PCRSSP法在HLAB27检测中的应用

摘要 应用序列特异引物聚合酶链反应(PCR-SSP)技术对181例临床标本进行HLA-B27检测,同时作血清学试验。结果:PCR方法和血清学方法分析结果基本相符,PCR分型无假阳性及假阴性,血清学方法1例假阳性及1例假阴性,表明PCR方法灵敏度高、特异性好、准确、较之血清学方法更适合于临床。 关健词 PCR-SSP HLA-B27 人类白细胞抗原B27(HLA-B27),是诊断强直性脊柱炎的指标之一,对强直性脊柱炎的早期诊断和预后以及对类风湿关节炎的鉴别诊断起着极其重要的作用。以前国内大多采用血清学方法对HLA-B27进行检测,近来国内外有报道应用PCR技术对HLA-B27进行检测,具有简便快速,灵敏度高,特异性好,准确等特点。2001年3-6月,我科对全部进行HLA-B27检测的病人运用PCR-SSP法进......阅读全文

PCRSSP分析实验

            根据决定某等位基因的碱基性质,设计3′端第一个碱基分别与各等位基因的特异性碱基相匹配的序列特异性引物,在PCR 反应过程中,只有引物3′端第一个碱基与决定特定等位基因的碱基互补时才能实现DNA 片段的完全复制,根据PCR 产物的有无进行等位基因的分型。

PCRSSP分析实验原理和步骤

PCR 序列特异性引物(sequence specific primer,SSP)分析法是使用能够特异识别特定等位基因的引物通过PCR扩增检测序列多态性的方法,也称作等位基因特异性引物PCR 法。本实验是应用PCR-SSP 法检测MN 基因型。[实验原理]根据决定某等位基因的碱基性质,设计3′端第一

PCRSSP分析实验原理和步骤

PCR 序列特异性引物(sequence specific primer,SSP)分析法是使用能够特异识别特定等位基因的引物通过PCR 扩增检测序列多态性的方法,也称作等位基因特异性引物PCR 法。本实验是应用PCR-SSP 法检测MN 基因型。 [实验原理] 根据决定某等位基因的碱基性质,

PCRSSP分析实验原理和步骤

 PCR 序列特异性引物(sequence specific primer,SSP)分析法是使用能够特异识别特定等位基因的引物通过PCR 扩增检测序列多态性的方法,也称作等位基因特异性引物PCR 法。本实验是应用PCR-SSP 法检测MN 基因型。[实验原理]根据决定某等位基因的碱基性质,设计3′端

HLA基因分型方法:PCR-SSP法

PCR-SSP法1)提取DNA同前RFLP法 2)PCR扩增操作方法基本同PCR-RFLP,但引物是根据各等位基因的核苷酸序列设计的特异性引物,主要是针对第二外显子区域的多态性,用SSP扩增出来的产物具等位基因特异性。 3)凝胶电泳取PCR扩增的产物与上样缓冲液混合,加入2%琼脂糖凝胶加样孔中,其内

PCRSSP法在HLAB27检测中的应用

人类白细胞抗原B27(HLA-B27),是诊断强直性脊柱炎的指标之一,对强直性脊柱炎的早期诊断和预后以及对类风湿关节炎的鉴别诊断起着极其重要的作用。以前国内大多采用血清学方法对HLA-B27进行检测,近来国内外有报道应用PCR技术对HLA-B27进行检测,具有简便快速,灵敏度高,特异性好,准确等特点

PCRSSP法在HLAB27检测中的应用

人类白细胞抗原B27(HLA-B27),是诊断强直性脊柱炎的指标之一,对强直性脊柱炎的早期诊断和预后以及对类风湿关节炎的鉴别诊断起着极其重要的作用。以前国内大多采用血清学方法对HLA-B27进行检测,近来国内外有报道应用PCR技术对HLA-B27进行检测,具有简便快速,灵敏度高,特异性好,准确等特点

PCRSSP法在HLAB27检测中的应用

摘要 应用序列特异引物聚合酶链反应(PCR-SSP)技术对181例临床标本进行HLA-B27检测,同时作血清学试验。结果:PCR方法和血清学方法分析结果基本相符,PCR分型无假阳性及假阴性,血清学方法1例假阳性及1例假阴性,表明PCR方法灵敏度高、特异性好、准确、较之血清学方法更适合于临床。 关健

