PCRSSP法在HLAB27检测中的应用
人类白细胞抗原B27（HLA-B27），是诊断强直性脊柱炎的指标之一，对强直性脊柱炎的早期诊断和预后以及对类风湿关节炎的鉴别诊断起着极其重要的作用。以前国内大多采用血清学方法对HLA-B27进行检测，近来国内外有报道应用PCR技术对HLA-B27进行检测，具有简便快速，灵敏度高，特异性好，准确等特点。2001年3-6月，我科对全部进行HLA-B27检测的病人运用PCR-SSP法进行检测的同时，也进行了血清学检测，现报告如下： 1. 材料与方法 1. 1材料 1.1.1引物特异性引物有2个。B27引物序列为：P1 51-CAG,TCT,GTG,CCT,TGG,CGT,TGC;P251-GGC,TAC,GTG,GAC,ACG,CT.PC产物为144bp.51-TCA,CGG,ATT,TCT,GTT,GTG,TTT,PCR产物429 bp.以上引物由美国G&T Biotecli公司提供。1.1......阅读全文
HLA基因分型方法：PCR－SSP法
PCR－SSP法1）提取DNA同前RFLP法 2）PCR扩增操作方法基本同PCR-RFLP，但引物是根据各等位基因的核苷酸序列设计的特异性引物，主要是针对第二外显子区域的多态性，用SSP扩增出来的产物具等位基因特异性。 3）凝胶电泳取PCR扩增的产物与上样缓冲液混合，加入2％琼脂糖凝胶加样孔中，其内
PCRSSP分析实验
根据决定某等位基因的碱基性质，设计3′端第一个碱基分别与各等位基因的特异性碱基相匹配的序列特异性引物，在PCR 反应过程中，只有引物3′端第一个碱基与决定特定等位基因的碱基互补时才能实现DNA 片段的完全复制，根据PCR 产物的有无进行等位基因的分型。
PCRSSP法在HLAB27检测中的应用
人类白细胞抗原B27（HLA-B27），是诊断强直性脊柱炎的指标之一，对强直性脊柱炎的早期诊断和预后以及对类风湿关节炎的鉴别诊断起着极其重要的作用。以前国内大多采用血清学方法对HLA-B27进行检测，近来国内外有报道应用PCR技术对HLA-B27进行检测，具有简便快速，灵敏度高，特异性好，准确等特点
PCRSSP法在HLAB27检测中的应用
摘要 应用序列特异引物聚合酶链反应（PCR-SSP）技术对181例临床标本进行HLA-B27检测，同时作血清学试验。结果：PCR方法和血清学方法分析结果基本相符，PCR分型无假阳性及假阴性，血清学方法1例假阳性及1例假阴性，表明PCR方法灵敏度高、特异性好、准确、较之血清学方法更适合于临床。 关健
PCRSSP法在HLAB27检测中的应用
人类白细胞抗原B27（HLA-B27），是诊断强直性脊柱炎的指标之一，对强直性脊柱炎的早期诊断和预后以及对类风湿关节炎的鉴别诊断起着极其重要的作用。以前国内大多采用血清学方法对HLA-B27进行检测，近来国内外有报道应用PCR技术对HLA-B27进行检测，具有简便快速，灵敏度高，特异性好，准确等特点
PCRSSP分析实验原理和步骤
PCR 序列特异性引物（sequence specific primer,SSP）分析法是使用能够特异识别特定等位基因的引物通过PCR 扩增检测序列多态性的方法，也称作等位基因特异性引物PCR 法。本实验是应用PCR-SSP 法检测MN 基因型。 [实验原理] 根据决定某等位基因的碱基性质，
PCRSSP分析实验原理和步骤
PCR 序列特异性引物（sequence specific primer,SSP）分析法是使用能够特异识别特定等位基因的引物通过PCR扩增检测序列多态性的方法，也称作等位基因特异性引物PCR 法。本实验是应用PCR-SSP 法检测MN 基因型。[实验原理]根据决定某等位基因的碱基性质，设计3′端第一
PCRSSP分析实验原理和步骤
PCR 序列特异性引物（sequence specific primer,SSP）分析法是使用能够特异识别特定等位基因的引物通过PCR 扩增检测序列多态性的方法，也称作等位基因特异性引物PCR 法。本实验是应用PCR-SSP 法检测MN 基因型。[实验原理]根据决定某等位基因的碱基性质，设计3′端
PCRSSP在造血干细胞移植配型中的应用
人类白细胞抗原(HLA)系统是一组组成和结构都非常复杂的基因复合体。HLA分型首先采用血清学方法，现在DNA分型是常规方法。我们采用序列特异性引物(PCR-SSP)技术对HLA-Ⅰ类基因进行分型，现报告如下。 1 材料与方法 1.1 样本 青岛地区拟进行造血干细胞移植的20例恶
