CreloxP基因重组技术
re-loxP 是一种位点特异的基因重组技术，被广泛应用于特异位点的基因敲除、基因插入、基因翻转和基因易位，在真核生物和原核生物中均有广泛应用。Cre-loxP 的基本原理Cre 蛋白是一种重组酶，是causes recombination的缩写，于1981 年从 P1 噬菌体中被发现，属于 λInt 酶超基因家族。Cre 重组酶基因编码区序列全长1029bp（EMBL 数据库登录号为 X03453），编码 38kDa 蛋白质，Cre 重组酶是由 343 个氨基酸组成的单体蛋白。LoxP 位点，是 locus of X-over P1的缩写，是位于 P1 噬菌体中的 34bp 序列，由两个 13bp 的反向回文序列和 8bp 的中间间隔序列共同组成，间隔序列决定 loxP 的方向，loxP 位点的序列如下所示：13bp 8bp 13bpATAACTTCGTATA-NNNTANNN-TATACGAAGTTATC......阅读全文
生物物理所揭示头小畸形致病基因Cenpj的新功能
3月13日，中国科学院生物物理研究所王晓群研究组在神经科学杂志The Journal of Neuroscience 发表了题为Cenpj regulates cilia disassembly and neurogenesis in the developing mouse cortex 的研
研究揭示胰腺导管细胞和腺泡细胞之间命运转变
近日，中国科学院分子细胞科学卓越创新中心（生物化学与细胞生物学研究所）周斌团队以Use of a dual genetic system to decipher exocrine cell fate conversions in the adult pancreas为题在Cell Discove
生物医学研究的重要里程碑——世界首张小鼠“扰动图谱”
“人类基因组早被测序，但其功能至今深藏不露，这严重妨碍了疾病诊治。”上海科技大学生命学院教授池天说，“21世纪生物医学的重要任务就是解码人类基因组这部‘神秘天书’。”7月22日，池天团队在《细胞》在线发表论文，报道了一种崭新的小鼠基因打靶技术iMAP，并快速鉴定了90个基因在39种组织的基本功能，构
转基因大鼠在突破技术限制再次发挥在特定领域研究...1
转基因大鼠在突破技术限制再次发挥在特定领域研究的应用建立合适的疾病动物模型是基础医学科研中非常重要的研究方法，大鼠和小鼠是疾病研究中的主力军。由于体积小、成本低，特别是胚胎细胞相对稳定，方便进行各种遗传操作，进行基因编辑这个优点，使得小鼠成为解析人类基因功能最重要的模式生物。但是，与小鼠相比，大鼠在
世界首张小鼠“扰动图谱”解码基因功能
“人类基因组早被测序，但其功能至今深藏不露，这严重妨碍了疾病诊治。”上海科技大学生命学院教授池天说，“21世纪生物医学的重要任务就是解码人类基因组这部‘神秘天书’。”7月22日，池天团队在《细胞》在线发表论文，报道了一种崭新的小鼠基因打靶技术iMAP，并快速鉴定了90个基因在39种组织的基本功能，构
南开大学陈凌懿教授发表CRISPR新成果
利用抗生素进行筛选，是分子克隆的一个关键步骤。日前，南开大学的研究者们以CRISPR/Cas技术为基础，开发了一个重复利用抗生素抗性的简单筛选方法，这一方法非常适用于多步骤的基因工程改造。对于一个分子生物学实验室来说，抗生素抗性基因几乎是不可或缺的。虽然这些基因是鉴定正确克隆的有力工具，但抗生素
基因敲除真把整个基因敲掉吗？
一般我们把基因分成两类：编码蛋白的基因不编码蛋白的基因这两类基因的敲除方式有着很大的区别编码蛋白的基因这些基因的功能主要是通过编码区中的三联体密码所编码的蛋白来实现的。基因敲除的最终目的是让这个基因的蛋白产物不能发挥功能，或者蛋白不能表达。整个编码区统统删掉所有的密码都没了，当然就不能翻译出蛋白啦！
《Cell》：世界首张小鼠微型“扰动图谱”，解密基因功能
7月22日，上海科技大学生命学院池天课题组在《细胞》（Cell）杂志在线发表论文，报道了一种崭新的小鼠基因打靶技术iMAP（inducible Mosaic Animal for Perturbation），快速鉴定了90个基因在39种组织的基本功能，构建了世界首张小鼠微型“扰动图谱”。早在2001
精准示踪！“看清”血管发育过程
