抗生素检定用芽孢悬液的制备及注意事项
管碟法是国内外常用的抗生素微生物检定法,利用管碟法测定抗生素效价,具有准确、直观、重复性好等优点,因而被广泛采用。但是整个试验过程中影响结果的因素很多,任何一个环节操作不当或者忽略就会造成很大误差,导致整组试验失败。其中,芽孢悬液的制备就有很多需要注意的地方。 在用管碟法检定抗生素时,需要将菌悬液与培养基混合均匀、覆盖在底层培养基上,以形成抑菌圈。其中,对于菌悬液的制备要求为: 将所用菌的斜面培养物用 1~2 ml 灭菌水洗下,形成菌悬液;将菌悬液在营养琼脂平皿上均匀涂布,置于 35~37℃ 条件下培养 7 天;涂片、染色,镜检芽孢率 ≥ 85% 时,用 10 ml 灭菌水将芽孢和菌体的混合物洗下,制成悬液;65℃ 水浴加热 30 min,杀死菌体,形成有活性的芽孢悬液;冷却、冰箱中保存备用。根据实际操作中的经验,对这一环节需要注意的事项总结如下: 1 应该......阅读全文
抗生素检定用芽孢悬液的制备及注意事项
管碟法是国内外常用的抗生素微生物检定法,利用管碟法测定抗生素效价,具有准确、直观、重复性好等优点,因而被广泛采用。但是整个试验过程中影响结果的因素很多,任何一个环节操作不当或者忽略就会造成很大误差,导致整组试验失败。其中,芽孢悬液的制备就有很多需要注意的地方。 在用管碟法
单细胞悬液制备方法介绍
01取样→预处理 取样是原代单细胞悬液制备非常重要的一步,其质量会直接影响到后续处理效果。 操作时,首先根据不同实验需求麻醉或处死动物后进行消毒、固定并切开相应位置皮肤暴露目的组织。 其次操作过程中有以下几点也需要注意: 严格无菌操作,快速处理; 针对不同组织类型控制环境温度; 保证
培养细胞单细胞悬液的制备
实验材料 胰蛋白酶 细胞 试剂、试剂盒 EDTA·2Na PBS
培养细胞单细胞悬液的制备
实验材料 胰蛋白酶细胞试剂、试剂盒 EDTA·2NaPBS仪器、耗材 离心管实验步骤 一、培养细胞的特征一般细胞培养分为悬浮培养和贴壁培养,由于细胞的增殖有可能形成大小不等的细胞团块或连接成片。如果两个或多个细胞粘连在一块或细胞碎片过多都将影响 FCM 结果,进而导致实验失败。所以,制备合格的培养细
脱落细胞单细胞悬液的制备
食管拉网细胞的单细胞悬液的制备 尿液脱落细胞的单细胞悬液的制备 胸、腹水脱落细胞的制备 冲洗液细胞样品的制备 实验方法原理 在临
培养细胞单细胞悬液的制备
实验材料胰蛋白酶细胞试剂、试剂盒EDTA·2NaPBS仪器、耗材离心管实验步骤一、培养细胞的特征一般细胞培养分为悬浮培养和贴壁培养,由于细胞的增殖有可能形成大小不等的细胞团块或连接成片。如果两个或多个细胞粘连在一块或细胞碎片过多都将影响 FCM 结果,进而导致实验失败。所以,制备合格的培养细胞单细胞
脱落细胞单细胞悬液的制备
实验方法原理 在临床工作中,可以收集到大量自然脱落细胞,这些细胞标本经过简单处理,便可成为较好的单细胞悬液供流式细胞术分析。主要包括脱落细胞、胸腹水细胞、尿液、内镜刷检细胞等。实验材料 细胞试剂、试剂盒 PBS仪器、耗材 尼龙滤网实验步骤 1. 将食管拉网器上的细胞洗脱到 20 ml PBS 液中,
培养细胞单细胞悬液的制备
实验材料 胰蛋白酶 细胞 试剂、试剂盒 EDTA·2Na PBS
脱落细胞单细胞悬液的制备
食管拉网细胞的单细胞悬液的制备 尿液脱落细胞的单细胞悬液的制备 胸、腹水脱落细胞的制备 冲洗液细胞样品的制备 实验方法原理 在临
脾脏单个核细胞悬液如何制备
(1)大鼠断颈处死后,无菌取脾置于消毒平皿中称重;(2)超净工作台上置10cm直径无菌平皿,加入5~10ml D-hanks平衡液 ,置一80目的不锈钢筛于平皿中,脾脏置于筛网中,用剪刀剪碎脾,用5ml玻璃注射器针芯轻轻捻磨脾脏,使分散的细胞滤过金属网进入平皿的液体中, D-hanks冲洗一次;(3
GentleMACS/单细胞悬液制备文献集锦
种属 处理组织 文章名称 human
骨髓细胞单细胞悬液的制备