PCRSSP在造血干细胞移植配型中的应用

  人类白细胞抗原(HLA)系统是一组组成和结构都非常复杂的基因复合体。HLA分型首先采用血清学方法,现在DNA分型是常规方法。我们采用序列特异性引物(PCR-SSP)技术对HLA-Ⅰ类基因进行分型,现报告如下。   1  材料与方法   1.1  样本    青岛地区拟进行造血干细胞移植的20例恶

人类血小板抗原1~4系统基因分型

关键词: PCR-SSP;人类血小板抗原;基因分型 摘要 目的:建立人类血小板抗原1~4系统序列特异性引物(PCR-SSP)分型方法。方法:合成14条引物,采用PCR-SSP方法对25名健康献血者的HPA-1~4系统进行基因分型;分型结果与采用等位基因特异性寡核苷酸点杂交(PCR-ASO)获得的

基因芯片技术在肾移植组织配型中的应用

为了比较基因芯片和特异性聚合酶链反应(PCR-SSP)两种HLA-DR分型方法,探讨适用于肾移植供、受者分型的新方法。研究者对60份肾移植供、受者的DNA样本同时采用基因芯片和PCR-SSP进行HLA-DR分型,并进行分析比较。结果60例样本的两种分型方法结果完全一致56份,相同率达93%。结果不相

人类血小板抗原1~4系统基因分型

迄今,国际上已报道了9个血小板特异性抗原系统,包括人类血小板抗原(HPA)系统1~8以及Naka抗原。这些抗原都是在血小板输注和怀孕介导的同种免疫过程中被发现的。在现代临床输血工作中,为了能给新生儿同种免疫血小板减少症(NAITP)、输血后紫癜(PTP)以及血小板输注无效(PTR)等患者提供正确、及

关于HLA分型的DNA分型方法介绍

  DNA分型主要分为两种方法:基于核酸序列识别的方法和基于序列分子构型的方法,常用的方法大致可分为大类:  ①限制性片段长度多态性分析(restriction fragment length polymorphism,RFP)。其原理是不同的DNA膜板山于序列的差异在限制性内切酶作用下将被切成大小

HLAB27检测方法的分析与对比

王向东江苏南通良春中医医院随着网络及媒体的发展,强直性脊柱炎(AS)也越来越多地出现在我们的视野中。从一些著名的演艺明星,到一些普通的患者,都在经历着病痛的折磨。HLA-B27(人类白细胞抗原B27),是强直性脊柱炎(AS)实验室检查的重要指标,在强直性脊柱炎患者中阳性率高达90%。今天,我们从检验

sbt做hla基因分型分析怎么做

sbt做hla基因分型分析怎么做HLA系统研究从70年代到80年代末期主要是血清学研究;90年代以来,HLA进入了分子水平研究阶段。HLA分型技术同样走过了这一历程。建立于60年代的血清学及细胞学分型技术主要侧重于分析HLA产物特异性。1991年第11届国际HLA专题讨论上提出了HLA的DNA分型方

关于HLA分型的技术发展介绍

  HLA系统研究从70年代到80年代末期主要是血清学研究,90年代以来,HLA进入了分子水平研究阶段。HLA分型技术同样走过了这一历程。建立于60年代的血清学及细胞学分型技术主要侧重于分析HLA产物特异性。1991年第11届国际HLA专题讨论上提出了HLA的DNA分型方法,随着测序技术的突飞猛进,

细胞株HLAA*02检测方法

方法1、抗体测定:研究对象取200μl新鲜抗凝全血,每管100μl加入流式细胞仪检测管中,再加入2ml红细胞裂解液反应12min后离心,弃上清液,磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline, PBS)洗细胞两次,其中反应管加入鼠抗人HLA-A*02抗体××μl(达科为公司),4

临床化学检查方法介绍抑癌基因Rb介绍

抑癌基因Rb介绍:  抑癌基因Rb基因是第一个被克隆的抑癌基因,最初发现于儿童的视网膜母细胞瘤(retinoblestoma),因此称为Rb基因, Rb基因定位于人类13号染色体q14,全长200kb,有27个外显子,26个内含子,编码具有928个氨基酸残基 (p105)。Rb基因的抗癌性有两种含义