人类血小板抗原1～4系统基因分型
关键词： PCR-SSP；人类血小板抗原；基因分型 摘要 目的：建立人类血小板抗原1～4系统序列特异性引物（PCR-SSP）分型方法。方法：合成14条引物，采用PCR-SSP方法对25名健康献血者的HPA-1～4系统进行基因分型；分型结果与采用等位基因特异性寡核苷酸点杂交（PCR-ASO）获得的
基因芯片技术在肾移植组织配型中的应用
为了比较基因芯片和特异性聚合酶链反应(PCR-SSP)两种HLA-DR分型方法，探讨适用于肾移植供、受者分型的新方法。研究者对60份肾移植供、受者的DNA样本同时采用基因芯片和PCR-SSP进行HLA-DR分型，并进行分析比较。结果60例样本的两种分型方法结果完全一致56份，相同率达93%。结果不相
人类血小板抗原1～4系统基因分型
迄今，国际上已报道了9个血小板特异性抗原系统，包括人类血小板抗原（HPA）系统1～8以及Naka抗原。这些抗原都是在血小板输注和怀孕介导的同种免疫过程中被发现的。在现代临床输血工作中，为了能给新生儿同种免疫血小板减少症（NAITP）、输血后紫癜（PTP）以及血小板输注无效（PTR）等患者提供正确、及
HLAB27检测方法的分析与对比
王向东江苏南通良春中医医院随着网络及媒体的发展，强直性脊柱炎（AS）也越来越多地出现在我们的视野中。从一些著名的演艺明星，到一些普通的患者，都在经历着病痛的折磨。HLA-B27（人类白细胞抗原B27），是强直性脊柱炎（AS）实验室检查的重要指标，在强直性脊柱炎患者中阳性率高达90%。今天，我们从检验
关于HLA分型的DNA分型方法介绍
DNA分型主要分为两种方法：基于核酸序列识别的方法和基于序列分子构型的方法，常用的方法大致可分为大类： ①限制性片段长度多态性分析(restriction fragment length polymorphism，RFP)。其原理是不同的DNA膜板山于序列的差异在限制性内切酶作用下将被切成大小
sbt做hla基因分型分析怎么做
sbt做hla基因分型分析怎么做HLA系统研究从70年代到80年代末期主要是血清学研究；90年代以来，HLA进入了分子水平研究阶段。HLA分型技术同样走过了这一历程。建立于60年代的血清学及细胞学分型技术主要侧重于分析HLA产物特异性。1991年第11届国际HLA专题讨论上提出了HLA的DNA分型方
关于HLA分型的技术发展介绍
HLA系统研究从70年代到80年代末期主要是血清学研究，90年代以来，HLA进入了分子水平研究阶段。HLA分型技术同样走过了这一历程。建立于60年代的血清学及细胞学分型技术主要侧重于分析HLA产物特异性。1991年第11届国际HLA专题讨论上提出了HLA的DNA分型方法，随着测序技术的突飞猛进，
bradford法和lowry法是什么法
bradford和lowry两者都是生物检验的化学试剂。 bradford法，也称考马斯蓝染色法（coomassie blue staining）。考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离态下呈红色，当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色，前者最大光吸收在
bradford法和lowry法是什么法
bradford和lowry两者都是生物检验的化学试剂。 bradford法，也称考马斯蓝染色法（coomassie blue staining）。考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离态下呈红色，当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色，前者最大光吸收在
免疫学实验抑癌基因Rb介绍
抑癌基因Rb介绍： 抑癌基因Rb基因是第一个被克隆的抑癌基因，最初发现于儿童的视网膜母细胞瘤(retinoblestoma),因此称为Rb基因， Rb基因定位于人类13号染色体q14，全长200kb，有27个外显子，26个内含子，编码具有928个氨基酸残基 (p105)。Rb基因的抗癌性有两种
临床化学检查方法介绍抑癌基因Rb介绍
