剂、试剂盒胰蛋白酶冻存
细胞冻存实验
方案20.1 冷冻细胞 实验方法原理 细胞生长至对数晚期,以培养基制备高浓度细胞悬液,加入细胞保护剂,等份转移至冻存管中,缓慢冷