无需提取直接检测——RealTimePCR
针对客户对实验快速、高效率的需求，Takara不断努力探索。2019年6月，Takara推出无需从粪便、血液、细胞等样本中提取RNA，即可直接检测样本中目的基因的One Step Real Time PCR Premix试剂【PrimeDirect™ Probe RT-qPCR Mix】（Code No. RR650）及【PrimeDirect™ Probe RT-qPCR Mix, with UNG】（Code No. RR651）。同时，该新品接受特殊订制包装及OEM服务。 使用Real Time PCR进行基因检测, 被广泛应用于病毒和病原菌检测、转基因食品检测、遗传病、癌症基因检测等领域。一般首先需要利用专用的试剂盒从待检样品中提取其核酸（DNA or RNA），并经过精制等复杂的操作（通常称为前处理操作）之后才可以进行Real Time PCR。 PrimeDirect™ Probe RT-qPCR Mix，不......阅读全文
Takara定量PCR产品迈入新台阶
实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR，简称qPCR）的出现，极大地简化了定量检测的过程，而且真正实现了绝对定量。多种检测系统的出现，使实验的选择性更强。荧光定量PCR在医学检测及其他各个领域中的应用前景将更加广阔，令人欣喜。 2004年Takara Bio
Takara推出PCR领域的全能酶
幸福的PCR都是相似的，不幸的PCR各有各的不幸。PCR虽说并不是个复杂的过程，但经常会遇到各种各样的问题，比如GC含量过高、片段太长、保真度不够等等。许多DNA聚合酶就是针对这些问题而设计的，以实现“更高更快更强”。然而，PCR扩增的模板千变万化，每次都要换，这确实麻烦。若有一种全能酶，能解决
Takara梯度PCR仪TP系列与同类品牌产品参数对比
仪生仪世（上海）生物科技有限公司是Takara公司PCR仪的代理商，公司团队具有多年的梯度PCR仪销售经验，下表是我们根据多个品牌产品整理的对比资料，严禁转发！ 品牌型号End User Price通量梯度功能操作界面主要特点&其他功能AgilentSureCycler 8800 73500ilab
无需提取－直接检测——Real－Time－PCR
针对客户对实验快速、高效率的需求，Takara不断努力探索。2019年6月，Takara推出无需从粪便、血液、细胞等样本中提取RNA，即可直接检测样本中目的基因的One Step Real Time PCR Premix试剂【PrimeDirect™ Probe RT-qPCR Mix】（Cod
PCR实验常见问答
常见问答Q-1: LA PCR的反应条件? A-1: 因扩增片段的大小、反应体积、使用扩增仪器的不同而不同。◇ 循环次数根据模板DNA的量以及扩增片段的大小，设定25 ~ 30个循环。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，则会出现Smear。 ◇ Anneal以及Extension合适的A
PCR基因扩增
实验概要PCR扩增目标DNA片段。实验原理多聚酶链式反应（polymerase chain reaction, PCR）基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性、退火、延伸三个基本反应步骤构成。 1. 模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃
大片段PCR的注意点
在实验室使用PCR仪进行PCR时，遇到3-5kb以上的大片段DNA时，许多同学的扩增结果往往出现假阴性，条带模糊等不理想的情况。那么对于大片段的DNA进行PCR时要注意哪些？怎样才能得到理想的结果呢？主要从以下方面入手更正：1,确定反应体系各组分的量是否足够（如引物量、模板量，镁离子量等）；2,确定
RT－PCR技术及RNA提取策略2
一般的琼脂糖凝胶电泳，注意不要用甲醛变性电泳（又不是做northern，实在没有必要）。电泳槽注意一定不要用DEPC处理，一定要保证电泳体系中有少量的RNAase存在。分别在加样孔中加入1，2，3μlRNA抽提溶液。在旁边加入DNA marker。1%琼脂糖凝胶，10V/cm的电压，电泳10
RTPCR－PROTOCOL
RT-PCR PROTOCOL材料与方法………………………………………………………… 1．材料 ………………………………………………………1.1 供试用组织(细胞)…………………………………1.2 主要仪器设备………………………………………1.3 主要试剂……………………………………………1.