实验材料骨髓液试剂、试剂盒肝素抗凝剂PBS实验步骤1. 无菌抽取骨髓液 0.5 ml。2. 将骨髓标本滴入含 1000 U/ml 肝素抗凝剂的 1 ml PBS 液中。3. 再加入 PBS 液稀释至 10 mI。4. 用吸管吸取 5 ml 稀释骨髓液徐徐加入盛有 4 ml 的人类淋巴细胞分离液液面之
一定浓度菌悬液的制备
园友Gloria1983,lphare推荐麦氏比浊法。园友loveswh2006 提供的微生物实验指导(黄文芳,张松编著,华南师范大学生命科学学院)在实验15微生物数量的测定中有详细的操作介绍。微生物数量的测定细菌群体生长表现为细胞数目的增加或细胞物质的增加。测定细胞数目的方法有显微镜直接计数法(d
脾脏组织单细胞悬液的制备方法
1. 剪碎法:将组织块放入平皿后,加入少量F液及20%胎牛血清;用眼科剪将组织剪至匀浆状,加入5mlF液及20%胎牛血清;用吸管吸取组织匀浆,用100目不锈钢滤网(另购)过滤到试管内;离心沉淀1500转/分×3 min,再用细胞洗涤液清洗3次,每次以500rpm短时低速离心除去细胞碎片,以200目不
骨髓细胞单细胞悬液的制备
实验材料 骨髓液 试剂、试剂盒 肝素抗凝剂 PBS 实验步骤
骨髓细胞单细胞悬液的制备
实验材料 骨髓液 试剂、试剂盒 肝素抗凝剂 PBS 实验步骤
如何制备新鲜实体组织单细胞悬液
流式细胞术对细胞的各种参数分析必须基于单细胞的基础上,根据不同实体组织成分的特点可选择不同的分散细胞的方 法,以期达到单细胞产量高、细胞损伤小的目的。在实体组织分散为单细胞的过程中,解离的方法有可能瞬间或持久地影响细胞的性质,比如,形态上显而易见的细 胞膜破损,细胞表面上可出现泡状特征,还有一些是难
脱落细胞单细胞悬液的制备——冲洗液细胞样品的制备
实验方法原理在临床工作中,可以收集到大量自然脱落细胞,这些细胞标本经过简单处理,便可成为较好的单细胞悬液供流式细胞术分析。主要包括脱落细胞、胸腹水细胞、尿液、内镜刷检细胞等。实验材料膀胱试剂、试剂盒生理盐水PBS仪器、耗材尼龙网实验步骤1. 用 300~500 ml 生理盐水冲洗膀胱,冲洗一定时间后
脱落细胞单细胞悬液的制备——胸、腹水脱落细胞的制备
实验方法原理在临床工作中,可以收集到大量自然脱落细胞,这些细胞标本经过简单处理,便可成为较好的单细胞悬液供流式细胞术分析。主要包括脱落细胞、胸腹水细胞、尿液、内镜刷检细胞等。实验材料胸、腹水试剂、试剂盒肝素液PBS仪器、耗材尼龙网实验步骤1. 抽取胸、腹水 50~100 ml,加入 1000 U/m
脱落细胞单细胞悬液的制备——食管拉网细胞
实验方法原理在临床工作中,可以收集到大量自然脱落细胞,这些细胞标本经过简单处理,便可成为较好的单细胞悬液供流式细胞术分析。主要包括脱落细胞、胸腹水细胞、尿液、内镜刷检细胞等。实验材料细胞试剂、试剂盒PBS仪器、耗材尼龙滤网实验步骤1. 将食管拉网器上的细胞洗脱到 20 ml PBS 液中,以 150
脱落细胞单细胞悬液的制备——尿液脱落细胞
实验方法原理在临床工作中,可以收集到大量自然脱落细胞,这些细胞标本经过简单处理,便可成为较好的单细胞悬液供流式细胞术分析。主要包括脱落细胞、胸腹水细胞、尿液、内镜刷检细胞等。实验材料尿液试剂、试剂盒生理盐水仪器、耗材尼龙网实验步骤1. 用一清洁器皿收集 24 h 尿液,置 4℃ 冰箱中自然沉淀 2
使用酮康唑悬液的注意事项介绍
服用酮康唑悬液的病人,特别是50岁以上的妇女和有肝病病史,对药物耐受性差,曾服用灰黄霉素及同时服用对肝胖有损害药物的患者,应注意肝损市面上反应,如觉的倦怠伴有发热和黄疸等症状。用灰黄老素治疗的病人,开始用本品前最好停服灰黄霉素一个月。 需服用酮康唑悬液两周以上的患者,治疗前应先做肝功检查,治疗
使用酮康唑混悬液的注意事项
1.下列情况应慎用:胃酸缺乏(可能引起本品的吸收明显减少);酒精中毒(本品可致肝毒性)。 2.在治疗前及治疗期间应定期检查肝功能。血清氨基转移酶的升高可能不伴肝炎症状,然而,如果血清氨基转移酶值持续升高(即使是轻度升高)或加剧,或同时伴有肝毒性症状时均应立即中止本品的治疗。 3.由于酮康唑混
嗜热脂肪芽孢杆菌抑制法原理与程序!