抑癌基因Rb介绍： 抑癌基因Rb基因是第一个被克隆的抑癌基因，最初发现于儿童的视网膜母细胞瘤(retinoblestoma),因此称为Rb基因， Rb基因定位于人类13号染色体q14，全长200kb，有27个外显子，26个内含子，编码具有928个氨基酸残基 (p105)。Rb基因的抗癌性有两种含义
细胞株HLAA*02检测方法
方法1、抗体测定：研究对象取200μl新鲜抗凝全血，每管100μl加入流式细胞仪检测管中，再加入2ml红细胞裂解液反应12min后离心，弃上清液，磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline, PBS)洗细胞两次，其中反应管加入鼠抗人HLA-A*02抗体××μl（达科为公司），4
沉淀法、过滤法、蒸馏法的区别
一沉淀法：固液分离。有时为了加速沉淀，可以加入一些凝聚剂，如明矾、活性炭等。二过滤法：固液分离。但是固体必须是不溶于水的才行。三蒸馏法：液液分离。利用沸点不同，沸点低的先蒸馏出来，沸点高的后蒸馏出来。
外标法与内标法
一、内标法 什么叫内标法？怎样选择内标物？ 内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时，加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响，以提高分析结果的准确度。 内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时，在样品中加入一定量的标准物质
内标法与外标法
一、内标法 什么叫内标法?怎样选择内标物? 内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时，加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响，以提高分析结果的准确度。 内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时，在样品中加入一定量的标准物质，它可被
Folin—酚试剂法（Lowry法）
实验概要本文介绍了Folin—酚试剂法（Lowry法）测定蛋白质的实验原理、操作步骤及注意事项等。实验原理这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法，由于其试剂乙的配制较为困难，近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的，只是加入了第二种试剂，即Fol
气相法液相法固相法优缺点
气相法液相法固相法优点：分离效率高，分析速度快，样品用量少和检测灵敏度高。选择性好，可分离、分析恒沸混合物，沸点相近的物质，某些同位素，顺式与反式异构体邻、间、对位异构体，旋光异构体等。气相法液相法固相法缺点：分析成本高，液相色谱仪价格及日常维护费用贵，分析时间一般比气相长。检测器气相色谱法中可以使
色谱定量方法：标准加入法内标法外标法
色谱分析的重要作用之一是对样品定量。而色谱法定量的依据是：组分的重量或在载气中的浓度与检测器的响应信号成正比。常见定量分析方法分为面积归一化法、内标法、外标法等。大家常常容易傻傻分不清楚的莫过于内标法、外标法了。 以内标法为例，选一与欲测组分相近但能完全分离的组分做内标物（当然是样品中没有的组
峰面积归一法、内标法、外标法区别
色谱定量分析方法可以分为外标法、内标法、归一化法三大类。当能够精确进样量的时候，通常采用外标法进行定量。这种方法标准物质单独进样分析，从而确定待测组分的校正因子；实际样品进样分析后依据此校正因子对待测组分色谱峰进行计算得出含量。其特点是标准物质和未知样品分开进样，虽然看上去是二次进样，但实际上未知样
可见异物检查法第一法(灯检法)
取规定量供试品,除去容器标签,擦净容器外壁,必要时将药液转移至洁净透明的适宜容器内,将供试品置遮光板边缘处,在明视距离(指供试品至人眼的清晰观测距离,通常为25cm),手持容器颈部,轻轻旋转和翻转容器(但应避免产生气泡),使药液中可能存在的可见异物悬浮,分别在黑色和白色背景下目视检查,重复观察,总检
各显神通！浅谈归一化法、内标法、外标法及标准加入法
面积归一法、内标法、外标法、标准加入法。这么多定量法，用哪一种呢？每一种的适用范围是什么呢？其优缺点又是什么？其标准物又有什么要求呢？看完你就都知道了。 1、归一化法 把所有出峰的组分含量之和按100%计的定量方法，称为归一化法，各成分校正因子一致时可用该法。 归一化法的优点： 该法简便