PCR实验中DNA聚合酶的选择及实验方法
一、 DNA聚合酶的选择实验室常用 DNA聚合酶有三种：TaKaRa TaqTM，TaKaRa EXTaqTM和 PyrobestTMDNA Polymerase。TaKaRaTaqTM是一般的DNA 聚合酶，保真性较差，但价钱便宜，一般用于基因表达的检测等。TaKaRaEXTaqTM是具有 Pro
强强合作研发针对晚期肝脏疾病的细胞治疗方案
2020年2月20日，全球领先的单细胞分离系统提供商美国Namocell公司与Takara Bio及HepaTx联合宣布三方合作研发针对晚期肝脏疾病的细胞治疗方案，将HepaTx研发的可发育成肝脏细胞的脂肪组织内干细胞，首先利用Namocell专有的单细胞分离仪进行分离，然后用Takara Bi
三方合作研发针对晚期肝脏疾病的细胞治疗方案
2020年2月20日，全球领先的单细胞分离系统提供商美国Namocell公司与Takara Bio及HepaTx联合宣布三方合作研发针对晚期肝脏疾病的细胞治疗方案，将HepaTx研发的可发育成肝脏细胞的脂肪组织内干细胞，首先利用Namocell专有的单细胞分离仪进行分离，然后用Takara Bi
从体液中高效提取microRNA
谈到microRNA(miRNA)的提取，大部分试剂盒都是针对哺乳动物细胞和组织，血液的也有，但针对体液的产品，至今好像仍是空白。为此，丹麦 Exiqon公司近日推出了miRCURY™ RNA Isolation Kit C Biofluids，能够从血清、血浆、尿液及其他体液中提取小分
快速TA克隆的突破
快速TA克隆的突破T载体是TA克隆载体的简称，就是利用载体的T末端和PCR产物的A末段连接而将目的基因克隆到载体中的方法。目前市场上常见的T载体，根据连接方法可以分成两种：方法1、以T4连接酶进行连接的方法，这种方法的载体有promega、takara；可以说这两家公司将这两种方法发挥到了很高的水平
RTPCR实验步骤
实验材料：水稻叶片的 RNA 。实验原理：目前 PCR 技术只能扩增 DNA 模板，对 RNA 模板不能直接扩增。mRNA反转录生成的 cDNA 可作为 PCR 的模板进行扩增，这种在 mRNA 反转录后进行的 PCR 扩增称为 RT-PCR 。 RT-PCR 比 Northern 杂交更灵敏，对
各种荧光定量PCR仪的PCR管能互用吗
Axygen生产很多类型的PCR管，很多PCR仪都能在他家找到合适的管子。我们学院Bio-rad、Rotor gene还有Takara的机子都用的Axygen的耗材。不过ABI的就得注意了，听说兼容性是最差的。我们实验室用的是ABI的Step One，当时也想找替代的耗材，毕竟原厂的很贵。但是试了5
科研入门基础实验之qRTPCR
这个假期太长，长的我差点忘了自己之前是做啥课题的，直到和某个zz一起玩公众号，商量着Ta负责生信领域，我负责实验部分，各取所长，想想也未尝不可，那就姑且试试吧。 接下来我开始用力回忆当初最先学的实验是啥？对，是逆转录定量 PCR（qRT-PCR）！ 首先来了解qRT-PCR的流程：提取组织/
Eppendorf授权其热循环仪ZL给予Life－Tech和Alpha－Labs
2015年6月11日，纽约—Eppendorf已授权其保护ZL热循环仪技术给两家公司。 公司授予ZLEP1426110B1包括热循环仪梯度技术给予Thermo Fisher Scientific的子公司Life Tech和Alpha Laboratories，一个位于英格兰汉普郡的实验室耗材、
PCR成分操作和选用的注意事项
1) 水：必须是超纯水。在1.5ml离心管内保存。 (2) Buffer (缓冲液) ? 不同公司，不同的DNA Polymerase，对应不同的Buffer。要清楚的区分。 ? 切记要分装，避免反复冻融。*次从公司买来要分装。一般是1ml。先250微升分装到四个管内。然后取一个管，分装5
PCR实验－延长变性时间对反应有何影响
如果在推荐的变性时间之上再延长，这样好像不太好，在95 °C条件下变性30 Sec一般都能够使模板变性。还有你说的变性是指循环的变性还是预变性？有的热启动酶需要预变性时间比较长，一般3-5 min就够了。变性时间延长会导致酶活性的降低。如用Takara的荧光定量PCR试剂盒时，预变性时间为30sec