心肌梗死是临床上常见的心血管疾病，具有极高的致死、致残率。其病因主要是给心脏供血的冠状动脉发生梗阻后，导致大片心肌细胞死亡，而死亡的心肌细胞基本无法再生。为治疗心肌梗死，医学领域逐渐形成两条研究思路，即产生新的血管以增加心脏供血和直接产生新的心肌细胞。那么，它们在体内来源于哪里，又是如何产生的？围绕
精准示踪！“看清”血管发育过程
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/4/499235.shtm心肌梗死是临床上常见的心血管疾病，具有极高的致死、致残率。其病因主要是给心脏供血的冠状动脉发生梗阻后，导致大片心肌细胞死亡，而死亡的心肌细胞基本无法再生。为治疗心肌梗死，医学领域逐渐形
基因修饰小鼠（GEM）模型在肿瘤学研究中的应用（一）
前沿相对于过去常用的肿瘤细胞接种和免疫缺陷小鼠模型，基因修饰小鼠（GEM）模型是建立在天然完整免疫条件下的原发（de novo）肿瘤。因此，作为肿瘤学研究的工具，GEM模型更能模拟人肿瘤的组织病理学和分子学特征，表现为有更好的遗传异质性，其优势在于能反映肿瘤细胞自身，以及肿瘤微环境中细胞等相互作
PROTACs技术实现从小鼠到恒河猴蛋白水平的快速降解
2月5日，中国科学院生物物理研究所姬广聚课题组与清华大学药学院饶燏课题组及北京大学张秀琴课题组合作在Cell discovery 期刊在线发表了题为A Chemical Approach for Global Protein Knockdown from Mice to Non-human Pr
PROTACs技术实现从小鼠到恒河猴蛋白水平的快速降解
2月5日，中国科学院生物物理研究所姬广聚课题组与清华大学药学院饶燏课题组及北京大学张秀琴课题组合作在Cell discovery 期刊在线发表了题为A Chemical Approach for Global Protein Knockdown from Mice to Non-human Pr
腺相关病毒（AAV）技术快速入门手册（二）
rAAV的局限性有哪些？1.体外实验表达水平较低：主要是因为rAAV病毒的基因组是单链DNA，在体外环境形成双链并转录翻译外源基因的效率非常低。可以在体外水平感染rAAV病毒的同时感染辅助病毒比如Ad5型腺病毒或者终浓度10~50mM的丁酸钠等方法提高细胞实验的rAAV表达量。2.需较长时间开始表达
PROTACs技术实现从小鼠到恒河猴蛋白水平的快速降解
2月5日，中国科学院生物物理研究所姬广聚课题组与清华大学药学院饶燏课题组及北京大学张秀琴课题组合作在Cell discovery 期刊在线发表了题为A Chemical Approach for Global Protein Knockdown from Mice to Non-human Pr
JEM：去泛素化酶A20能够维持造血干细胞的稳态
造血作用是指由体内血液系统最原始的干细胞向成熟的红细胞以及淋巴细胞分化的过程。 这一过程受到高度严格的调控。当没有刺激时，造血干细胞通常属于"蛰伏"状态，但当收到外界刺激，比如外伤，器官移植，感染等等，造血干细胞将快速进入增殖与分化的状态。造血干细胞产生的子代细胞大致有两个方向：自我更新或定向
研究揭示补体调控肿瘤相关B细胞的双向作用
B细胞是肿瘤微环境的重要组成部分。既往多项重要研究发现，B细胞具有促进肿瘤发生发展的作用。但近期，越来越多的证据表明B细胞在抗肿瘤免疫的产生中有着至关重要的作用。有临床研究发现针对B细胞的利妥昔单抗在实体瘤患者中没有显着疗效；另外，有大型队列研究结果显示B细胞浸润和免疫治疗的效果呈正相关。这一系
一步生成条件性基因敲除小鼠ESC
最近发展的基因组编辑工具，包括转录激活因子样效应物核酸酶（TALENs）和CRISPR/Cas9，使我们能够通过诱导双链断裂（DSBs）的非同源末端连接（NHEJ）修复，快速而有效的敲除靶向基因。然而，这种方法不能进行必需基因的功能研究，这类研究通常采用的策略是基于Cre-LoxP系统的条件性基
Cell－Reports－|－多基因联合调控促进新生毛细胞功能成熟
随着人口的老龄化、现代工业化进程带来的噪音污染等危险因素的加剧，感音神经性聋的患病率呈显著上升的趋势，2019年WHO的统计数据显示全球听力障碍的人数为4.66亿，占全球人口的5%以上。感音神经性聋不仅给病人及其家庭带来生理上和心理上的痛苦，而且给社会和经济发展造成严重影响。尽管遗传、耳毒性药物