⒈原理:培养基预先混合嗜热脂肪芽孢杆菌芽孢,并含有 pH 指示剂(溴甲酚紫)。加入样品并温浴后,若该样品中不含有抗生素或抗生素的浓度低于检测限,细菌芽孢将在培养基中生长并利用糖产酸,pH 指示剂的紫色变为黄色。相反,如果样品中含有高于检测限的抗生素,则细菌芽孢不会生长,pH 指示剂的颜色保持不变
洗涤液的制备及使用注意事项
洗涤液简称洗液,根据不同的要求有各种不同的洗液 。将较常用的几种介绍如下。 1.强酸氧化剂洗液 强酸氧化剂洗液是用重铬酸甲(K2Cr2O7)和浓硫酸(H2SO4)配成。K2Cr2O7在酸性溶液中,有很强的氧化能力, 对玻璃仪器又及少有侵蚀作用。所以这种洗液在实验室内使用最广泛。 配制浓度各
检定用标准物质使用方法及使用注意事项介绍
检定用标准物质作为测量量值溯源与传递的载体得到了广泛的应用,计量标准物质的合理选择与使用对于确保上述活动的有效性具有重要意义。本规范的主要目的是:从应用的角度促进对标准物质基本概念、属性、作用的理解,指导用户根据使用目的,以正确的方式选择和使用标准物质,并藉此有效地建立测量结果对给定参照对象的计量
嗜热脂肪芽孢杆菌抑制法原理与程序!
嗜热脂肪芽孢杆菌抑制法原理与程序! ⒈原理:培养基预先混合嗜热脂肪芽孢杆菌芽孢,并含有 pH 指示剂(溴甲酚紫)。加入样品并温浴后,若该样品中不含有抗生素或抗生素的浓度低于检测限,细菌芽孢将在培养基中生长并利用糖产酸,pH 指示剂的紫色变为黄色。相反,如果样品中含有高于检测限的抗
组织活检、内镜取材标本单细胞悬液的制备
实验材料 组织试剂、试剂盒 PBS仪器、耗材 剪刀尼龙网实验步骤 1. 取材后立即放入盛少许 PBS 液的青霉素小瓶中。2. 另取一只小烧杯,杯口用 300 目尼龙网盖住,用线绳固定好,并用 PBS 液湿润,取新鲜组织标本置尼龙网上;因标本量较少,尤其是内镜取材至少要取 3 块以上。3. 在操作前,
组织活检、内镜取材标本单细胞悬液的制备
实验材料组织试剂、试剂盒PBS仪器、耗材剪刀尼龙网实验步骤1. 取材后立即放入盛少许 PBS 液的青霉素小瓶中。2. 另取一只小烧杯,杯口用 300 目尼龙网盖住,用线绳固定好,并用 PBS 液湿润,取新鲜组织标本置尼龙网上;因标本量较少,尤其是内镜取材至少要取 3 块以上。3. 在操作前,先将剪刀
《药典》生物制品生产检定用动物细胞基质制备及质量控制
本通则适用于人用生物制品生产用动物细胞基质及检定用动物细胞,包括具有细胞库体系的细胞及原代细胞。细胞基质系指可用于生物制品生产的所有动物或人源的连续传代细胞系、二倍体细胞株及原代细胞。 生产非重组制品所用的细胞基质,系指来源于未经修饰的用于制备其主细胞库的细胞系/株和原代细胞。生产重组制品的细胞基