3’RACE－实验心得
引子：从06年12月份开始，断断续续做了一个多月的3’RACE，有了一些心得和体会。期间看了很多前辈们分享的经验，受益匪浅。在这里，我就自己的经历略作总结，希望能给像我一样的新人们有点启示，少走些弯路，不当之处欢迎指正。一、试剂盒的选择：3’RACE从原理上就能明白，它比5’RACE 要容易得多，所
Polymerase－Chain－Reaction－(PCR)－to－Amplify－rRNA－Gene－Fragment
Polymerase Chain Reaction (PCR) to Amplify rRNA Gene FragmentPrepare sufficient master mix for both partners (45 mL/50 mL reaction)10 mL 10x PCR buffe
Methods－for－the－Detection－of－DAminoAcid－Oxidase1
AbstractFour methods (an enzyme activity assay, western blotting, RT-PCR, and northern hybridization) to detect the enzyme D-amino-acid oxidase are de
Polymerase－Chain－Reaction－(PCR)－to－Amplify－rRNA－Gene－Fragment
Polymerase Chain Reaction (PCR) to Amplify rRNA Gene FragmentPrepare sufficient master mix for both partners (45 mL/50 mL reaction)10 mL 10x PCR buffe
目的基因片段与载体连接
1．目的学会DNA片段的体外连接技术。2．原理在Mg2+和ATP存在下，T4 DNA连接酶能催化载体分子的粘性末端与外源DNA的相同粘性末端联接成重组DNA分子。3．器材旋涡混合器，微量移液取样器，移液器吸头，1.5ml 微量离心管，双面微量离心管架，台式离心机，干式恒温气浴。易生物仪器库：http
目的基因片段与载体连接
实验概要本实验介绍了目的基因片段与载体连接的操作步骤，有助于学会DNA片段的体外连接技术。实验原理在Mg2 和ATP存在下，T4 DNA连接酶能催化载体分子的粘性末端与外源DNA的相同粘性末端联接成重组DNA分子。主要试剂1. T4 DNA 连接酶2. 连接酶缓冲液3. 无菌ddH2O主要设备1.
cDNA－法推断蛋白质的一级结构实验3
实验方法原理PCR（polymerase chain reaction）作为一种常用的分子生物学实验手段，已非常成熟。各个公司推出了各种高保真和高效率的聚合酶及成套的 PCR 试剂盒，使得 PCR 技术简便而且有效。实验步骤1. 方法的选择：对于两端序列已知的情况，可根据两端序列设计引物，选用普通的
功能基因cDNA3#39;末端的克隆
一．原理(1) 以目的mRNA 为模板，使用Oligo dT-3sites Adaptor Primer 进行反转录反应，合成1st Strand cDNA。(2) 使用含有KpnI、XbaI、BamH I 酶切位点的上游特异性引物和3sites Adaptor Primer进行PCR反应。(3)
PrimeScript－RT－Reagent－Kit反转录PCR实验
实验概要PrimeScript RT Reagent Kit反转录实验主要试剂PrimeScript RT Reagent Kit（Takara）主要设备PCR仪（Roche）实验步骤实验前准备提前打开制冰机反转录反应【SYBR® Green分析法】按表1组份配制 RT 反应液（反应液配制请在冰上进
双酶切连接反应之全攻略
在进行PCR扩增时候，给引物两端设计好酶切位点，一般说来，限制酶的 选择非常重要，尽量选择粘端酶切和 那些酶切效率高的限制酶，如BamHI、HindIII，提前看好各公司的双切酶所用公用的BUFFER，以及各酶在公用BUFFER里的效率。选好酶切位点后，在各个酶的两边加上保护碱基，其原则可