免疫学实验抑癌基因Rb介绍

  抑癌基因Rb介绍:  抑癌基因Rb基因是第一个被克隆的抑癌基因,最初发现于儿童的视网膜母细胞瘤(retinoblestoma),因此称为Rb基因, Rb基因定位于人类13号染色体q14,全长200kb,有27个外显子,26个内含子,编码具有928个氨基酸残基 (p105)。Rb基因的抗癌性有两种

真假“熊猫血”

“熊猫血”这个词大家都听说过,在之前的介绍中我们已经了解了,它是指人体一种血型——Rh阴性血,这种血型的人群在我国比例很小,因为它的这种稀有性故被称为“熊猫血”。但是在工作中,我们还会遇到一些更为特殊的患者,他们的血型处于界定“熊猫血”的边缘,血型鉴定更为特殊,这就是我们接下来要介绍的Rh血型系统D

HLA分型技术

HLA分型技术主要组织相容性复合物(MHC)是脊椎动物体内最复杂且具有高度多态性的基因群。1984年George Snell 首次发现小鼠MHC即H-2,1958年Dausset 发现了人的MHC即HLA基因。MHC的表达产物称为主要组织相容性抗原,MHC抗原是有核细胞表面膜蛋白分子,对抗原递呈和免

组织相溶性抗原基因分型中三种DNA快速抽提法比较

血液DNA抽提的质量和速度是影响组织相溶性抗原(HLA)基因分型效果的一个主要因素,目前普遍采用的标准酚-氯仿抽提法,因耗时较长,难以满足临床需求。为此,我们建立了NP-40法及辛酸法,进一步缩短时间,简化了操作步骤。现将NP-40法、辛酸法与标准酚-氯仿抽提法对比研究结果报告如下。一、资料和方法本

基因多态性的检测方法

1.限制性片段长度多态性(Restriction Fragment Length Polymorphism,RFLP):由DNA 的多态性,致使DNA 分子的限制酶切位点及数目发生改变,用限制酶切割基因组时,所产生的片段数目和每个片段的长度就不同,即所谓的限制性片段长度多态性,导致限制片段长度发生改

应用多重PCR方法鉴定RHD基因型的研究(2)

  2结果  2.1多重PCR方法的反应结果应用多重PCR方法可以鉴定不同的RHD基因型(图2)。根据扩增条带判断结果,D/d型:目标条带为3条,分别为208bp、263bp和1920bp;d/d型:目标条带为2条,分别为208bp和1920bp;D/D型:目标条带为2条,分别为208bp和263b

PCR基因芯片上荧光PCR反应的研究(五)

3.讨论  随着近年基因芯片技术的发展,研究者逐渐认识到基于核酸杂交原理的传统基因芯片缺陷与应用的局限性。随着PCR技术的进展,特别是荧光定量PCR技术的出现PCR技术已成为生物医学领域中应用最广泛的技术。如果一种基因芯片能直接进行PCR反应,而且能够同时扩增大批可能发生变异的基因显然会有广泛

基因多态性的检测方法概述

多态性(polymorphism)是指处于随机婚配的群体中,同一基因位点可存在2种以上的基因型。在人群中,个体间基因的核苷酸序列存在着差异性称为基因(DNA)的多态性(gene polymorphism)。这种多态性可以分为两类,即DNA位点多态性(site polymorphism)和长度多态性

基因多态性的检测方法

多态性(polymorphism)是指处于随机婚配的群体中,同一基因位点可存在2种以上的基因型。在人群中,个体间基因的核苷酸序列存在着差异性称为基因(DNA)的多态性(gene polymorphism)。这种多态性可以分为两类,即DNA位点多态性(site polymorphism)和长度多态性

3300万!首都儿研所公开招标一批临床检测用试剂

  采购一批临床检测用试剂,采购预算3308.304 万元。采购项目包括血小板聚集功能检测试剂盒(光学比浊法)、结核分枝杆菌特异性细胞免疫反应检测试剂盒(酶联免疫斑点法)、降钙素原检测试剂盒(时间分辨荧光免疫法)、巨细胞病毒IgM抗体检测试剂盒(化学发光法)、七项呼吸道病原体核酸检测试剂盒 (双扩增

3308万,临床检测用试剂采购项目公开招标

  项目概况  临床检测用试剂采购项目,招标项目的潜在投标人应在北京市政府采购电子交易平台获取招标文件,并于2024-02-07 09:30(北京时间)前递交投标文件。  一、项目基本情况  项目编号:11000023210200070751-XM001  项目名称:临床检测用试剂采购项目  预算金