我国学者发现肺脏支气管肺泡干细胞具有双向分化潜能
1月7日，国际学术期刊Cell Discovery在线发表了中国科学院分子细胞科学卓越创新中心（生物化学与细胞生物学研究所）周斌研究组的科研成果“Bi-directional differentiation of single bronchioalveolar stem cells durin
两篇Nature子刊文章：甲状腺和糖尿病研究重要进展
来自上海交通大学附属瑞金医院内分泌科的研究人员接连发表两篇Nature Communications文章，获得了甲状腺肿瘤的诊断和糖尿病发病机理方面的重要进展。 第一篇文章首次揭示了新颖信号通路mTORC1参与Beta细胞功能性成熟的维持的机制，对于阐明糖尿病的病理生理机制，并通过维持胰岛功能
基因敲除的不简单论p53基因的重要性
p53基因位于17号染色体p13，全长16-20kb，含有11个外显子，转录2.8kb的mRNA，编码一种分子量为43.7KDa的P53蛋白质，是一种核内磷酸化蛋白。因蛋白条带出现在Marker所示53KDa处，命名为P53。p53基因是人体一种肿瘤抑制基因（tumor suppressor gen
刘光慧研究员Cell－Res发表CRISPR新文章
CRISPR/Cas系统已被证实一种可应用于体内外的强大的基因编辑工具。1月30日，来自中科院生物物理研究所、Salk生物科学研究所等处的研究人员，在《细胞研究》（Cell Research）杂志上发表了题为“Regenerative medicine: targeted genome edit
卵子发生和受精机制研究方面研究取得系列进展
在雌性哺乳动物和人类中，雌性生殖细胞在胎儿期就进入减数分裂，并阻滞在第一次减数分裂前期，外包一层起源于卵巢体细胞的颗粒细胞，共同形成原始卵泡。在雌性动物繁殖过程中，一部分原始卵泡逐渐激活、长大和成熟，最终排卵和受精。在人类，卵母细胞停滞在第一次减数分裂前期可长达十几年到几十年，一个月经周期一般有
基因敲除的不简单论p53基因的重要性
p53基因位于17号染色体p13，全长16-20kb，含有11个外显子，转录2.8kb的mRNA，编码一种分子量为43.7KDa的P53蛋白质，是一种核内磷酸化蛋白。因蛋白条带出现在Marker所示53KDa处，命名为P53。p53基因是人体一种肿瘤抑制基因（tumor suppressor g
无创血压计应用论文：动物用血压计（四）
Ang II-stimulated Cardiac Dysfunction in ARKO Male Mice-We also evaluated the cardiac performance of these mice using echocardiography. Although l
科学家建立基于膜透过荧光蛋白的邻近细胞标记技术
1月3日，《美国国家科学院院刊》（PNAS）发表了中国科学院分子细胞科学卓越创新中心（生物化学与细胞生物学研究所）周斌组和复旦大学附属中山医院教授王立新合作完成的研究成果（Genetic dissection of intercellular interactions in vivo by me
p53基因的重要性
p53基因位于17号染色体p13，全长16-20kb，含有11个外显子，转录2.8kb的mRNA，编码一种分子量为43.7KDa的P53蛋白质，是一种核内磷酸化蛋白。因蛋白条带出现在Marker所示53KDa处，命名为P53。p53基因是人体一种肿瘤抑制基因（tumor suppressor gen
Nat－Neurosci－|－复旦马兰组解密可卡因记忆中的印迹细胞
在1904年德国科学家Richard Semon利用 “印迹（engram）”这一专有名词来描述大脑中记忆的特点。印迹细胞在记忆中的作用越来越受到关注了。研究表明齿状回（DG）中的印迹细胞在特定场景中恐惧记忆提取过程中特定被激活。抑制或敲除印迹细胞可扰乱恐惧记忆的存储，而通过光化学或化学方法人工
器官特异性血管遗传靶向技术及应用（二）
冠状血管内皮细胞中特异性基因操纵心脏特异性血管中的基因敲除VEGFR2（Kdr）在大多数器官的内皮细胞中普遍表达，过去要在冠状动脉中特异性靶向该基因几乎是不可能做到的，因此选择Kdr基因作为靶基因来验证CoER-Cre系统在条件性基因敲除中的应用。通过Kdr flox小鼠与CoEC-Cre（Tie2